植物乳杆菌M3在提高桔梗次生皂苷含量及降脂活性中的应用

    专利2025-06-01  116


    本发明涉及一种植物乳杆菌的应用。


    背景技术:

    1、中药桔梗为桔梗科(campanulaceae)植物platycodon grandiflorum(jacq.)a.dc.的干燥根,广泛分布于中国、韩国、蒙古、日本和俄罗斯。在我国东北和华北地区,桔梗被广泛种植,资源丰富。桔梗始载于《神农本草经》,具有宣肺利咽、祛痰排脓之功效,用于治疗咳嗽痰多、胸闷不畅、咽痛、肺痈吐脓等症。它是著名的药食两用植物,近年来,作为食品、保健品、化妆品等的原料使用广泛,2002年被列入药食同源物品目录。

    2、现代药理学研究表明,桔梗皂苷为桔梗的主要生物活性物质,它是具有两个侧糖苷链的齐墩烷型三萜羧酸3,28-o双链糖苷。糖基组成主要是d-葡萄糖、l-阿拉伯糖、l-鼠李糖、d-木糖、d-芹糖以及它们的衍生物。然而,桔梗皂苷等皂苷类成分在体内的吸收率很低,限制了其利用。越来越多的研究表明,在体内和体外桔梗皂苷可以转化为去糖基化、去羟基化、乙酰化和羟基化的代谢产物。目前,常见的皂苷转化方法有化学法、物理法、生物转化法。化学法和物理法的制备效率低,成本高,且污染严重,不利于大量生产和制备有效皂苷。


    技术实现思路

    1、本发明的目的是为了解决现有桔梗皂苷转化方法效率低、成本高、污染严重,且在体内吸收率低的技术问题,提供了一种植物乳杆菌m3在提高桔梗次生皂苷含量及降脂活性中的应用。

    2、植物乳杆菌m3在提高桔梗次生皂苷含量及降脂活性中的应用,植物乳杆菌(lactobacillus plantarum)m3(保藏编号cgmcc no.26065)用于桔梗发酵,以提高桔梗中桔梗次生皂苷含量及降脂活性;所述桔梗次生皂苷为桔梗皂苷d3、去芹糖-桔梗皂苷d3或去芹糖-桔梗皂苷d。

    3、所述植物乳杆菌m3用于提高桔梗中桔梗次生皂苷含量及降脂活性的方法如下:

    4、一、将桔梗根部粉碎,然后将粉末与8倍量体积浓度为75%酒精混合后,在80-100℃下加热回流提取3次,提取时间分别2h、2h和1h,滤过,合并滤液得到桔梗醇提液,减压回收溶剂,蒸干,得到桔梗醇提物浸膏;

    5、二、将桔梗醇提物浸膏上大孔树脂柱d101,然后依次用水、体积浓度为70%的乙醇和体积浓度为95%乙醇进行洗脱,40-60℃条件下减压回收溶剂后得到乙醇洗脱物,即桔梗总皂苷;

    6、三、向桔梗总皂苷中加入水,然后加热搅拌至桔梗总皂苷完全溶解,得到桔梗总皂苷水溶液,灭菌后再将保藏编号为cgmcc no.26065的植物乳杆菌m3的种子发酵液,按2-5%接种量接种于桔梗总皂苷水溶液进行发酵培养,发酵条件为:30-37℃恒温培养,发酵时间为10d-12d;即实现提高产物中桔梗次生皂苷含量及降脂活性,其中植物乳杆菌的种子发酵液菌体浓度为108-109cuf/ml。

    7、步骤一中将桔梗根部粉碎方法:将桔梗根部切片,自然晒干后在烘箱中烘干,待粉碎机粉碎后过筛,得到桔梗粉末;其中烘箱温度为40-75℃,过筛目数为30-50目。

    8、步骤一中按照质量、体积比为1:8的比例将粉末与体积浓度为75%酒精混合。

    9、步骤一中将桔梗醇提液采用旋转蒸发仪在60-80℃下减压浓缩。

    10、步骤三中所述桔梗总皂苷水溶液浓度为0.04g/ml。

    11、本发明的有益效果:

