本发明涉及药品检测分析，尤其涉及一种硫辛酸软胶囊中氧化杂质的检测方法。
背景技术：
1、在药物分析中，所称的“有关物质(related substances)”是指在原料药生产过程中带入的起始原料、试剂、中间体、副产物和异构体等物质，也可能是制剂在生产、贮藏和运输过程中产生的氧化产物、降解产物、聚合物或晶型转变等特殊杂质。有关物质的种类与药物的合成路线和制剂工艺密切相关，药物在合成和制剂过程中的任何一个因素的改变都可能导致其有关物质的种类不同，因此有关物质的检测和控制过程相对复杂，且有关物质的检测是控制药品质量的重要指标。
2、硫辛酸软胶囊主要用于糖尿病周围神经病变引起的感觉异常，比如疼痛、麻木、温度觉异常等。糖尿病患者由于体内血糖过高，会产生很多代谢废物(如山梨醇)，这些废物会刺激糖尿病患者的血管和神经，从而引起糖尿病神经病变。硫辛酸是一种抗氧化剂，可以抑制糖尿病患者体内的氧化应激反应，延缓糖尿病神经病变的进展，改善糖尿病患者神经病变症状。
3、硫辛酸样品不稳定容易产生杂质杂质，为了患者用药安全，降低氧化杂质带来的有关副作用，需要对硫辛酸软胶囊中的有关物质进行检测分析。而现有的检测方法存在着操作复杂、分离度差等缺陷，因此，如何提供一种操作简便、分离度好、色谱柱柱效高的检测方法成为了本领域技术人员亟需解决的问题。
技术实现思路
1、有鉴于此，本发明提供了一种硫辛酸软胶囊中氧化杂质的检测方法。其目的是解决现有检测方法所存在的操作复杂、分离度差等技术问题。
2、为了达到上述目的，本发明采用如下技术方案：
3、本发明提供了一种硫辛酸软胶囊中氧化杂质的检测方法，包括以下步骤：
4、(1)溶液的配制：
5、系统适用性溶液：将硫辛酸、氧化杂质a～氧化杂质e和硫辛酸酰胺杂质与稀释液混合得到系统适用性溶液；
6、供试品溶液：将硫辛酸软胶囊与稀释液混合得到供试品溶液；
7、对照品溶液：将供试品溶液与稀释液混合得到对照品溶液；
8、空白辅料溶液：将氨丁三醇与稀释液混合得到空白辅料溶液；
9、氧化杂质a对照品溶液：将氧化杂质a与稀释液混合得到氧化杂质a对照品溶液；
10、硫辛酸酰胺杂质对照品溶液：将硫辛酸酰胺杂质与稀释液混合得到硫辛酸酰胺杂质对照品溶液；
11、氧化杂质混合对照品溶液：将氧化杂质b～氧化杂质e与稀释液混合得到氧化杂质混合对照品溶液；
12、(2)将系统适用性溶液、供试品溶液、对照品溶液、空白辅料溶液、氧化杂质a对照品溶液、硫辛酸酰胺杂质对照品溶液和氧化杂质混合对照品溶液分别注入液相色谱仪进行检测，记录色谱图；
13、色谱条件：
14、色谱柱：填充剂为十八烷基硅烷键键合硅胶，250mm×4.6mm，5μm；
15、色谱柱温度：20～40℃；
16、进样体积：10～30μl；
17、流动相：流动相a为磷酸二氢钾溶液-甲醇-乙腈，流动相b为乙腈；
18、流动相流速：1.0～2.0ml/min；
19、检测波长：200～220nm；
20、采用梯度洗脱的方式；
21、所述氧化杂质的名称及结构如下：
22、
23、
24、进一步的，在所述步骤(1)中，在系统适用性溶液中，硫辛酸的浓度为0.4～0.6mg/ml，氧化杂质a～氧化杂质e的浓度独立的为3～5μg/ml，硫辛酸酰胺杂质的浓度为3～5μg/ml；
25、在供试品溶液中，硫辛酸软胶囊与稀释液的体积比为1～3：20～30；
26、在对照品溶液中，硫辛酸的浓度为3～5μg/ml；
27、在空白辅料溶液中，氨丁三醇的浓度为1～3mg/ml。
28、进一步的，在所述步骤(1)中，在氧化杂质a对照品溶液中，氧化杂质a的浓度为3～5μg/ml；
29、在硫辛酸酰胺杂质对照品溶液中，硫辛酸酰胺杂质的浓度为3～5μg/ml；
30、在氧化杂质混合对照品溶液中，氧化杂质b～氧化杂质e的浓度独立的为3～5μg/ml。
