本发明涉及保健品，尤其是涉及一种载体组合、载药外泌体的制备方法、载药外泌体及其应用。
背景技术：
1、烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(β-nicotinamide adenine dinucleotide，nad+)代谢干预活性物质(如nmn、na、nr、nad等)通过维持细胞内充足的nad+，可以保持dna的自我修复能力，使年龄增长带来的dna损伤得以有效修复，从而抑制衰老。然而，传统的方案中，nad+代谢干预活性物质一般通过口服的方式给药，这种方式利用率低且靶向性差。
2、外泌体作为药物载体进行药物运输时，向细胞转运药物的效率高，具有一定的靶向性。
3、然而，目前尚未有运载nad+代谢干预活性物质的外泌体的报道。
技术实现思路
1、基于此，有必要提供一种用于制备载药外泌体的载体组合。
2、此外，还有必要提供一种可以用于解决上述问题的载药外泌体的制备方法。
3、此外，还有必要提供一种上述载药外泌体的制备方法制备的载药外泌体及其应用。
4、一种载体组合，用于制备载药外泌体，包括重组载体和辅助载体，所述重组载体内插入有转运蛋白表达基因，所述转运蛋白表达基因用于表达用于转运nad+代谢干预活性物质的转运蛋白。
5、在一个实施例中，所述转运蛋白选自nmn转运子、na转运子、nr转运子和nad转运子中的至少一种。
6、在一个实施例中，所述转运蛋白表达基因为用于表达nmn转运子的slc12a8基因，所述转运蛋白表达基因的序列如seq id no.1所示。
7、在一个实施例中，所述重组载体内还插入有红色荧光蛋白表达基因和嘌呤霉素表达基因，所述红色荧光蛋白表达基因的序列如seq id no.2所示。
8、在一个实施例中，所述重组载体为plv3-cmv-mcs-puro，所述辅助载体为pmd.2g和pspax。
9、一种载药外泌体的制备方法，包括如下步骤：
10、提供上述的载体组合；
11、将所述载体组合转染293t细胞，构建表达转运蛋白的慢病毒；
12、提供脂肪干细胞，用所述表达转运蛋白的慢病毒转染所述脂肪干细胞，得到表达所述转运蛋白的所述脂肪干细胞；
13、用添加了刺激剂的培养基对表达所述转运蛋白的所述脂肪干细胞进行培养，培养完成后收集培养上清液；
14、从所述培养上清液中分离得到外泌体，所述外泌体携带有所述转运蛋白；
15、将所述外泌体和所述nad+代谢干预活性物质混合，超声处理，得到所需要的载药外泌体。
16、在一个实施例中，所述nad+代谢干预活性物质选自nmn、na、nr和nad中的至少一种。
17、在一个实施例中，所述添加了刺激剂的培养基中，所述刺激剂的质量浓度为10μg/ml，所述刺激剂为cytochalasin b；
18、用添加了刺激剂的培养基对表达所述转运蛋白的所述脂肪干细胞进行培养的操作中，培养条件为37℃、5％ co2处理30分钟。
19、一种载药外泌体，由上述的载药外泌体的制备方法制备得到；
20、所述载药外泌体包括所述外泌体以及容纳在所述外泌体内的所述nad+代谢干预活性物质。
21、一种上述的载药外泌体在保健品领域的应用。
22、本发明的载体组合可用于制备载药外泌体，本发明的载药外泌体的制备方法，通过外泌体和nad+代谢干预活性物质制备载药外泌体，通过用于转运蛋白可以将nad+代谢干预活性物质的转运到外泌体内，可以实现外泌体运载nad+代谢干预活性物质。
23、结合说明书测试例可以看出，这种载药外泌体的制备方法制备的载药外泌体可以显著增加脂肪组织内的nad+含量。
1.一种载体组合，用于制备载药外泌体，其特征在于，包括重组载体和辅助载体，所述重组载体内插入有转运蛋白表达基因，所述转运蛋白表达基因用于表达用于转运nad+代谢干预活性物质的转运蛋白。
2.根据权利要求1所述的载体组合，其特征在于，所述转运蛋白选自nmn转运子、na转运子、nr转运子和nad转运子中的至少一种。
3.根据权利要求1所述的载体组合，其特征在于，所述转运蛋白表达基因为用于表达nmn转运子的slc12a8基因，所述转运蛋白表达基因的序列如seq id no.1所示。
4.根据权利要求3所述的载体组合，其特征在于，所述重组载体内还插入有红色荧光蛋白表达基因和嘌呤霉素表达基因，所述红色荧光蛋白表达基因的序列如seq id no.2所示。
5.根据权利要求1～4中任意一项所述的载体组合，其特征在于，所述重组载体为plv3-cmv-mcs-puro，所述辅助载体为pmd.2g和pspax。
6.一种载药外泌体的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
7.根据权利要求6所述的载药外泌体的制备方法，其特征在于，所述nad+代谢干预活性物质选自nmn、na、nr和nad中的至少一种。
8.根据权利要求7所述的载药外泌体的制备方法，其特征在于，所述添加了刺激剂的培养基中，所述刺激剂的质量浓度为10μg/ml，所述刺激剂为cytochalasin b；
9.一种载药外泌体，其特征在于，由如权利要求6～8中任意一项所述的载药外泌体的制备方法制备得到；
10.一种权利要求9所述的载药外泌体在保健品领域的应用。
