本发明涉及分析检测，更具体地，涉及一种羧酸盐的检测方法及其应用。
背景技术：
1、叔丁基4-[(2r,3s,4s,5r)-2,3,4-三苄氧基-5-(苄氧甲基)-6-(2,2-二甲基丙酰氧基)-5-羟基-己酰基]哌嗪-1-羧酸盐的结构如下式(ⅰ)所示，该产品是荣格列净的重要中间体，其纯度以及未知单杂含量直接影响产品的纯度、杂质的大小，从而直接影响该药物疗效。
2、
3、目前，还未发现叔丁基4-[(2r,3s,4s,5r)-2,3,4-三苄氧基-5-(苄氧甲基)-6-(2,2-二甲基丙酰氧基)-5-羟基-己酰基]哌嗪-1-羧酸盐的纯度检测方法的相关文献及报道，为了加强叔丁基4-[(2r,3s,4s,5r)-2,3,4-三苄氧基-5-(苄氧甲基)-6-(2,2-二甲基丙酰氧基)-5-羟基-己酰基]哌嗪-1-羧酸盐的质量控制，亟需开发一种叔丁基4-[(2r,3s,4s,5r)-2,3,4-三苄氧基-5-(苄氧甲基)-6-(2,2-二甲基丙酰氧基)-5-羟基-己酰基]哌嗪-1-羧酸盐的检测方法。
技术实现思路
1、本发明旨在至少解决上述现有技术中存在的技术问题之一。为此，本发明提出一种羧酸盐的检测方法及其应用，能够简便、准确、快速地将叔丁基4-[(2r,3s,4s,5r)-2,3,4-三苄氧基-5-(苄氧甲基)-6-(2,2-二甲基丙酰氧基)-5-羟基-己酰基]哌嗪-1-羧酸盐检测及其杂质进行有效分离，并检测出含量，以保留时间定性，峰面积定量。
2、本发明的第一方面提供一种羧酸盐的检测方法。
3、具体地，一种羧酸盐的检测方法，所述羧酸盐为叔丁基4-[(2r,3s,4s,5r)-2,3,4-三苄氧基-5-(苄氧甲基)-6-(2,2-二甲基丙酰氧基)-5-羟基-己酰基]哌嗪-1-羧酸盐，采用液相色谱进行检测，所述液相色谱的流动相包括流动相a和流动相b，所述流动相a为氨水溶液，所述流动相b为乙腈。
4、本发明利用液相色谱检测叔丁基4-[(2r,3s,4s,5r)-2,3,4-三苄氧基-5-(苄氧甲基)-6-(2,2-二甲基丙酰氧基)-5-羟基-己酰基]哌嗪-1-羧酸盐及其杂质的含量，并采用氨水溶液作为流动相a，乙腈作为流动相b，有助于改善分离效果，且操作方便简洁；用0.01％氨水溶液做流动相，能改善峰型。
5、优选地，所述氨水溶液的质量分数为0.001-0.1％。
6、更优选地，所述氨水溶液的质量分数为0.01％。
7、优选地，所述液相色谱采用的色谱柱为十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱(c18)。
8、更优选地，所述液相色谱采用的色谱柱的规格为4.6*250mm，5μm。
9、优选地，所述液相色谱采用梯度洗脱。
10、优选地，所述梯度洗脱的程序为：
11、0-8分钟，所述流动相a的体积分数为40-60％，所述流动相b的体积分数为40-60％；
12、8-15分钟，所述流动相a的体积分数为10-30％，所述流动相b的体积分数为70-90％；
13、15-35分钟，所述流动相a的体积分数为4-6％，所述流动相b的体积分数为94-96％；
14、35-35.1分钟，所述流动相a的体积分数为4-6％，所述流动相b的体积分数为94-96％；
15、35.1-39分钟，所述流动相a的体积分数为40-60％，所述流动相b的体积分数为40-60％。
16、流动相a和流动相b以一定比例进行梯度洗脱，可以改善分离效果。
17、更优选地，所述梯度洗脱的程序为：
18、0-8分钟，所述流动相a的体积分数为50％，所述流动相b的体积分数为50％；
19、8-15分钟，所述流动相a的体积分数为20％，所述流动相b的体积分数为80％；
20、15-35分钟，所述流动相a的体积分数为5％，所述流动相b的体积分数为95％；
21、35-35.1分钟，所述流动相a的体积分数为5％，所述流动相b的体积分数为95％；
22、35.1-39分钟，所述流动相a的体积分数为50％，所述流动相b的体积分数为50％。
23、优选地，所述采用液相色谱进行检测，包括如下步骤：
24、配制空白溶液；
25、取供试品配制供试品溶液；
26、将所述空白溶液采用液相色谱进行检测，得到色谱图a；
27、将所述供试品溶液采用液相色谱进行检测，得到色谱图b；
28、然后利用色谱图b扣除色谱图a的色谱峰后，计算叔丁基4-[(2r,3s,4s,5r)-2,3,4-三苄氧基-5-(苄氧甲基)-6-(2,2-二甲基丙酰氧基)-5-羟基-己酰基]哌嗪-1-羧酸盐的纯度和杂质含量。