31、进一步的，在所述步骤(2)中，在流动相a中，磷酸二氢钾溶液、甲醇和乙腈的体积比为850～950：25～75：25～75；所述磷酸二氢钾溶液的浓度为0.001～0.01mol/l。
32、进一步的，在所述步骤(2)中，还包括用磷酸将流动相a的ph值调节为3.0～3.1。
33、进一步的，在所述步骤(2)中，梯度洗脱的具体步骤为：以流动相总体积为100％计，0min≤t≤10min，流动相a占流动相总体积的95％；10min＜t≤30min，流动相a占流动相总体积的90％；30min＜t≤45min，流动相a占流动相总体积的85％；45min＜t≤60min，流动相a占流动相总体积的65％；60min＜t≤90min，流动相a占流动相总体积的65％；90min＜t≤90.1min，流动相a占流动相总体积的100％；90.1min＜t≤105min，流动相a占流动相总体积的100％。
34、进一步的，在所述步骤(3)中，以硫辛酸峰计，理论板数≥2000。
35、进一步的，在所述步骤(3)中，硫辛酸与相邻杂质峰分离度＞1.5。
36、进一步的，所述稀释液包括甲醇和水，所述甲醇和水的体积比为30～50：50～70。
37、经由上述的技术方案可知，与现有技术相比，本发明的有益效果如下：
38、(1)通过本发明的检测方法，可以有效全面的检测硫辛酸软胶囊中氧化杂质a～氧化杂质e和硫辛酸酰胺杂质，且各个氧化杂质峰之间分离度高，可精确分析各个氧化杂质的含量。
39、(2)本发明能够有效的测定硫辛酸软胶囊中各种相关杂质的存在，尤其实现了谱图中硫辛酸特征峰与氧化杂质特征峰之间的分离。同时本发明的方法还可用于硫辛酸软胶囊的有关物质检测，可以确保产品的质量可控。
1.一种硫辛酸软胶囊中氧化杂质的检测方法，其特征在于，包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，在所述步骤(1)中，在系统适用性溶液中，硫辛酸的浓度为0.4～0.6mg/ml，氧化杂质a～氧化杂质e的浓度独立的为3～5μg/ml，硫辛酸酰胺杂质的浓度为3～5μg/ml；
3.根据权利要求2所述的检测方法，其特征在于，在所述步骤(1)中，在氧化杂质a对照品溶液中，氧化杂质a的浓度为3～5μg/ml；
4.根据权利要求2或3所述的检测方法，其特征在于，在所述步骤(2)中，在流动相a中，磷酸二氢钾溶液、甲醇和乙腈的体积比为850～950：25～75：25～75；所述磷酸二氢钾溶液的浓度为0.001～0.01mol/l。
5.根据权利要求4所述的检测方法，其特征在于，在所述步骤(2)中，还包括用磷酸将流动相a的ph值调节为3.0～3.1。
6.根据权利要求2或5所述的检测方法，其特征在于，在所述步骤(2)中，梯度洗脱的具体步骤为：以流动相总体积为100％计，0min≤t≤10min，流动相a占流动相总体积的95％；10min＜t≤30min，流动相a占流动相总体积的90％；30min＜t≤45min，流动相a占流动相总体积的85％；45min＜t≤60min，流动相a占流动相总体积的65％；60min＜t≤90min，流动相a占流动相总体积的65％；90min＜t≤90.1min，流动相a占流动相总体积的100％；90.1min＜t≤105min，流动相a占流动相总体积的100％。
7.根据权利要求6所述的检测方法，其特征在于，在所述步骤(3)中，以硫辛酸峰计，理论板数≥2000。
8.根据权利要求1、3、5或7所述的检测方法，其特征在于，在所述步骤(3)中，硫辛酸与相邻杂质峰分离度＞1.5。
9.根据权利要求8所述的检测方法，其特征在于，所述稀释液包括甲醇和水，所述甲醇和水的体积比为30～50：50～70。
