本发明涉及bnaa07.mkk9基因或其snap分子标记在调控植物菌核病抗性中的应用,属于分子生物学及遗传育种领域。
背景技术:
1、我国作为植物油消费大国,国产植物油的供给率很低,需要进口来满足消费者的需求,提高国产植物油的供给率是保障我国食用油供给安全的关键。甘蓝型油菜(brassicanapus.l)作为我国第一大油料作物,贡献了我国50%左右的国产植物油。而油菜菌核病于2023年列入国家一类作物病害。由核盘菌引起的油菜菌核病不仅严重影响油菜的产量,而且还影响菜籽油的品质。油菜菌核病可造成年均产量损失达20%,发病严重区域损失高达80%。因此培育抗(耐)菌核病油菜种质是降低菌核病发生、减少产量损失最为经济有效的途径。
2、目前,在油菜及其近缘种中暂未发现对菌核病完全免疫的油菜种质,大量的遗传学实验证明油菜对菌核病的抗性主要由数量性状(qtl)控制,虽然目前通过全基因组关联分析等研究方法定位到上百个抗菌核病qtls/关联位点,但多数为微效qtls/关联位点,主效qtls仍未被克隆。通过反向遗传学的方式发现多个参与调控油菜抗菌核病的基因,如:bnawrky33(liu等,interactions of wrky15 and wrky33 transcription factors andtheir roles in the resistance of oilseed rape to sclerotinia infection.plantbiotechnol j,2018,16,911-925)、bnampk4(wang等,overexpression of brassica napusmpk4 enhances resistance to sclerotinia sclerotiorumin oilseed rape.molplant-microbe in,2009,22,235-244)、bnampk3(wang等,bnampk3 is a key regulatorof defense responses to the devastating plant pathogen sclerotiniasclerotiorumin oilseed rape.front plant sci,2019,10:91)、bnampk6(wang等,bnampk6 is a determinant of quantitative disease resistance againstsclerotinia sclerotiorumin oilseed rape.plant sci,2020,291,110362),bnawrky28(zhang等,transcription factor wrky28 curbs wrky33-mediated resistance tosclerotinia sclerotiorumin brassica napus.plant physiol,2022,190,2757-2774)等,但是这些基因是否存在优异等位变异仍不明确,缺乏有效的功能性分子标记,因此难以直接运用到实际的生产实践中。综上所述,分离和克隆油菜抗菌核基因,开发相应的功能型分子标记在菌核病抗性育种改良中具有重要的作用。
技术实现思路
1、发明目的:本发明所要解决的技术问题是首次提供了bnaa07.mkk9基因或其snap分子标记在调控植物菌核病抗性中的应用。
2、技术方案:为解决上述技术问题,本发明提供bnaa07.mkk9基因或其snap分子标记在调控植物菌核病抗性中的应用。
3、本发明还提供了bnaa07.mkk9基因或其snap分子标记在植物菌核病抗性遗传改良中的应用。
4、其中,所述snap分子标记包括hap0、hap1或hap2中的一种或几种;所述hap0的核苷酸序列如seq id no.4所示;所述hap1的核苷酸序列如seq id no.5所示;所述hap2的核苷酸序列如seq id no.6所示。
5、本发明还提供了一种提高植物菌核病抗性的方法,其特征在于,包括以下步骤:将bnaa07.mkk9dd基因的过表达载体转化至植物中即可。
6、本发明还提供了一种降低植物菌核病抗性的方法,其特征在于,包括以下步骤:将敲除了bnaa07.mkk9基因的重组载体转化至植物中即可。
7、本发明还提供了bnaa07.mkk9基因的snap分子标记或其引物组合在鉴定植物菌核病抗性中的应用,所述snap分子标记包括hap0、hap1或hap2中的一种或几种;所述hap0的核苷酸序列如seq id no.4所示;所述hap1的核苷酸序列如seq id no.5所示;所述hap2的核苷酸序列如seq id no.6所示。
8、其中,所述引物组合包括hap0的引物组合、hap1的引物组合或hap2的引物组合中的一种或几种。
9、其中,所述hap0的引物组合的序列如seq id no.35~seq id no.36所示。
10、其中,所述hap1的引物组合的序列如seq id no.37~seq id no.38所示。
11、其中,所述hap2的引物组合的序列如seq id no.39~seq id no.40所示。
12、有益效果:与现有技术相比,本发明具有如下显著优点:1、本发明首次定位并克隆一个调控油菜菌核病抗性的基因bnaa07.mkk9,过量表达该基因可以增强油菜的菌核病抗性;2、该基因的编码蛋白和snap分子标记可用于菌核病抗性遗传改良。
1.bnaa07.mkk9基因或其snap分子标记在调控植物菌核病抗性中的应用。
2.bnaa07.mkk9基因或其snap分子标记在植物菌核病抗性遗传改良中的应用。
3.根据权利要求1~2任一项所述的应用,其特征在于,所述snap分子标记包括hap0、hap1或hap2中的一种或几种;所述hap0的核苷酸序列如seq id no.4所示;所述hap1的核苷酸序列如seq id no.5所示;所述hap2的核苷酸序列如seq id no.6所示。
4.一种提高植物菌核病抗性的方法,其特征在于,包括以下步骤:将bnaa07.mkk9dd基因的过表达载体转化至植物中即可。
5.一种降低植物菌核病抗性的方法,其特征在于,包括以下步骤:将敲除了bnaa07.mkk9基因的重组载体转化至植物中即可。
6.bnaa07.mkk9基因的snap分子标记或其引物组合在鉴定植物菌核病抗性中的应用,其特征在于,所述snap分子标记包括hap0、hap1或hap2中的一种或几种;所述hap0的核苷酸序列如seq id no.4所示;所述hap1的核苷酸序列如seq id no.5所示;所述hap2的核苷酸序列如seq id no.6所示。
7.根据权利要求6所述的应用,其特征在于,所述引物组合包括hap0的引物组合、hap1的引物组合或hap2的引物组合中的一种或几种。
8.根据权利要求7所述的应用,其特征在于,所述hap0的引物组合的序列如seq idno.35~seq id no.36所示。
9.根据权利要求7所述的应用,其特征在于,所述hap1的引物组合的序列如seq idno.37~seq id no.38所示。
10.根据权利要求7所述的应用,其特征在于,所述hap2的引物组合的序列如seq idno.39~seq id no.40所示。
