本发明属于中药质量评价,涉及一种基于辨状论质的黄芩质量评价方法。
背景技术:
1、黄芩始载于《神农本草经》,被列为上品,具有清热燥湿,泻火解毒,止血,安胎的功效。来源于唇形科(labiatae)黄芩属(scutellaria linn.)植物黄芩(scutellariabaicalensis georgi)的干燥根,黄芩主要含有黄酮类、萜类、挥发油类等化合物,具有抗炎、抗菌、抗病毒、抗肿瘤、抗氧化等功效。临床上,黄芩常作为经典名方中配伍药物与其他药物协同发挥作用。在中成药中占有一定地位,是三九胃泰胶囊、小儿肺热咳喘颗粒、清热解毒片等六百多种中成药的重要原料。中医中药在新型冠状病毒感染的治疗中,起到举足轻重的作用。因黄芩善清肺热咳嗽等上焦之火,在治疗新型冠状病毒感染的复方中的高频使用。
2、近年来,黄芩人工栽培规模逐渐扩大,且初见成效;相关调研表明,人工种植与采收各异的问题仍存在,2020年版《中国药典》中规定黄芩的采收期为春、秋两季,采收期范围较大,且区域气候差异性较大,不能为各种植地区提供一定的采收期依据,采收期的不同导致栽培的黄芩商品质量参差不齐的现象出现。
3、有效成分作为中药药效的物质基础,是药材质量的重要组成部分。采收期是影响中药材活性物质的重要因素之一。《本草纲目》中记录:“生产有南北,节气有迟早,根苗异采收,制造法异度”。“适时采收是药,误时采收是草”,可见,中药材的适时采收对生产高品质药材至关重要。采收作为中药材生产过程中影响药材品质的关键环节之一,不仅对药材质量有较大影响,还影响着药材的产量。因此,探究中药材的质量、产量与采收之间的科学规律,筛选并确立最佳采收期是重要研究内容,也是保持或提升药材品质的重要方法。
4、当代著名生药学家和本草学家谢宗万先生提出“辨状论质”观点,即通过药材的颜色、性状、质地等外观性状进行鉴定,从而初步确定药材的品质优劣。历代本草均记载黄芩以色黄者为佳,也有黄芩以“深色为好”之说,亦有论著称黄芩“以粗长、质坚实、色黄、除尽外皮者为佳”。
5、《基于“辨状论质”理论对南柴胡外观性状与内在质量的相关性研究》(中国中药杂志,2023,48(07):1815-1823)中,王文雪等研究发现在一定范围内南柴胡的表面颜色越红、越长、越粗,其挥发油和柴胡皂苷的含量越高;《不同方法软化切制后的黄芩饮片颜色与5种黄酮类成分含量的相关性研究》(中国中药杂志,2019,44(20):4467-4475)中,柴冲冲等发现黄芩粉末颜色越亮,越黄,总色值越大,黄酮类成分含量越高,黄酮苷元类成分越低。但是现有技术是采用人为来判断外观性状,具有较强的主观性,很难保证评价的客观性以及准确性,导致评价结果不精准。
6、综上所述,通过黄芩外观性状、有效成分以及产量等多维度对黄芩质量进行评价,进而指导黄芩采收是现阶段所要解决的一个难题。
技术实现思路
1、针对现有黄芩质量评价存在的技术难题,本发明提供一种基于辨状论质的黄芩质量评价方法。
2、本发明旨在利用主成分分析对黄芩的外观形状指标、有效成分和产量进行联合分析,构建多维度评价模型;通过黄芩外观性状指标快速预测黄芩的有效成分含量,实现黄芩质量的精准评价,进而指导黄芩的采收。
3、为了实现上述目的,本发明采用的技术方案如下:
4、一种基于的黄芩质量评价方法,包括以下步骤:
5、1)获取不同采收期黄芩的8个指标数据
6、获取不同采收期黄芩的4个外观性状指标数据:根长、根中部直径、根冠直径以及粉末颜色;
