一株产β-苯乙醇的毕赤酵母菌株及其应用的制作方法

    专利2025-04-01  5


    本发明属于微生物发酵,具体而言,涉及一株产β-苯乙醇的毕赤酵母菌株及其应用。


    背景技术:

    1、酒糟是酿酒过程中产生的副产品,主要由酒精、酵母细胞、酒糟蛋白等组成。酒糟富含高蛋白、低脂肪、低糖、多种维生素和微量元素等营养成分,具有潜在的高附加值。在食品、饲料、生物制品等多个领域具有广泛的应用前景,酒糟的开发和利用有利于减少酿酒行业的废弃物排放,促进资源的循环利用和环保可持续发展。

    2、β-苯乙醇,常温下为无色粘稠液体,具有清甜的玫瑰花香味,存在于苹果、杏仁、香蕉、桃子、梨子、草莓、可可、蜂蜜等天然食物中;溶于水和甘油,可混溶于醇、醚。其主要用以配置蜂蜜、面包、桃子和浆果类等食物的食用香精,广泛作为调配香皂和化妆品的香精。β-苯乙醇是一种酒类中常见的芳香化合物,其分子式为c8h10o,是构成豉香型白酒和米香型白酒独特风味的关键成分之一。

    3、酒糟直接作为饲料使用,其含有的酒精可以使家畜安静地进行反刍,但是酒精含量高会使家畜出现中毒现象。而且酒糟中还含有谷物类纤维,例如稻壳,所占比例能达到湿重的20%,这些谷物纤维不易消化,会造成家畜有消化不良的反应。因此,酒糟需要发酵后才能作为饲料使用。但是,酒糟发酵生产的饲料有不良气味影响饲料适口性。


    技术实现思路

    1、为了解决上述技术问题,本发明提供一株高产β-苯乙醇的毕赤酵母菌株。该毕赤酵母菌株能耐受酒糟环境,在酒糟中能快速生长并生产β-苯乙醇,在酒糟中发酵后能提高酒糟的蛋白质含量,增加酒糟饲料的香味,提高酒糟饲料的适口性。

    2、具体地,该毕赤酵母菌株(pichia manshurica)命名为j2,已于2023年12月1日保藏于中国典型培养物保藏中心(中国,武汉,武汉大学),保藏编号为cctcc no:m 20232413。

    3、在优选的实施方案中,所述毕赤酵母菌株的18s rdna序列如seq id no.1所示。

    4、本发明中提供的毕赤酵母菌株(pichia manshurica)j2能够用于制备成微生物制剂。该毕赤酵母菌株j2及包含其的微生物制剂均可用于制备β-苯乙醇的方法中,还可用于制备含有β-苯乙醇的酒糟饲料。

    5、将毕赤酵母菌株(pichia manshurica)j2用于制备含有β-苯乙醇的酒糟饲料的方法包括以下步骤:

    6、s1、在无菌条件下,挑取毕赤酵母菌株j2转接于活化培养基中,于20~35℃培养24~48h,得到活化培养液;

    7、s2、在无菌条件下,将步骤s1中得到的活化培养液接种于种子培养基中,于20~35℃培养12~24h,得到毕赤酵母种子液;

    8、s3、将水分含量为45wt%~50wt%的酒糟与酒糟发酵辅料混合,向得到的混合物中接种所述毕赤酵母种子液,于20~35℃下恒温发酵2~4天;发酵结束后,将发酵产物烘干至含水量为10wt%~11wt%,得到所述酒糟饲料。

