本发明属于生物化学，具体涉及一种糖基化米渣蛋白酶解物及其制备方法和应用。
背景技术：
1、大米是全球最主要的粮食作物之一，大米中的主要组分为淀粉(80％～90％)与蛋白质(7％～8％)。其中蛋白质与其他谷类蛋白质相比，具有低致敏性、高生物价、营养价值全面等特点。作为谷物中的贮藏蛋白质，大米蛋白的功能特性较差，限制了其在食品工业中的应用，因此对其进行酶解并进行糖基化修饰来改善功能特性及生物活性具有重要意义。目前的糖基化改性由于耗时长、糖基化进程的不可控性，容易生成有害的晚期糖基化终末产物，所以通过选择大米蛋白水解度、糖种类与量以及选择改性方法来控制糖基化反应的进程显得非常重要。
2、肽与糖通过静电结合和共价结合为肽-糖共价偶联物。糖肽可通过糖的羰基与氨基酸残基的氨基或羧基共价键相连而成，也可通过化学/酶解糖蛋白而制备。与糖蛋白相比，糖肽类的分子量较小，其成分较简单。目前，糖肽合成的主要方法主要包括化学合成(直接合成、液相和固相形成、天然化学连接)、酶合成和化学酶合成。肽-糖共价偶联物还具有多种生物活性，如抗氧化、抗菌、免疫调节和抗癌活性，肽-糖共价偶联物与前体相比具有更强的热稳定性、抗消化酶特性及生物活性，具有广阔的应用前景。
技术实现思路
1、本发明的目的在于提供一种具有优异的抗氧化效果且不易被消化酶水解的糖基化米渣蛋白酶解物。
2、实现上述目的包括如下技术方案。
3、本发明第一方面提供糖基化米渣蛋白酶解物，所述糖基化米渣蛋白酶解物由单糖对米渣蛋白酶解物进行糖基化得到；其中，所述米渣蛋白酶解物的酶解度为1％～12％；所述单糖为半乳糖、葡萄糖中的任一种。
4、在其中一些实施例中，所述米渣蛋白酶解物的酶解度为3％～10％。
5、在其中一些实施例中，所述米渣蛋白酶解物的酶解度为6％～10％。
6、在其中一些实施例中，所述米渣蛋白酶解物的酶解度为6％～9％。
7、在其中一些实施例中，所述米渣蛋白酶解物的酶解度为8.5％～9.5％。
8、在其中一些实施例中，所述单糖为半乳糖。
9、在其中一些实施例中，所述米渣蛋白酶解物采用中性蛋白酶、风味蛋白酶或胰蛋白酶进行酶解得到；优选地，所述米渣蛋白酶解物采用胰蛋白酶进行酶解得到。
10、本发明第二方面提供一种糖基化米渣蛋白酶解物的制备方法，包括如下步骤：
11、(1)将米渣原料和酶进行反应得到酶解度为1％～12％的米渣蛋白酶解物；
12、(2)将所得米渣蛋白酶解物与单糖混合进行反应得所述糖基化米渣蛋白酶解物；所述单糖为半乳糖、葡萄糖中的任一种。
13、在其中一些实施例中，步骤(2)中，反应体系中所述米渣蛋白酶解物的浓度为5mg/ml～15mg/ml，反应体系中所述单糖的浓度为15mg/ml～25mg/ml；优选地，反应体系中所述米渣蛋白酶解物的浓度为8mg/ml～12mg/ml，反应体系中所述单糖的浓度为18mg/ml～22mg/ml；更优选地，反应体系中所述米渣蛋白酶解物的浓度为9mg/ml～11mg/ml，反应体系中所述单糖的浓度为19mg/ml～21mg/ml。
14、在其中一些实施例中，步骤(1)所述反应的温度为45℃～55℃，ph值为7～8.5；优选地，步骤(1)所述反应的温度为48℃～52℃，ph值为7～8；和/或，
15、步骤(2)所述反应的温度为75℃～85℃，反应时间为80min～100min；优选地，步骤(2)所述反应的温度为78℃～82℃，反应时间为88min～92min。