    12、本发明利用植物乳杆菌m3(cgmcc no.26065)发酵桔梗总皂苷,然后发酵产物通过高效液相色谱(hplc)联合质谱对桔梗总皂苷发酵产物的主要成分进行分析,发现得到三个桔梗次生皂苷,分别是桔梗皂苷d3、去芹糖-桔梗皂苷d3和去芹糖-桔梗皂苷d。进一步对发酵产物进行体外降脂活性评价,结果显示,经植物乳杆菌发酵的桔梗总皂苷发酵产物可明显减轻细胞内脂质堆积现象,显著降低细胞中tc、tg含量,其中125μg·ml-1发酵产物对tc、tg的清除率分别达23.73%、30.43%。本发明中所述的植物乳杆菌及其应用对新型桔梗食品、保健品以及药品的开发具有重要意义。

    13、本发明植物乳杆菌(lactobacillus plantarum)m3保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(cgmcc),保藏编号cgmcc no.26065,保藏地址是北京市朝阳区北辰西路1号院3号,保藏日期是2022年11月7日。



    技术特征:

    1.植物乳杆菌m3在提高桔梗次生皂苷含量及降脂活性中的应用,其特征在于植物乳杆菌(lactobacillus plantarum)m3用于桔梗发酵,以提高桔梗中桔梗次生皂苷含量及降脂活性;

    2.权利要求1所述植物乳杆菌m3在提高桔梗次生皂苷含量及降脂活性中的应用,其特征在于植物乳杆菌m3用于提高桔梗中桔梗次生皂苷含量及降脂活性的方法如下:

    3.根据权利要求2所述植物乳杆菌m3用于提高桔梗中桔梗次生皂苷含量及降脂活性的方法,其特征在于步骤一中将桔梗根部粉碎方法:将桔梗根部切片,自然晒干后在烘箱中烘干,待粉碎机粉碎后过筛,得到桔梗粉末;其中烘箱温度为40-60℃,过筛目数为30-50目。

    4.根据权利要求2所述植物乳杆菌m3用于提高桔梗中桔梗次生皂苷含量及降脂活性的方法,其特征在于步骤一中按照质量、体积比为1:8的比例将粉末与体积浓度为75%酒精混合。

    5.根据权利要求2所述植物乳杆菌m3用于提高桔梗中桔梗次生皂苷含量及降脂活性的方法,其特征在于步骤一中将桔梗醇提液采用旋转蒸发仪在60-80℃下减压浓缩。

    6.根据权利要求2所述植物乳杆菌m3用于提高桔梗中桔梗次生皂苷含量及降脂活性的方法,其特征在于步骤三中所述桔梗总皂苷水溶液浓度为0.04g/ml。


    技术总结
    植物乳杆菌M3在提高桔梗次生皂苷含量及降脂活性中的应用,它涉及一种植物乳杆菌的应用。本发明为了解决现有桔梗皂苷转化方法效率低、成本高、污染严重,且在体内吸收率低的问题。植物乳杆菌M3用于桔梗发酵,以提高桔梗中桔梗次生皂苷含量及降脂活性;方法:一、桔梗总皂苷的制备;二、利用植物乳杆菌发酵桔梗总皂苷。经植物乳杆菌发酵的桔梗总皂苷发酵产物可明显减轻细胞内脂质堆积现象,显著降低细胞中胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)含量,其中125μg·mL<supgt;‑1</supgt;发酵产物对TC、TG的清除率分别达19.28%、34.69%。本发明属于应用植物乳杆菌提高桔梗次生皂苷含量及降脂活性的领域。

    技术研发人员:史琳,乌日娜,王伟明,崔彤,武俊瑞,胡新玥,钟雪松
    受保护的技术使用者:沈阳农业大学
    技术研发日:
    技术公布日:2024/4/29
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