本发明属于农业微生物,具体涉及贝莱斯芽孢杆菌lf-4及其应用。
背景技术:
1、油菜自身养分含量丰富,秸秆中含有大量的纤维素,可作为清洁无害的生物肥源,是农业生产中一种重要的生物资源,翻压后的油菜可为作物提供各种营养成分,有利于提高土壤肥力。油菜秸秆还田成为绿色转型的重要方式之一,全国农作物秸秆综合利用情况报告显示,2021年,全国农作物秸秆利用量6.47亿吨,其中,油菜秸秆还田量达0.12亿吨。通过秸秆还田技术实现其资源化利用,可以有效提高土壤肥力和结构质量,降低化肥依赖度,实现了土壤可持续发展,促进农业高效生产。
2、油菜秸秆的主要成分是由纤维素、半纤维素、木质素等三部分构成的木质纤维素,其结构致密,各种物质之间相互作用力强,难以被分解,是油菜秸秆还田的主要难点。在秸秆还田的过程中,微生物一系列的生命代谢活动在木质纤维素降解过程中起到关键作用,在多种微生物的协同作用下,通过分泌纤维素酶,可以高效降解木质纤维素。且利用微生物降解秸秆可以丰富土壤中微生物种群及数量,是促进秸秆还田的有效手段。
3、近年来,研究者们筛选出了多种纤维素降解微生物。如李凌波等人从腐烂油菜秸秆田土样中筛选一株油菜秸秆降解真菌绿色木霉a15,其能高效产胞外纤维素酶,菌株固体发酵28d后,油菜秸秆失重率可达29.17%;宋雨等人从山西老陈醋里筛选出由灿烂类芽孢杆菌、千叶类芽孢杆菌和窖泥类芽孢杆菌构建的复合菌系,对小麦秸秆的降解率最高达27.63%。王文凡等人从堆积牛粪中筛选出解淀粉芽孢杆菌,该菌株有较好的ph适应范围以及盐度耐受性,能有效促进水稻秸秆降解。虽然目前有关秸秆降解菌的报道较多,但尚缺乏能够高效降解纤维素并且兼具促进植物生长的多功能微生物,因此,筛选具有耐旱、耐盐、促生、降解的多功能微生物对促进秸秆还田有重大意义。
技术实现思路
1、本发明的第一个目的在于提供一株贝莱斯芽孢杆菌lf-4,其耐旱、耐盐,可用于秸秆降解和作物促生。
2、本发明的第二个目的在于提供一种贝莱斯芽孢杆菌lf-4制备的微生物菌剂,可用于秸秆降解和作物促生。
3、本发明的第三个目的在于提供贝莱斯芽孢杆菌lf-4制备的微生物菌剂的制备方法。
4、本发明的第四个目的在于提供贝莱斯芽孢杆菌lf-4或微生物菌剂在降解纤维素中的应用。
5、本发明的第五个目的在于提供贝莱斯芽孢杆菌lf-4或微生物菌剂在降解秸秆中的应用。
6、本发明的第六个目的在于提供贝莱斯芽孢杆菌lf-4或微生物菌剂在促进植物生长中的应用。
7、本发明的第一个目的由如下技术方案实施:
8、贝莱斯芽孢杆菌( bacillus velezensis)lf-4,目前保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(china general microbiological culture collectioncenter, cgmcc),地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所,其保藏编号为cgmcc no.29006,保藏日期为2023年11月14日。
9、本发明的第二个目的由如下技术方案实施:
10、贝莱斯芽孢杆菌( bacillus velezensis)lf-4制备的微生物菌剂。
11、优选的,所述微生物菌剂中贝莱斯芽孢杆菌lf-4的有效活菌数为1×106~1×108cfu/ml。
12、本发明的第三个目的由如下技术方案实施:
13、所述微生物菌剂的制备方法,其包括以下步骤:
14、1)接种:将贝莱斯芽孢杆菌lf-4接种于lb平板培养基上,于25~32℃培养2~4 d,得到活化菌种;
15、2)发酵:将所述活化菌种接种到250 ml三角瓶中,每瓶装100 ml的lb液体培养基,发酵培养2~4 d,得到贝莱斯芽孢杆菌lf-4发酵液,作为所述微生物菌剂;其中,培养温度为25~32℃,摇床转速为120~180 r/min。
16、本发明的第四个目的由如下技术方案实施:
17、贝莱斯芽孢杆菌( bacillus velezensis)lf-4或微生物菌剂在降解纤维素中的应用。
18、本发明的第五个目的由如下技术方案实施:
19、贝莱斯芽孢杆菌( bacillus velezensis)lf-4或微生物菌剂在降解秸秆中的应用。
20、优选的,所述秸秆为油菜秸秆。
21、本发明的第六个目的由如下技术方案实施:
22、贝莱斯芽孢杆菌( bacillus velezensis)lf-4或微生物菌剂在促进植物生长中的应用。可以促进植物发芽、促进植物的芽长和根长。
23、优选的,所述植物包括小麦、斜茎黄芪、紫花苜蓿、野大豆中的至少一种。
24、有益效果:本发明通过在野外堆积腐烂秸秆中分离得到的微生物中筛选出了一株能够高效降解纤维素并且兼具促生、耐盐、抗旱功能的菌株lf-4,经分子生物学鉴定菌株lf-4为贝莱斯芽孢杆菌。贝莱斯芽孢杆菌lf-4菌株有较高纤维素酶活性,能高效降解木质纤维素、降解油菜秸秆,并对小麦和斜茎黄芪、紫花苜蓿、野大豆等牧草有一定促生作用。本发明为农业生产中的秸秆还田实际应用奠定基础。
1. 贝莱斯芽孢杆菌(bacillus velezensis)lf-4,其特征在于,其保藏编号为cgmccno.29006。
2. 权利要求1所述的贝莱斯芽孢杆菌(bacillus velezensis)lf-4制备的微生物菌剂。
3. 如权利要求2所述的微生物菌剂,其特征在于,所述微生物菌剂中贝莱斯芽孢杆菌lf-4的有效活菌数为1×106~1×108 cfu/ml。
4.如权利要求2所述的微生物菌剂的制备方法,其特征在于,其包括以下步骤:
5. 权利要求1所述的贝莱斯芽孢杆菌(bacillus velezensis)lf-4或权利要求2所述的微生物菌剂在降解纤维素中的应用。
6. 权利要求1所述的贝莱斯芽孢杆菌(bacillus velezensis)lf-4或权利要求2所述的微生物菌剂在降解秸秆中的应用。
7.如权利要求6所述的应用,其特征在于,所述秸秆为油菜秸秆。
8. 权利要求1所述的贝莱斯芽孢杆菌(bacillus velezensis)lf-4或权利要求2所述的微生物菌剂在促进植物生长中的应用。
9.权利要求8所述的应用,其特征在于,所述植物包括小麦、斜茎黄芪、紫花苜蓿、野大豆中的至少一种。
