一种胰液检测用胶体金免疫层析试纸、试剂盒及制备方法

    专利2026-01-27  7


    本申请涉及胰液检测,尤其涉及一种胰液检测用胶体金免疫层析试纸、试剂盒及制备方法。


    背景技术:

    1、胰腺是位于上腹部背面的消化腺,目前针对胰腺疾病手术是很重要的治疗方法,术后胰瘘是胰腺手术的一种并发症;胰瘘指的是胰腺导管上皮与其他上皮表面的异常通道,该异常通道内有源自胰腺并富含酶类的液体。胰瘘是胰腺术后常见并发症之一,发生率为3%~45%,如果处理不当,胰瘘可能导致腹腔感染、出血及脓毒症等并发症,是术后患者死亡的重要原因。

    2、目前胰腺的手术包括胰十二指肠切除术、胰体尾切除术、胰腺肿瘤局部切除术、保留十二指肠的胰头切除术等,其中,对于胰十二指肠切除术和保留十二指肠的胰头切除术,胰管和空肠都做了吻合,而对于胰腺肿瘤局部切除术和胰体尾切除术,存在胰腺实质断面暴露在腹腔的情况。同时术中预防胰瘘的主要手段是对各种直径的胰管进行缝合,但受限于医师眼睛和所用器械(例如腹腔镜和手术机器人)的极限,仍然可能会遗漏细小的分支胰管,因此若有材料可以贴敷在胰腺断面,以快速检测胰腺断面是否还有胰液渗出,并对相应区域进行有的放矢的缝合,将更加有效的预防胰瘘。


    技术实现思路

    1、本申请提供了一种胰液检测用胶体金免疫层析试纸、试剂盒及制备方法,以解决现有技术中针对胰腺断面难以快速检测而影响胰瘘预防的技术问题。

    2、第一方面,本申请提供了一种胰液检测胶体金免疫层析试纸,所述胶体金免疫层析试纸的结构包括:胶体金垫、硝酸纤维素膜和吸水垫,所述硝酸纤维素膜设于所述胶体金垫和所述吸水垫之间,所述胶体金垫远离所述硝酸纤维素膜的一面为检测面;

    3、所述硝酸纤维素膜上固定有抗体,所述抗体用于与胰液的淀粉酶特异性结合;

    4、所述胶体金垫上吸附有胶体金标记试剂。

    5、可选的,所述硝酸纤维素膜的厚度为140μm~160μm,所述硝酸纤维素膜的孔径为0.0.40μm~0.50μm。

    6、可选的,所述胶体金垫的厚度为2mm~4mm。

    7、可选的,所述吸水垫的厚度为2mm~4mm。

    8、可选的,所述胶体金免疫层析试纸的厚度为4mm~8mm。

    9、第二方面,本申请提供了一种制备第一方面所述的胶体金免疫层析试纸的方法,所述方法包括:

    10、使硝酸纤维素膜吸附抗体溶液,得到固定抗体的硝酸纤维素膜;

    11、使胶体金标记试剂吸附在结合垫上,得到胶体金垫;

    12、组装所述固定抗体的硝酸纤维素膜、所述胶体金垫和吸水垫,得到胶体金免疫层析试纸。

    13、可选的,所述使胶体金标记试剂吸附在结合垫上,得到胶体金垫,包括步骤:

    14、混合多蒸水和柠檬酸三钠,并进行煮沸,后加入四氯金酸进行加速搅拌,得到胶体金标记试剂;

    15、混合所述胶体金标记试剂和结合垫,得到胶体金垫。

    16、可选的,所述柠檬酸三钠和所述四氯金酸的质量比为3~6。

    17、可选的,所述胶体金垫中金颗粒的粒径为1nm~100nm。

    18、第三方面,本申请提供了一种胰液检测用试剂盒,所述试剂盒包括第一方面所述的胶体金免疫层析试纸。

    19、本申请实施例提供的上述技术方案与现有技术相比具有如下优点:

    20、本申请实施例提供的一种胰液检测胶体金免疫层析试纸,通过包括胶体金垫、硝酸纤维素膜和吸水垫的胶体金免疫层析试纸,并在硝酸纤维素膜上固定与胰液的淀粉酶特异性结合的抗体,同时将胶体金标记试剂吸附在胶体金垫上,当该胶体金免疫层析试纸贴附在胰腺断面时,通过胶体金垫的吸附和毛细作用,使得胰腺断面的胰液垂直向吸水垫移动,随后胰液内淀粉酶与胶体金垫内胶体金标记试剂相互反应形成结合物,随后在吸水垫的作用下胰液再移动至固定有抗原的硝酸纤维素膜,此时胰液与胶体金标试剂的结合物又与硝酸纤维素膜上的淀粉酶抗体发生特异性结合而被截留,以此聚集在硝酸纤维素膜上,最后移去吸水垫可通过肉眼观察到硝酸纤维素膜上的显色结果,可以快速检测并判断是否还有胰液渗出。



    技术特征:

    1.一种胰液检测胶体金免疫层析试纸,其特征在于,所述胶体金免疫层析试纸的结构包括:胶体金垫、硝酸纤维素膜和吸水垫,所述硝酸纤维素膜设于所述胶体金垫和所述吸水垫之间,所述胶体金垫远离所述硝酸纤维素膜的一面为检测面;

    2.根据权利要求1所述的胶体金免疫层析试纸,其特征在于,所述硝酸纤维素膜的厚度为140μm~160μm,所述硝酸纤维素膜的孔径为0.4μm~0.5μm。

    3.根据权利要求1所述的胶体金免疫层析试纸,其特征在于,所述胶体金垫的厚度为2mm~4mm。

    4.根据权利要求1所述的胶体金免疫层析试纸,其特征在于,所述吸水垫的厚度为2mm~4mm。

    5.根据权利要求1所述的胶体金免疫层析试纸,其特征在于,所述胶体金免疫层析试纸的厚度为4mm~8mm。

    6.一种制备如权利要求1-5任一项所述的胶体金免疫层析试纸的方法,其特征在于,所述方法包括:

    7.根据权利要求6所述的方法,其特征在于,所述使胶体金标记试剂吸附在结合垫上,得到胶体金垫,包括步骤:

    8.根据权利要求7所述的方法,其特征在于,所述柠檬酸三钠和所述四氯金酸的质量比为3~6。

    9.根据权利要求6所述的方法,其特征在于,所述胶体金垫中金颗粒的粒径为1nm~100nm。

    10.一种胰液检测用试剂盒,其特征在于,所述试剂盒包括如权利要求1-5任一项所述的胶体金免疫层析试纸。


    技术总结
    本申请涉及胰液检测技术领域,尤其涉及一种胰液检测用胶体金免疫层析试纸、试剂盒及制备方法;所述胶体金免疫层析试纸的结构包括:胶体金垫、硝酸纤维素膜和吸水垫,硝酸纤维素膜设于胶体金垫和吸水垫之间,胶体金垫远离硝酸纤维素膜的一面为检测面;硝酸纤维素膜上固定有抗体;胶体金垫上吸附有胶体金标记试剂;通过将胶体金标记试剂吸附在胶体金垫上,利用胰液内淀粉酶与胶体金垫内胶体金标记试剂相互反应形成结合物,再在硝酸纤维素膜上固定抗体,而该结合物会与该抗体特异性结合并被硝酸纤维素膜截留,以此显色,因此通过观察硝酸纤维素膜上的颜色可以直观判断胰腺断面是否有胰液渗出,实现对胰腺断面的快速检测。

    技术研发人员:郭兴军,尹韬远,潘树涛
    受保护的技术使用者:华中科技大学同济医学院附属同济医院
    技术研发日:
    技术公布日:2024/4/29
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