7、获取不同采收期黄芩的3个内在物质指标数据:黄芩苷的含量、折干率、醇溶性浸出物含量;
8、获取不同采收期黄芩的产量指标数据;
9、2)主成分分析
10、以步骤1)获取的8个指标数据为变量因子进行降维-主成分分析,提取特征值≥1的三个主成分f1、f2和f3,并得到各主成分对应的贡献率p1、p2和p3;
11、3)构建评价函数
12、以三个主成分f1、f2和f3以及对应的各主成分的贡献率p1、p2和p3为权数,构建综合评价函数f=p1f1+p2f2+p3f3;
13、4)质量评价
14、根据计算的f值,对黄芩进行质量评价。
15、进一步限定,所述步骤1)中,黄芩苷的含量采用以下方法得到:
16、a)制备黄芩供试品溶液
17、以黄芩粉末与甲醇溶液混合制备而成;
18、b)色谱分析
19、采用高效液相色谱测定黄芩供试品溶液的色谱图,并计算有效成分黄芩苷的含量。
20、进一步限定,所述黄芩供试品溶液的制备过程是:精密称定黄芩粉末0.10g,置于具塞锥形瓶中,加入70%乙醇40ml,称定重量,超声处理40min,放冷,再称定重量,用甲醇补足减失重量,摇匀,滤过,取续滤液,即得。
21、进一步限定,所述高效液相色谱测定条件是:
22、色谱柱为thermo c18;流动相为乙腈(a)-0.1%甲酸水溶液(b),梯度洗脱:0~10min,10%~15%a;10~20min,15%~20%a;20~30min,20%~25%a;30~60min,25%~45%a;60~70min,45%~60%a;70~75min,60%~10%a;检测波长274nm、体积流量1.0ml·min-1、进样量10μl、柱温30℃。
23、进一步限定,所述步骤1)中,折干率按照如下方法计算得到:
24、将黄芩根洗净晾干后称量鲜重,60℃下烘干后称量干重,(干重/鲜重×100%)计算样品折干率。
25、进一步限定,所述步骤1)中,醇溶性浸出物含量是采用热浸法测定的。
26、进一步限定,所述步骤1)中产量的测定方法是:分别选取多组1m2范围内黄芩,称量干重,求出平均值再乘以666.7m2得到。
27、进一步限定,所述步骤2)中,降维-主成分分析的具体过程如下:
28、2.1)以不同采收期下黄芩为样本,并以8个指标数据构建样本矩阵x;
29、
30、其中:i表示黄芩样本个数,i=1、2、3…8;j表示黄芩样本对应的指标数据,j=1、2、3…8;xij为样本矩阵x中第i个样本对应的第j个指标数据;
31、2.2)对样本矩阵进行标准化处理,得到标准化矩阵y;
32、
33、其中:yij为标准化矩阵y中第i个样本对应的第j个指标数据;xij为第i样本对应的j个指标数据的平均值,sj表示标准化矩阵y第j列的标准方差;i表示黄芩样本个数,i=1、2、3…8;j表示黄芩样本对应的指标数据,j=1、2、3…8;
34、2.3)利用公式(2)对标准化矩阵y进行相关性分析,得到相关性矩阵r;
35、
36、其中:rjj表示相关矩阵r第j行第j列的元素,yik为标准化矩阵y中第j行中的第k个指标,表示标准化矩阵y中第j行的均值;ykj为标准化矩阵y中第j列中的第k个指标,表示标准化矩阵y中第j列的均值,j=1、2、3…8,n为样本数量8;
37、2.4)构建特征方程|r-λji|=0,求相关性矩阵r的j个非负特征值λj,将这些特征值按从大到小的顺序排列为λ1≥λ2≥λ3……≥λj≥0;i为单位矩阵;
