本发明属于医药领域，具体涉及recg解旋酶抑制剂在抗铜绿假单胞菌方面的应用。
背景技术：
：：1、铜绿假单胞菌(pseudomonas aeruginosa，pa)是一种革兰氏阴性菌，属于临床上常见的机会致病菌之一，可造成一系列威胁生命的急性或慢性感染，包括囊性纤维化(cf)、医院获得性肺炎(hap)、尿路感染、外耳道炎、烧伤和创伤、骨骼和关节感染等[1,2]。此外，铜绿假单胞菌占慢性阻塞性肺疾病(copd)患者感染性加重的5％以上并与这些患者的死亡率增加有关[3]。其中就医院获得性肺炎来说，铜绿假单胞菌的感染占其中的20％，由铜绿假单胞菌引起的死亡率占30％，主要是因为铜绿假单胞菌可以破坏肺屏障，引起血液感染，导致病人的预后很差[4-7]。2、目前在大多数情况下，针对铜绿假单胞菌感染一般采用抗生素进行联合治疗。但随着广泛耐药(xdr)甚至全耐药(pdr)菌株不断增多,针对于铜绿假单胞菌可应用的敏感药物非常有限。抗生素几乎是治疗铜绿假单胞菌感染的唯一手段，临床上对新型抗生素需求十分迫切，因此研发新型抗生素尤其是可以抗多重耐药(mdr)和xdr铜绿假单胞菌的药物尤为重要和迫切。3、dna双链断裂(dna double-strand break，dsb)是一种最严重的dna损伤，可以威胁到生物体的生命。dsb修复方式有：同源重组(hr)、非同源末端连接(nhej)和单链退火(ssa)。相比nhej而言，hr修复具有更高的精确性[8,9]。hr是生物体进行dna损伤修复和产生遗传多样性所必需的生理过程[10]。在细菌中，hr早期由recbcd和reca介导，直到形成霍勒迪连接体(holliday junction，hj)[11,12]。在hr后期，ruvab或recg驱动hj的分支迁移，然后将新形成的dna结构分解为两个单独的重组dna双链[13]。4、recg是一种单体双链dna解旋酶/异构酶，属于超家族2解旋酶，它几乎存在于所有已测序的细菌种属中[14]。recg可以以atp依赖的方式催化多种分支dna底物的解旋和分解，包括：hjs、dna复制叉、d-loops、r-loops等[15-18]。同时recg解旋酶是一个多功能蛋白，它参与体内多种生理过程，包括：同源重组、复制叉反转、重启复制等。因此，以recg解旋酶为靶标的药物发现和药物设计可为开发新型的抗铜绿假单胞菌药物开辟新的途径。5、参考文献：6、[1]gales a c,jones r n,turnidge j,et al.characterization ofpseudomonas aeruginosa isolates:occurrence rates,antimicrobial susceptibilitypatterns,and molecular typing in the global sentry antimicrobial surveillanceprogram,1997-1999[j].clinical infectious diseases:an official publication ofthe infectious diseases society of america,2001,32 suppl 2:s146-55.7、[2]lyczak j b,cannon c l,pier g b.lung infections associated withcystic fibrosis[j].clinical microbiology reviews,2002,15(2):194-222.8、[3]murphy t f.pseudomonas aeruginosa in adults with chronicobstructive pulmonary disease[j].current opinion in pulmonary medicine,2009,15(2):138-42.9、[4]fagon j y,chastre j,domart y,et al.nosocomial pneumonia inpatients receiving continuous mechanical ventilation.prospective analysis of52 episodes with use of a protected specimen brush and quantitative culturetechniques[j].the american review ofrespiratory disease,1989,139(4):877-84.10、[5]george d l,falk p s,wunderink r g,et al.epidemiology ofventilator-acquired pneumonia based on protected bronchoscopic sampling[j].american journal of respiratory and critical care medicine,1998,158(6):1839-47.11、[6]heyland d k,cook d j,griffith l,et al.the attributable morbidityand mortality of ventilator-associated pneumonia in the critically illpatient.the canadian critical trials group[j].american journal of respiratoryand critical care medicine,1999,159(4 pt 1):1249-56.12、[7]rello j,gallego m,mariscal d,et al.the value of routine microbialinvestigation in ventilator-associated pneumonia[j].american journal ofrespiratory and critical care medicine,1997,156(1):196-200.13、[8]caldecott kw.single-strand break repair and genetic disease[j].nature reviews genetics,2008,9(8):619-31.14、[9]west