    9、在优选的实施方案中,步骤s1中所述活化培养基的主要成分为:每1000ml蒸馏水中包含1%酵母粉,2%蛋白胨,2%葡萄糖,ph=3.0~7.0。

    10、在进一步优选的实施方案中,步骤s1中所述活化培养基的ph=5.5~6.5。

    11、在进一步优选的实施方案中,步骤s1中的培养温度为28~32℃。

    12、在优选的实施方案中,步骤s2中所述种子培养基的主要成分为:每1000ml蒸馏水中包含1%酵母粉,2%蛋白胨,2%葡萄糖,ph=3.0~7.0。

    13、在进一步优选的实施方案中,步骤s2中所述种子培养基的ph=5.5~6.5。

    14、在进一步优选的实施方案中,步骤s2中的培养温度为28~32℃。

    15、在优选的实施方案中,步骤s3中所述酒糟发酵辅料的质量占所述酒糟的干基质量的5~10%,所述酒糟发酵辅料为麸皮、豆粕、膨化玉米粉、大豆蛋白中至少一种。

    16、在优选的实施方案中,步骤s3中所述毕赤酵母种子液的接种量为0.2~0.3亿cfu/g酒糟干基。

    17、在进一步优选的实施方案中,步骤s3中的培养温度为28~32℃。

    18、本发明具有以下有益效果:本发明提供的毕赤酵母菌株j2能耐受酒糟环境,在酒糟中能快速生长并生产β-苯乙醇。该毕赤酵母菌株j2在酒糟中发酵2天就能使酵母菌数量达到14.2×108cfu/g酒糟干基,在ypd液体培养基中发酵24h就能使β-苯乙醇的含量达到79.32mg/l,增加酒糟饲料的香味,提高酒糟饲料的适口性。此外,该毕赤酵母菌株j2在酒糟中发酵后还能提高酒糟饲料的蛋白质含量,与市售酿酒酵母相比,蛋白质含量提高15%以上,说明该菌株还能提高酒糟饲料的营养价值。



    技术特征:

    1.一株产β-苯乙醇的毕赤酵母菌株,其特征在于,所述毕赤酵母菌株命名为j2,已于2023年12月1日保藏于中国典型培养物保藏中心,保藏编号为cctcc no:m 20232413。

    2.根据权利要求1所述的产β-苯乙醇的毕赤酵母菌株,其特征在于,所述毕赤酵母菌株的18s rdna序列如seq id no.1所示。

    3.包含权利要求1或2所述的产β-苯乙醇的毕赤酵母菌株的微生物制剂。

    4.权利要求1或2所述的产β-苯乙醇的毕赤酵母菌株在制备β-苯乙醇中的应用。

    5.权利要求1或2所述的产β-苯乙醇的毕赤酵母菌株在制备含β-苯乙醇的酒糟饲料中的应用。

    6.根据权利要求5所述的应用,其特征在于,所述酒糟饲料的制备方法包括以下步骤:

    7.根据权利要求6所述的应用,其特征在于,步骤s1中所述活化培养基的主要成分为:每1000ml蒸馏水中包含1%酵母粉,2%蛋白胨,2%葡萄糖,ph=3.0~7.0。

    8.根据权利要求6所述的应用,其特征在于,步骤s2中所述种子培养基的主要成分为:每1000ml蒸馏水中包含1%酵母粉,2%蛋白胨,2%葡萄糖,ph=3.0~7.0。

    9.根据权利要求6所述的应用,其特征在于,步骤s3中所述酒糟发酵辅料的质量占所述酒糟的干基质量的5~10%;或/和所述酒糟发酵辅料为麸皮、豆粕、膨化玉米粉、大豆蛋白中至少一种。

    10.根据权利要求6所述的应用,其特征在于,步骤s3中所述毕赤酵母种子液的接种量为0.2~0.3亿cfu/g酒糟干基。


    技术总结
    本发明提供一株产β‑苯乙醇的毕赤酵母菌株及其应用,属于微生物发酵技术领域。该毕赤酵母菌株命名为J2,已于2023年12月1日保藏于中国典型培养物保藏中心,保藏编号为CCTCC NO:M 20232413。该毕赤酵母菌株J2能耐受酒糟环境,在酒糟中能快速生长并生产β‑苯乙醇,在酒糟中发酵后能提高酒糟的蛋白质含量,增加酒糟饲料的香味,提高酒糟饲料的适口性和营养价值。

    技术研发人员:刘建忠,季光明,胡芳,徐健,卢志超,程润喜,黄霜
    受保护的技术使用者:路德环境科技股份有限公司
    技术研发日:
    技术公布日:2024/4/29
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