本发明属于幽门螺杆菌诊断产品，具体涉及一种重组caga蛋白及其制备方法和应用。
背景技术：
1、幽门螺杆菌(helicobacterpylori，hp)是一类可以引起人胃上皮细胞持续感染，并导致严重并发症(消化性溃疡疾病、胃癌和胃粘膜相关淋巴组织(malt)淋巴瘤)发展的细菌。其中，作为参与幽门螺杆菌对胃上皮细胞持续感染的主要毒力因子细胞毒素相关基因a(caga)，其是一种120kda-145kda的癌蛋白，存在于约50％-70％的幽门螺杆菌菌株中(分泌caga的幽门螺杆菌是强毒力菌株，不分泌caga的幽门螺杆菌为弱毒力菌株)。caga通过4型分泌系统(t4ss)易位到胃上皮细胞，已被证明在疾病发展中发挥重要作用；具体地，caga通过影响不同的信号通路，促进炎症、增殖、运动和细胞极性的改变，介导宿主胃上皮细胞的一系列细胞内效应，从而增加肿瘤和胃炎的风险。
2、人体在感染分泌caga幽门螺杆菌后，体内会存在caga抗体，现有技术可以通过在体外重组表达caga蛋白，然后作为caga抗原利用免疫层析、化学发光等检测技术，检测人体内是否存在caga抗体，从而为诊断hp感染、分型提供帮助。
3、但是，目前现有的检测试剂或试剂盒中的重组caga蛋白与caga抗体的结合价较低，导致对幽门螺杆菌的分型检测准确率较低。
技术实现思路
1、本发明就是构建一种重组caga蛋白，以及公开了表达该蛋白的基因片段、重组表达载体、重组表达菌株以及制备方法；该重组caga蛋白与人体内对应抗体有较强的结合能力，可以很好的利用在幽门螺杆菌体外诊断的试剂中，有较高的诊断准确性。具体技术方案如下：
2、本发明一方面提供一种重组caga蛋白，其包含如seq id no.1所示的氨基酸序列。
3、本发明另一方面通过一种编码上述重组caga蛋白的基因片段。
4、本发明再一方面提供一种重组表达载体，包含本发明的基因片段。
5、本发明再一方面提供一种重组表达菌株，其包含本发明中的基因片段或本发明中的重组表达载体。
6、本发明再一方面提供一种本发明中重组caga蛋白的制备方法，包括：将本发明中的重组表达菌株进行培养即得到重组caga蛋白。
7、本发明再一方面提供一种幽门螺杆菌分型检测试剂，其包含本发明中的重组caga蛋白。
8、本发明再一方面提供一种幽门螺杆菌分型检测试剂盒，其包含本发明中的重组caga蛋白或本发明中的幽门螺杆菌分型检测试剂。
9、本发明再一方面提供一种本发明中的重组caga蛋白在制备幽门螺杆菌检测试剂或试剂盒中的应用。
10、本发明有益效果至少包括：
11、本发明中提供的重组caga蛋白在使用免疫层析法检测阳性患者血清相关抗体的分型方法中有较高的准确性，使用该重组caga蛋白分别检测强阳性、弱阳性和阴性血清样本中的caga抗体，阳性分型结果显示，与参考试剂盒结果相比，使用本发明的重组caga蛋白进行检测的ⅰ型符合率可以达到89.19％(样本数37)，ⅰ型假阳率可以低至4.92％(样本数61)，ⅱ型符合率可以达到90.00％(样本数30)，阴性符合率可以达到90.32％(样本数31)；与临床碳呼吸实验结果相比，阴性样本结果符合率可以达到97.6％(样本数82)。
12、本发明提供的重组caga蛋白的制备方法可制备得到大量可溶性重组caga蛋白。
1.重组caga蛋白，其特征在于，包含如seq id no.1所示的氨基酸序列。
2.编码权利要求1所述的重组caga蛋白的基因片段。
3.根据权利要求2所述的基因片段，其特征在于，包含如seq id no.2所示的序列。
4.重组表达载体，其特征在于，包含权利要求2或3的基因片段。
5.重组表达菌株，其特征在于，包含权利要求2或3所述的基因片段或权利要求4或5的重组表达载体。
6.权利要求1所述的重组caga蛋白的制备方法，其特征在于，包括：将权利要求6或7所述的重组表达菌株进行培养即得到重组caga蛋白。
7.根据权利要求6所述的制备方法，其特征在于，培养包括：将重组表达菌株在25℃-39℃，120rpm-200rpm培养至od600＝0.2-0.7；然后加入iptg诱导表达，25℃-39℃，120rpm-200rpm，表达得包含重组caga蛋白的菌液。
8.根据权利要求7所述的制备方法，其特征在于，包括：(1)培养结束后，将菌液8500g-12000g，2℃-8℃进行离心，得沉淀，沉淀进行重悬得混悬液；(2)将混悬液超声破碎，10000g-15000g，2℃-8℃离心得上清液；(3)上清液纯化得重组caga蛋白。
9.幽门螺杆菌分型检测试剂或试剂盒，其特征在于，包含权利要求1所述的重组caga蛋白。
10.权利要求1所述的重组caga蛋白在制备幽门螺杆菌检测试剂或试剂盒中的应用。