29、优选地，所述液相色谱的色谱柱的柱温为25-35℃。
30、更优选地，所述液相色谱的色谱柱的柱温为30℃。
31、优选地，所述液相色谱的检测器为紫外检测器。
32、优选地，所述液相色谱的稀释液为乙腈。
33、优选地，所述液相色谱的检测波长为200-220nm。
34、更优选地，所述液相色谱的检测波长为210nm。
35、优选地，所述液相色谱的进样量为5-15μl。
36、更优选地，所述液相色谱的进样量为10μl。
37、优选地，所述液相色谱的流速为0.5-2.0ml/min。
38、更优选地，所述液相色谱的流速为1.0ml/min。
39、优选地，所述液相色谱的定量方法为面积归一化法。
40、本发明的第二方面提供一种羧酸盐检测方法的应用。
41、一种上述的检测方法在制备叔丁基4-[(2r,3s,4s,5r)-2,3,4-三苄氧基-5-(苄氧甲基)-6-(2,2-二甲基丙酰氧基)-5-羟基-己酰基]哌嗪-1-羧酸盐或制备药物中的应用。
42、相对于现有技术，本发明的有益效果如下：
43、(1)本发明利用液相色谱检测叔丁基4-[(2r,3s,4s,5r)-2,3,4-三苄氧基-5-(苄氧甲基)-6-(2,2-二甲基丙酰氧基)-5-羟基-己酰基]哌嗪-1-羧酸盐及其杂质的含量，并采用氨水溶液作为流动相a，乙腈作为流动相b，有助于改善分离效果，且操作方便简洁；用氨水溶液做流动相，能改善峰型；
44、(2)本发明的检测方法能够将叔丁基4-[(2r,3s,4s,5r)-2,3,4-三苄氧基-5-(苄氧甲基)-6-(2,2-二甲基丙酰氧基)-5-羟基-己酰基]哌嗪-1-羧酸盐及其杂质有效分离，并且准确地检测出叔丁基4-[(2r,3s,4s,5r)-2,3,4-三苄氧基-5-(苄氧甲基)-6-(2,2-二甲基丙酰氧基)-5-羟基-己酰基]哌嗪-1-羧酸盐及其杂质的含量，能够应用于叔丁基4-[(2r,3s,4s,5r)-2,3,4-三苄氧基-5-(苄氧甲基)-6-(2,2-二甲基丙酰氧基)-5-羟基-己酰基]哌嗪-1-羧酸盐的制备过程中，以及药物的制备过程中，对叔丁基4-[(2r,3s,4s,5r)-2,3,4-三苄氧基-5-(苄氧甲基)-6-(2,2-二甲基丙酰氧基)-5-羟基-己酰基]哌嗪-1-羧酸盐的含量进行监控。
1.一种羧酸盐的检测方法，其特征在于，所述羧酸盐为叔丁基4-[(2r,3s,4s,5r)-2,3,4-三苄氧基-5-(苄氧甲基)-6-(2,2-二甲基丙酰氧基)-5-羟基-己酰基]哌嗪-1-羧酸盐，采用液相色谱进行检测，所述液相色谱的流动相包括流动相a和流动相b，所述流动相a为氨水溶液，所述流动相b为乙腈。
2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述氨水溶液的质量分数为0.001-0.1％。
3.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述液相色谱采用的色谱柱为十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱及其等同的色谱柱。
4.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述液相色谱采用梯度洗脱。
5.根据权利要求4所述的检测方法，其特征在于，所述梯度洗脱的程序为：
6.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述采用液相色谱进行检测，包括如下步骤：
7.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述液相色谱的色谱柱的柱温为25-35℃。
8.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述液相色谱的检测器为紫外检测器。
9.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述液相色谱的稀释液为乙腈。
10.权利要求1-9任一项所述的检测方法在制备叔丁基4-[(2r,3s,4s,5r)-2,3,4-三苄氧基-5-(苄氧甲基)-6-(2,2-二甲基丙酰氧基)-5-羟基-己酰基]哌嗪-1-羧酸盐或制备药物中的应用。