16、在其中一些实施例中，所述酶为中性蛋白酶、风味蛋白酶或胰蛋白酶；优选地，所述酶为胰蛋白酶；和/或，
17、所述米渣原料和所述酶的用量比为1:90～110，所述酶的酶活为1400u/mg～1600u/mg；和/或，
18、步骤(1)所述反应在溶剂中进行，优选地，所述溶剂为蒸馏水；和/或，
19、步骤(2)所述反应在缓冲溶液中进行；优选地，所述缓冲溶液为磷酸缓冲溶液，ph值为6.5～7.5；
20、和/或，所述单糖为半乳糖；和/或，
21、所述米渣蛋白酶解物的酶解度为3％～10％；优选地，所述米渣蛋白酶解物的酶解度为6％～10％；更优选地，所述米渣蛋白酶解物的酶解度为8.5％～9.5％。
22、本发明第三方面提供一种如上所述的糖基化米渣蛋白酶解物在制备抗氧化剂中的应用。
23、本发明第四方面提供一种抗氧化剂，所述抗氧化剂包括如上所述的糖基化米渣蛋白酶解物。
24、本发明第五方面提供一种药物组合物，所述药物组合物包括如上所述的糖基化米渣蛋白酶解物，以及医药学上可接受的佐剂。
25、本发明第六方面提供一种营养制剂组合物，所述营养制剂组合物包括如上所述的糖基化米渣蛋白酶解物，以及医药学上可接受的佐剂。
26、本发明中，发现当使用特定的单糖种类对特定水解度的米渣蛋白酶解物进行糖基化处理后，得到的糖基化米渣蛋白酶解物能够有效提高体外和细胞内环境中的abts自由基、羟自由基、超氧阴离子清除活性，显著降低细胞损伤后的h2o2含量和降低细胞的mda水平，提高cat、sod的活力和gsh的含量，即具有更优的抗氧化活性，能够作为抗氧化剂调节机体的功能，且该糖基化米渣蛋白酶解物具有抗消化酶特性，进入机体后不容易被消化酶消化水解，且无细胞毒性，安全性高。为大米加工副产物的深度开发提供进一步理论依据。
1.一种糖基化米渣蛋白酶解物，其特征在于，所述糖基化米渣蛋白酶解物由单糖对米渣蛋白酶解物进行糖基化得到；其中，所述米渣蛋白酶解物的酶解度为1％～12％；所述单糖为半乳糖、葡萄糖中的任一种。
2.如权利要求1所述的糖基化米渣蛋白酶解物，其特征在于，所述米渣蛋白酶解物的酶解度为3％～10％；优选地，所述米渣蛋白酶解物的酶解度为6％～10％；更优选地，所述米渣蛋白酶解物的酶解度为8.5％～9.5％。
3.如权利要求1所述的糖基化米渣蛋白酶解物，其特征在于，所述单糖为半乳糖。
4.如权利要求1至3任一项所述的糖基化米渣蛋白酶解物，其特征在于，所述米渣蛋白酶解物采用中性蛋白酶、风味蛋白酶或胰蛋白酶进行酶解得到；优选地，所述米渣蛋白酶解物采用胰蛋白酶进行酶解得到。
5.一种糖基化米渣蛋白酶解物的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
6.如权利要求5所述的糖基化米渣蛋白酶解物的制备方法，其特征在于，
7.如权利要求5所述的糖基化米渣蛋白酶解物的制备方法，其特征在于，步骤(1)所述反应的温度为45℃～55℃，ph值为7～8.5；优选地，步骤(1)所述反应的温度为48℃～52℃，ph值为7～8；和/或，
8.如权利要求5所述的糖基化米渣蛋白酶解物的制备方法，其特征在于，所述酶为中性蛋白酶、风味蛋白酶或胰蛋白酶；优选地，所述酶为胰蛋白酶；和/或，
9.权利要求1至4任一项所述的糖基化米渣蛋白酶解物在制备抗氧化剂中的应用。
10.一种抗氧化剂，其特征在于，所述抗氧化剂包括权利要求1-4任一项所述的糖基化米渣蛋白酶解物。
