本发明涉及组织培养液，具体地说，涉及一种文冠果组织培养液。
背景技术：
1、在植物组织培养技术中，文冠果组织培养液是一种专为文冠果组织培养设计的特殊营养液，包含了多种有机物和无机物的复杂混合物，能够满足文冠果细胞、组织或器官在体外生长发育所需的全部营养条件。
2、在文冠果组织培养液中，为了降低文冠果组织的培育周期，通常会使用赤霉素、吲哚-3-乙酸或6-苄基氨基嘌呤等外源激素调节剂调控植物组织的生长、分化和发育，加速文冠果组织细胞的增殖和扩大，但长期暴露于外源激素调节剂下，文冠果组织会产生适应性反应，激素受体钝化、代谢途径改变，进而影响文冠果组织对养分的有效摄取和利用，甚至导致组织退化的问题，鉴于此，我们提出一种文冠果组织培养液。
技术实现思路
1、本发明的目的在于提供一种文冠果组织培养液，以解决上述背景技术中提出的文冠果组织长期暴露于外源激素调节剂下，文冠果组织会产生适应性反应，激素受体钝化、代谢途径改变，进而影响文冠果组织对养分的有效摄取和利用，甚至导致组织退化的问题。
2、为实现上述目的，本发明提供一种文冠果组织培养液，包括以下组分：trp-nmn-α培养基75-85重量份、外源激素调节剂6-12重量份、酸度调节剂1-5重量份和碳源3-8重量份；
3、其中，所述trp-nmn-α培养基通过0.8～1.6g/l浓度的色氨酸与0.2～0.5mg/l浓度的烟酰胺单核苷酸的混合液，对ms培养基进行改性制备得到，且trp-nmn-α培养基还包括抗氧化剂；
4、所述外源激素调节剂为吲哚-3-乙酸、α-萘乙酸和6-苄基氨基嘌呤的混合物，且吲哚-3-乙酸、α-萘乙酸和6-苄基氨基嘌呤的混合比例为1～3：1：0.3；
5、所述ms培养基中包括190～210mg/l浓度的甘氨酸、0.5～1.2mg/l浓度的盐酸吡哆醛、0.4～0.8mg/l浓度的硫胺素、80～120mg/l浓度的肌醇、6～9g/l浓度的琼脂、0.4～1.0mg/l浓度的吡哆醇、无机盐和微量元素。
6、作为优选，所述trp-nmn-α培养基的具体制备步骤为：
7、s1.1、将色氨酸缓慢加入蒸馏水中，采用恒温水浴法，在40-50℃温度下加速色氨酸溶解，制备得到浓度为0.8～1.6g/l色氨酸溶液；
8、将烟酰胺单核苷酸缓慢加入去离子水中，直至其完全溶解，制备得到浓度为0.2～0.5mg/l的烟酰胺单核苷酸溶液；
9、s1.2、将色氨酸溶液缓慢倒入至烟酰胺单核苷酸溶液中，并将烟酰胺单核苷酸溶液与色氨酸溶液以1:1～3的比例混合，使用搅拌器将烟酰胺单核苷酸溶液与色氨酸溶液在130-150rpm搅拌速度下，搅拌8-12min，直至其完全混合，制备得到色氨酸-烟酰胺单核苷酸混合液；
10、s1.3、取80-85重量份ms培养基，将0.8-1.2重量份抗氧化剂加入到ms培养基中，使用搅拌器，将ms培养基在30-70rpm搅拌速度下，搅拌3-5min，直至抗氧化剂与ms培养基混合均匀，加入1-5重量份酸度调节剂，调节其ph至5.7-5.9。
11、s1.4、待ms培养基ph稳定后，在无菌条件下将色氨酸-烟酰胺单核苷酸混合液加入至ms培养基中，使用搅拌器在80-120rpm搅拌速度下，搅拌8-15min，直至搅拌均匀，对ms培养基进行改性，得到trp-nmn-α培养基。
12、作为优选，所述抗氧化剂为抗坏血酸、维生素e、l-半胱氨酸和谷胱甘肽中的任一种。
13、作为优选，所述酸度调节剂为氢氧化钠、磷酸二氢钾或磷酸氢二钠中的任一种。
