本发明涉及酶及蛋白质，涉及通过酶解法获得具有抗氧化活性的小分子多肽，将小分子多肽用于食品海参加工中的方法，尤其是一种食品海参的生物加工方法。
背景技术：
1、海参作为较为昂贵的营养食品，主要的储存方法为脱水干燥后密封保存，食用时再复水泡开。这种方式虽然可以使海参具有较长的保存期限，但泡发海参需要一定的技巧，且泡发海参的口感远远比不上新鲜海参的爽脆口感，使海参的受众降低。另外，目前市面上还存在一种即食海参，将新鲜的海参煮熟后真空包装起来，可通过冷冻的方式长时间储存，食用时解冻即可，口感与新鲜海参无异，但储存只能在冷冻环境中进行，常温环境内容易发生变质。
2、海参的变质与自溶是目前即食海参储存面临的最大难题。海参的变质通常由细菌代谢及自身细胞氧化导致。海参的自溶由其自身体内的酶类引发，当所处环境不佳时，自身释放相应酶类使其自身酶解融化。目前已知可通过添加还原剂的方式减缓氧化反应从而延缓变质。然而过于强效的还原剂可能引起自身的酸碱性进一步加剧海参的自溶作用，因此找到一种有效的、对海参低刺激的还原剂处理海参以延长海参保质期是目前研究的重中之重。
技术实现思路
1、本发明的目的在于克服现有技术的不足之处，提供一种食品海参的生物加工方法及制备方法。
2、本发明解决其技术问题是采取以下技术方案实现：
3、一种食品海参的生物加工方法，包括以下步骤：
4、s1、采用酶解法从新鲜海刺参体壁中获得海参源的小分子多肽，小分子多肽的蛋白质序列如seq id no：1所示；
5、s2、以小分子多肽为原料配制浓度为2-10mg/ml的生物处理液；
6、s3、取新鲜海参经去除内脏处理后洗净并蒸煮10min，自然降温后获得熟品海参；
7、s4、将熟品海参置于生物处理液中浸泡10h后将熟品海参捞出沥干，伴随新制备的生物处理液一同塑封包装。
8、酶解法中先后使用中性蛋白酶以及α-胰凝乳蛋白酶对海参体壁进行酶解，具体为：首先使用中性蛋白酶在ph=7.0，温度45℃，加酶量7000u/g，酶解6h；沸水灭酶后使用α-胰凝乳蛋白酶在ph=8.5，温度37℃，加酶量7000u/g，酶解6h，沸水灭酶10min获得酶解产物。
9、获得的酶解产物进行超滤、浓缩以及离子交换柱层析后获得小分子多肽。
10、离子交换柱层析首先采用q-sepharose ff高效离子交换柱进行分离，柱体积20cm×5.4cm，用ph8.0 20mmol/l tris-hcl 1mmol/l edta缓冲液流洗平衡层析柱，将酶解产物以1.5ml/min流速上样；用含有0.1mol/l nacl的tris-hcl和edta缓冲液进行洗脱；经过抗氧化性验证收集具有抗氧化性的组分用zorbax 300 scx交换色谱柱进一步分离，柱体积250mm×4.6mm，流动相为体积比10:90的乙腈-磷酸缓冲溶液，流速0.5ml/min，检测波长260nm，收集具有抗氧化性的组分。
11、生物处理液中还包括浓度为35g/l的氯化钠溶液，用以模拟海洋环境，避免引起海参机体免疫机制。
12、本发明的有益效果是：
13、1、本发明从海参体壁内分离出一种小分子多肽，经过抗氧化性实验测得该小分子多肽具有较好的清除dpph、oh-以及o2-的能力，说明其具有一定的抗氧化性，用于即食海参的保鲜加工中可保持海参常温下的新鲜度，延长货架期。
14、2、小分子多肽从海参体壁内分离出，与海参具有同源性，可避免触发海参自身酶类的保护机制。
1.一种食品海参的生物加工方法，其特征在于，包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述的食品海参的生物加工方法，其特征在于，酶解法中先后使用中性蛋白酶以及α-胰凝乳蛋白酶对海参体壁进行酶解，具体为：首先使用中性蛋白酶在ph=7.0，温度45℃，加酶量7000u/g，酶解6h；沸水灭酶后使用α-胰凝乳蛋白酶在ph=8.5，温度37℃，加酶量7000u/g，酶解6h，沸水灭酶10min获得酶解产物。
3.根据权利要求2所述的食品海参的生物加工方法，其特征在于，获得的酶解产物进行超滤、浓缩以及离子交换柱层析后获得小分子多肽。
4.根据权利要求3所述的食品海参的生物加工方法，其特征在于，离子交换柱层析首先采用q-sepharose ff高效离子交换柱进行分离，柱体积20cm×5.4cm，用ph8.0 20mmol/ltris-hcl 1mmol/l edta缓冲液流洗平衡层析柱，将酶解产物以1.5ml/min流速上样；用含有0.1mol/l nacl的tris-hcl和edta缓冲液进行洗脱；经过抗氧化性验证收集具有抗氧化性的组分用zorbax 300 scx交换色谱柱进一步分离，柱体积250mm×4.6mm，流动相为体积比10:90的乙腈-磷酸缓冲溶液，流速0.5ml/min，检测波长260nm，收集具有抗氧化性的组分。
5.根据权利要求1所述的食品海参的生物加工方法，其特征在于，生物处理液中还包括浓度为35g/l的氯化钠溶液。
