本技术涉及生物检测，尤其涉及一种用于检测猫呼吸道五种病原的试剂盒。
背景技术：
1、猫疱疹病毒ⅰ型、猫杯状病毒、支原体、衣原体、支气管败血波士杆菌是猫最常感染的呼吸道病原体。
2、猫疱疹病毒ⅰ型(felineherpesvirus1，fhv-1)是一种有囊膜的双链dna病毒，对所有猫科动物易感。研究表明，该病毒感染可引起将近一半的猫呼吸道疾病，诱发猫的传染性鼻气管炎，进一步导致猫急性、高度接触性上呼吸道感染，常见表现为打喷嚏、咳嗽、流涕、结膜炎和发热等，发病率高达100％，死亡率达50％，感染后可终生带毒排毒，并可垂直传播，孕猫可致流产。
3、猫杯状病毒(felinecalicivirus，fcv)是一种无囊膜的单链rna病毒，其感染是猫的多发病，发病率较高，主要表现为上呼吸道症状，病猫表现精神沉郁、发热、结膜炎、口炎、流涕等。感染fcv后部分病猫可恢复健康，部分成为无症状携带者，对健康猫造成威胁。
4、支原体是一类介于细菌和病毒之间的原核生物，基因组含有dna和rna，广泛分布于外界环境及动植物体内。猫支原体感染主要引起猫传染性呼吸道疾病，造成打喷嚏、咳嗽、流泪、结膜炎、流涕、呼吸困难等呼吸道症状，对幼猫危害较大。目前没有有效的猫支原体感染的预防方法，因此一旦感染发病，需要及时治疗。
5、衣原体是一类介于立克次体与病毒之间的微生物，含dna和rna两种核酸，能引起人和动物的衣原体病。猫衣原体感染发病率高，是猫的常见传染病之一，容易导致猫慢性结膜炎。猫感染衣原体主要引起眼部及呼吸道感染，包括结膜炎、鼻炎、肺炎等。如治疗不及时还可能会造成全身性的衣原体感染。
6、支气管败血波士杆菌(bordetellabronchiseptica，bb)为一种呼吸道病原菌，可感染多种动物引起呼吸道疾病。病猫主要表现鼻液、流泪、打喷嚏等呼吸道症状，对幼猫感染率更高。
7、综上，从症状来看，上述五种病原感染后的临床表现接近，不通过针对性的诊断方法难以区分；此外，这五种病原容易发生混合感染，为临床准确诊断带来极大挑战。现有临床常用的诊断技术需要依赖血清学、病毒分离鉴定、细菌培养等方法，往往操作时间长、分离鉴定所需的培养条件复杂，成功率不高，影响医生及时、准确地制定治疗策略，急需建立更加快速、准确的诊断方法。近年来以荧光定量pcr技术平台为基础的核酸检测产品已广泛应用于人类病原体的诊断，且常作为诊断结果判定的“金标准”；针对动物诊断领域，也陆续开发出了相关核酸检测产品，但多数产品仍存在检测操作步骤繁琐、耗时较长、检测性能不佳等情况，且检测靶标多为单一病原，难以同时快速检测五种病原，不能良好匹配临床混合感染的检测需求。为此，我们提出一种用于检测猫呼吸道五种病原的试剂盒。
技术实现思路
1、本实用新型的目的是为了解决现有技术中存在的缺点，而提出的一种用于检测猫呼吸道五种病原的试剂盒。
2、为了实现上述目的，本实用新型采用了如下技术方案：
3、一种用于检测猫呼吸道五种病原的试剂盒，包括盒体，所述盒体内底壁活动设置有与盒体内壁相贴合的底部海绵板，底部海绵板顶端面活动设置有内衬，且内衬顶端面活动设置有顶部海绵板，内衬间隔开设有若干个第一限位孔和若干个第二限位孔，第一限位孔内分别独立地放置扩增试剂一管、扩增试剂二管、质控品一管、质控品二管和稀释液管，第二限位孔内放置核酸释放剂管，扩增试剂一管中包括pcr反应液和引物探针组一，扩增试剂二管中包括pcr反应液和引物探针组二，质控品一管中包括核酸释放剂和阴性质控品，质控品二管中包括核酸释放剂和阳性质控品。
4、优选的，所述稀释液管中的组分为rna专用稀释液，核酸释放剂的组分包括三羟甲基氨基甲烷。
5、优选的，所述pcr反应液为单管一步法pcr试剂，pcr反应液组分包括dntps、taqdna聚合酶、反转录酶、mg2+和无菌水。
6、优选的，所述第一限位孔的数量设置为五个。
7、优选的，所述盒体一侧侧壁顶端面设置有盒盖，且盒盖覆盖于顶部海绵板时，盒体呈良好封闭状态。
8、本实用新型的有益效果是：
9、1、稳定性好，试剂盒采用pcr反应液与引物探针混合的形式，可在37℃条件下稳定保存72小时，-20℃反复冻融10次，扩增效果无明显差异；
10、2、单管pcr反应液使用方便，避免使用过程中配制错误的情况发生，并且操作步骤简洁，无需单独的核酸提取步骤，核酸释放剂处理样本经稀释后可直接用于pcr扩增；
11、3、海绵板的设置是为了提供缓冲，减少运输途中试剂管的晃动和碰撞。
1.一种用于检测猫呼吸道五种病原的试剂盒，包括盒体(8)，其特征在于，所述盒体(8)内底壁活动设置有与盒体(8)内壁相贴合的底部海绵板(7)，底部海绵板(7)顶端面活动设置有内衬(3)，且内衬(3)顶端面活动设置有顶部海绵板(4)，内衬(3)间隔开设有若干个第一限位孔(5)和若干个第二限位孔(6)，第一限位孔(5)内分别独立地放置扩增试剂一管、扩增试剂二管、质控品一管、质控品二管和稀释液管，第二限位孔(6)内容置核酸释放剂管；扩增试剂一管中包括pcr反应液和引物探针组一，扩增试剂二管中包括pcr反应液和引物探针组二，质控品一管中包括核酸释放剂和阴性质控品，质控品二管中包括核酸释放剂和阳性质控品。
2.根据权利要求1所述的一种用于检测猫呼吸道五种病原的试剂盒，其特征在于，所述第一限位孔(5)的数量设置为五个。
3.根据权利要求1所述的一种用于检测猫呼吸道五种病原的试剂盒，其特征在于，所述盒体(8)一侧侧壁顶端面设置有盒盖(801)，且盒盖(801)覆盖于顶部海绵板(4)时，盒体(8)呈良好封闭状态。