14、作为优选，所述外源激素调节剂的具体制备方法为：
15、s2.1、分别将吲哚-3-乙酸、α-萘乙酸和6-苄基氨基嘌呤溶解至灭菌去离子水中，确保完全溶解；
16、s2.2、将溶解好的吲哚-3-乙酸、α-萘乙酸和6-苄基氨基嘌呤溶液以1～3：1：0.3的体积比例混合，并加入到同一个无菌容器中，使用搅拌器充分搅拌直至完全混合；
17、s2.3、混合后的溶液通过0.22μm滤膜进行过滤除菌处理，得到外源激素调节剂。
18、作为优选，所述搅拌器的搅拌速度为35-80rpm。
19、作为优选，所述文冠果组织培养液的具体制备步骤如下：
20、s3.1、取75-85重量份trp-nmn-α培养基，加入预先加热至45-50℃的去离子水中完全溶解；
21、s3.2、取6-12重量份外源激素调节剂缓慢加入到trp-nmn-α培养基中，并使用搅拌器搅拌混合均匀；
22、s3.3、将3-8重量份蔗糖作为碳源，利用热水浴方式，在45-60℃范围下使碳源在蒸馏水中完全溶解，然后加入到trp-nmn-α培养基中；
23、s3.4、取1-5重量份酸度调节剂将trp-nmn-α培养基的ph调至5.6-5.8得到培养液；
24、s3.5、将调节好ph的培养液分装入已灭菌的培养皿中，密封后放入高压蒸汽灭菌锅中，进行高压蒸汽灭菌，灭菌结束后，待培养液自然冷却至室温，得到最终的文冠果组织培养液。
25、作为优选，所述搅拌器的搅拌速度为160-280rpm，搅拌时间为15-20min。
26、作为优选，所述s3.5中，培养液在高压蒸汽灭菌锅的温度120～122℃、压力103kpa下保持15-20min。
27、与现有技术相比，本发明的有益效果：
28、该一种文冠果组织培养液中，采用色氨酸与烟酰胺单核苷酸改性ms培养基得到的trp-nmn-α培养基，色氨酸作为吲哚-3-乙酸生物合成的前体，在细胞内经过一系列生化反应转化为吲哚乙酸，这一过程受到高浓度nad+的促进作用，而烟酰胺单核苷酸通过补救合成途径提高细胞内nad+水平，进一步增强吲哚乙醛氧化酶的活性，从而加快色氨酸向吲哚乙酸的转化效率，可提高植物组织对养分的吸收利用效率，并降低对外源激素的依赖性。
1.一种文冠果组织培养液，其特征在于，包括以下组分：trp-nmn-α培养基75-85重量份、外源激素调节剂6-12重量份、酸度调节剂1-5重量份和碳源3-8重量份；
2.根据权利要求1所述的文冠果组织培养液，其特征在于，所述trp-nmn-α培养基的具体制备步骤为：
3.根据权利要求1所述的文冠果组织培养液，其特征在于，所述抗氧化剂为抗坏血酸、维生素e、l-半胱氨酸和谷胱甘肽中的任一种。
4.根据权利要求1所述的文冠果组织培养液，其特征在于，所述酸度调节剂为氢氧化钠、磷酸二氢钾或磷酸氢二钠中的任一种。
5.根据权利要求1所述的文冠果组织培养液，其特征在于，所述外源激素调节剂的具体制备方法为：
6.根据权利要求5所述的文冠果组织培养液，其特征在于，所述搅拌器的搅拌速度为35-80rpm。
7.根据权利要求1所述的文冠果组织培养液，其特征在于，所述文冠果组织培养液的具体制备步骤如下：
8.根据权利要求7所述的文冠果组织培养液，其特征在于，所述搅拌器的搅拌速度为160-280rpm，搅拌时间为15-20min。
9.根据权利要求7所述的文冠果组织培养液，其特征在于，所述s3.5中，培养液在高压蒸汽灭菌锅的温度120～122℃、压力103kpa下保持15-20min。