38、2.5)再由计算得出特征值λj对应的特征向量矩阵a;
39、μjj表示第j个主成分对应第j个指标数据的向量;ajj表示第j个主成分对应的第j个指标数据的特征向量;j=1、2、3…8。
40、2.6)计算贡献率及累计贡献率
41、贡献率
42、累计贡献率
43、其中:λk表示第k个主成分的特征值;
44、2.7)求因子载荷矩阵b
45、取λ≥1的前三个特征值λ1、λ2、λ3,由下式得到因子载荷矩阵b;
46、
47、2.8)按照公式(7)计算主成分f1、f2和f3;同时根据公式(5)计算三个主成分对应的贡献率p1、p2和p3
48、fc=bc1yi1+bc2yi2+…bcjyij (7)
49、其中:c=1、2、3,i=1、2、3……8,j=1、2、3……8;
50、其中:bc1为因子载荷矩阵b第c行第1列的元素,bc2为因子载荷矩阵b第c行第2列的元素;bcj为因子载荷矩阵b第c行第j列的元素,yij为标准化矩阵y中第i个样本对应的第j个指标数据。
51、进一步限定,步骤4)中,f值越大,黄芩样本的质量越高。
52、本发明的有益效果是:
53、1、本发明通过主成分分析对黄芩的外观性状指标、内在有效成分含量以及产量等指标进行分析,最终构建出多维度评价模型,通过黄芩外观性状指标快速预测黄芩的有效成分含量,实现黄芩质量的精准评价,进而指导黄芩的采收。
54、2、本发明通过对不同采收期黄芩的含量测定,发现不同粉末颜色、根长、根粗的黄芩中的黄芩苷成分含量有差异,从而将黄芩的内在有效成分含量在一定程度上能够外化于形,表现在其外观性状上;通过对其外观性状的客观评价,能够初步确定药材品质的优劣。
55、3、本发明采用l*(亮度)、a*(红绿)、b*(黄蓝)色度空间及游标卡尺等对不同采收期黄芩的粉末颜色及根长、根粗进行了数字化客观的评价,评价结果更加准确。
56、4、本发明采用高效液相色谱法测定黄芩的有效成分含量,测定结果线性相关性好,具有良好的精密性、稳定性和重复性好,结果准确可靠。
1.一种基于辨状论质的黄芩质量评价方法,其特征在于,包括以下步骤:
2.根据权利要求1所述的基于辨状论质的黄芩质量评价方法,其特征在于,所述步骤1)中,黄芩苷的含量采用以下方法得到:
3.根据权利要求2所述的基于辨状论质的黄芩质量评价方法,其特征在于,所述黄芩供试品溶液的制备过程是:精密称定黄芩粉末0.10g,置于具塞锥形瓶中,加入70%乙醇40ml,称定重量,超声处理40min,放冷,再称定重量,用甲醇补足减失重量,摇匀,滤过,取续滤液,即得。
4.根据权利要求2所述的基于辨状论质的黄芩质量评价方法,其特征在于,所述高效液相色谱测定条件是:
5.根据权利要求1所述的基于辨状论质的黄芩质量评价方法,其特征在于,所述步骤1)中,折干率按照如下方法计算得到:
6.根据权利要求1所述的基于辨状论质的黄芩质量评价方法,其特征在于,所述步骤1)中,醇溶性浸出物含量是采用热浸法测定的。
7.根据权利要求1所述的基于辨状论质的黄芩质量评价方法,其特征在于,所述步骤1)中产量的测定方法是:分别选取多组1m2范围内黄芩,称量干重,求出平均值再乘以666.7m2得到。
8.根据权利要求1所述的基于辨状论质的黄芩质量评价方法,其特征在于,所述步骤2)中,降维-主成分分析的具体过程如下:
9.根据权利要求1所述的基于辨状论质的黄芩质量评价方法,其特征在于,所述步骤4)中,f值越大,黄芩的质量越高。
