本发明属于药物分析领域，涉及一种检测苦味素含量的方法。
背景技术：
1、苦木picrasma quassioides(d.dom)benn，是苦木科苦木属植物，因其有特殊苦味而得名，也被称为“苦树”、“苦胆”等。苦木具有清热解毒，祛湿的功能，用于风热感冒，咽喉肿痛，湿热泻痢，湿疹，疮疖，蛇虫咬伤等；苦木对风热感冒，腹泻下痢，湿疹，疮黄肿毒，跌打损伤等均有效果，在马、牛、羊、猪、兔和禽等多种动物上均可使用。苦木及其植物提取物作为饲料添加剂，在畜牧业中应用较为广泛。根据试验证明，苦木汤可改善保育猪的生长性能、预防保育猪腹泻；苦木片预防仔猪白痢病，平均有效率达95.06％，且原来常发生产褥热的经产母猪服药后未再发生；在日粮中添加200mg/kg苦木提取物对肉鸡的生长性能、免疫功能、屠宰性能和血清抗氧化性能效果佳。以上实例说明，苦木在畜牧业中的应用有着较好的实际意义和发展前景。
2、苦木化学成分主要包括以下类别：苦木苦味素类(quassinoids)、生物碱类(主要)；挥发油类、三萜类、甾醇类、皂苷类、醌类等(次要)。目前对其研究较为深入的主要集中在生物碱类成分，而对于另一种有效成分苦木苦味素的研究甚少。苦木苦味素，至今仅在苦木科植物中获得，故被看作是苦木科的特征成分。它具有驱虫、治阿米巴痢疾及杀虫等功效，特别是其中的苦味素(quassin，c22h28o6)，是早期人们从苦木中分离出来的，最初通过该成分来决定苦木苦味素类物质的基本骨架。苦味素的结构式如下：
3、
4、鉴定苦木植物的真伪或是确认其功效，测定其中苦味素的存在以及含量是最有效的。然而，现有技术尚未报道苦味素的权威检测方法。这使得苦木的鉴定与质量检测无据可依，极易导致产品质量参差不齐，给用户带来经济损失。
5、因此，有必要探索一种重复性好、稳定性强、精密度高、准确度高的检测苦味素含量的方法。
技术实现思路
1、本发明针对现有技术尚未报道苦味素含量的检测方法的技术现状，本发明的目的是提供一种检测苦味素含量的方法，该方法重复性好、稳定性强、精密度高、准确度高。
2、为实现上述目的，本发明采用的技术方案如下：
3、本发明提供一种检测苦味素含量的方法，包括以下步骤：供试品溶液的制备、对照品溶液的制备和hplc检测；所述hplc检测的流动相为乙腈-水溶液，所述供试品包括苦木及其提取物。
4、进一步地，hplc检测的流动相，乙腈的体积分数为25％-35％。
5、进一步地，hplc检测的流动相，乙腈的体积分数为30％。
6、进一步地，所述供试品溶液的制备包括以下步骤：
7、取供试品，加入甲醇，超声处理，过滤，取续滤液，即得供试品溶液。
8、进一步地，所述供试品与甲醇的用量比为0.5-2.5g：30-60ml。
9、进一步地，所述超声的时间为20-50min。
10、进一步地，所述hplc检测，色谱柱为c18柱。
11、进一步地，所述hplc检测，色谱柱为agilentsb-c18-c18。
12、进一步地，所述hplc检测中流速为0.5-1.5ml·min-1，柱温为20-30℃，进样量为5-20μl，检测波长为250-280nm。
13、进一步地，检测波长为261nm。
14、进一步地，所述对照品溶液的制备包括以下步骤：取苦味素对照品，加入甲醇溶解，即得对照品溶液。
15、进一步地，所述对照品溶液中苦味素的浓度为0.17-0.22mg/ml。
16、进一步地，所述对照品溶液中苦味素的浓度为0.2mg/ml。
17、在一些具体的实施方式中：
18、(1)供试品溶液的制备：
19、精密称取苦木提取物1g，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50ml，称重，超声处理30分钟，补重，过滤，取续滤液，即得供试品溶液。
20、(2)对照品溶液的制备：
21、取苦味素对照品，精密称定，置于棕色容量瓶中，用甲醇溶解定容，摇匀，制得每1ml含0.2mg的苦味素对照品溶液。
22、(3)hplc检测：
23、agilentsb-c18-c18(4.6mm×250mm，5μm)色谱柱；以乙腈(体积分数30％)-水溶液为流动相；流速1.0ml·min-1；检测波长261nm；柱温：25℃；进样量10μl。
24、相对于现有技术，本发明具有以下有益效果：
25、本发明建立了采用hplc法检测苦味素含量的方法，其操作简便、结果可靠、精密度高、稳定性强，能有效的表征苦木及其提取物的质量，完善了苦木药材的质量评价体系，填补了技术空白，为苦木及其提取物的质量全面、有效控制提供了理论与实践基础。
1.一种检测苦味素含量的方法，其特征在于，包括以下步骤：供试品溶液的制备、对照品溶液的制备和hplc检测；所述hplc检测的流动相为乙腈-水溶液，所述供试品包括苦木及其提取物。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述hplc检测的流动相为乙腈的体积分数为25％-35％。
3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述供试品溶液的制备包括以下步骤：
4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述供试品与甲醇的用量比为0.5-2.5g：30-60ml；超声的时间为20-50min。
5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述hplc检测中，色谱柱为c18柱。
6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述色谱柱为agilentsb-c18-c18。
7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述hplc检测中，柱温为20-30℃，流速为0.5-1.5ml·min-1，进样量为5-20μl。
8.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述hplc检测中，检测波长为250-280nm。
9.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述对照品溶液的制备包括以下步骤：取苦味素对照品，加入甲醇溶解，即得对照品溶液。
10.根据权利要求9所述的方法，其特征在于，所述对照品溶液中，苦味素的浓度为0.17-0.22mg/ml。