s c.molecular views of recombination proteins and theircontrol[j].nature reviews molecular cell biology,2003,4(6):435-45.15、[10]holliday r.a mechanism for gene conversion in fungi[j].geneticsresearch,2008,89(5-6):285-307.16、[11]kowalczykowski s c,eggleston a k.biochemistry ofhomologousrecombination inescherichia coli[j].microbiological reviews,1994,58(3):401-465.17、[12]singleton,martin,r,et al.crystal structure of recbcd enzymereveals a machine for processing dna breaks[j].nature,2004,432(7014):187-193.18、[13]lilley d,white m f.the junction-resolving enzymes[j].nat rev molcell biol,2001,2(6):433-443.19、[14]sharples gj,ingleston sm,lloyd rg(1999)holliday junctionprocessing in bacteria:insights from the evolutionary conservation of ruvabc,recg,and rusa.j bacteriol 181:5543–5550.20、[15]vincent sd,mahdi aa&lloyd rg(1996)the recg branch migrationprotein of escherichia coli dissociates r-loops.j mol biol 264,713–721.21、[16]fukuoh a,iwasaki h,ishioka k&shinagawa h(1997)atp-dependentresolution of r-loops at the cole1 replication origin by escherichia colirecg protein,a holliday junction-specific helicase.embo j16,203–209.22、[17]whitby mc&lloyd rg(1998)targeting holliday junctions by the recgbranch migration protein of escherichia coli.j biol chem 273,19729–19739.23、[18]briggs gs,mahdi aa,weller gr,wen q&lloyd g(2004)interplay betweendna replication,recombination and repair based on the structure of recghelicase.philos trans r soc lond ser b biol sci 59,49–59.技术实现思路1、本发明的目的在于提供recg解旋酶抑制剂在抗铜绿假单胞菌方面的应用。2、为实现上述目的，本发明采用如下技术方案：2',5'-二氯-[1,1'-联苯]-2,5-二酮(tpi-1)和/或依布硒(ebselen)在制备recg解旋酶抑制剂中的应用，2',5'-二氯-[1,1'-联苯]-2,5-二酮、依布硒的结构式如下：3、4、recg解旋酶抑制剂在制备用于抑制病原菌的抗菌剂中的应用，所述recg解旋酶抑制剂为2',5'-二氯-[1,1'-联苯]-2,5-二酮、依布硒中的任意一种，所述病原菌为铜绿假单胞菌。5、一种用于抑制病原菌的抗菌剂，其含有recg解旋酶抑制剂；所述病原菌为铜绿假单胞菌；所述recg解旋酶抑制剂为2',5'-二氯-[1,1'-联苯]-2,5-二酮、依布硒中的任意一种。6、进一步的，上述抗菌剂可增强环丙沙星的抗菌效果。7、本发明的显著优点在于：8、在分子水平上，ebselen和tpi-1能抑制铜绿假单胞菌dna损伤修复过程的关键蛋白酶——recg解旋酶对重组修复中间体霍勒迪连接体hj的解旋活性；且ebselen及tpi-1均能明显增强铜绿假单胞菌对dna损伤剂(如环丙沙星抗生素等)诱变的敏感性，显示出显著的协同抑菌效果。当前第1页12当前第1页12
技术特征：1.2',5'-二氯-[1,1'-联苯]-2,5-二酮和/或依布硒在制备recg解旋酶抑制剂中的应用。
2.recg解旋酶抑制剂在制备用于抑制病原菌的抗菌剂中的应用。
3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于：所述recg解旋酶抑制剂为2',5'-二氯-[1,1'-联苯]-2,5-二酮、依布硒中的任意一种。
4.根据权利要求2所述的应用，其特征在于：所述病原菌为铜绿假单胞菌。
5.一种用于抑制病原菌的抗菌剂，其特征在于：含有recg解旋酶抑制剂。
6.根据权利要求5所述的抗菌剂，其特征在于：所述病原菌为铜绿假单胞菌。
7.根据权利要求5所述的抗菌剂，其特征在于：所述recg解旋酶抑制剂为2',5'-二氯-[1,1'-联苯]-2,5-二酮、依布硒中的任意一种。
8.根据权利要求5所述的抗菌剂，其特征在于：所述抗菌剂可增强环丙沙星的抗菌效果。
技术总结本发明属于医药领域，具体涉及RecG解旋酶抑制剂在抗铜绿假单胞菌方面的应用。所述RecG解旋酶抑制剂为依布硒（Ebselen）、2',5'‑二氯‑[1,1'‑联苯]‑2,5‑二酮（TPI‑1）中的任意一种。这两种化合物在分子水平上能抑制铜绿假单胞菌DNA损伤修复过程的关键蛋白酶——RecG解旋酶对重组修复中间体霍勒迪连接体（Holliday junction）的解旋活性；并且Ebselen及TPI‑1均能明显增强铜绿假单胞菌对DNA损伤剂诱变的敏感性，显示出显著的协同抑菌效果。
技术研发人员：林忠辉,李隆亨,戴琳
受保护的技术使用者：福州大学
技术研发日：技术公布日：2024/4/29
