一种冠状动脉粥样硬化诊断生物标志物ATG7及其应用

    专利2024-12-08  20


    本发明属于分子标志物,特别涉及一种冠状动脉粥样硬化诊断生物标志物atg7及其应用。


    背景技术:

    1、冠心病(coronary artery disease,cad)是全球范围内严重危害人类健康的常见慢性疾病之一,其以不可逆进展的冠状动脉粥样硬化(atherosclerosis,as)病变为特征性改变,多数患者在冠脉粥样硬化斑块不稳定进展基础上最终发生急性心肌梗死、心力衰竭等心血管不良事件。而冠脉as早期主要是功能细胞级联炎症反应,对血流动力学影响不显著,症状隐匿,不易察觉,且临床缺乏可靠有效的非侵入性早期诊断措施,导致as早期诊治收效甚微,仍是临床降低冠心病发病率与死亡率的难题所在。

    2、外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,pbmc)是循环免疫系统的重要组成部分,由单核细胞、淋巴细胞等组成,其转录组及细胞功能改变可以稳定反应出炎症性疾病进展,已经成为包括as在内的炎症性疾病诊断生物标志物的理想来源之一。

    3、目前关于pbmc来源的as生物标志物的研究仍较少,大部分pbmc转录组改变的临床意义仍然未被挖掘。探索as诊断生物标志物将有助于为冠心病的临床早期诊治、改善预后提供有效靶点与新思路。


    技术实现思路

    1、本发明的目的是提供一种冠状动脉粥样硬化的诊断生物标志物atg7,并提供其应用,该基因及其检测试剂可用作冠状动脉粥样硬化诊断生物标志物,可制备冠状动脉粥样硬化诊断试剂。

    2、为了实现上述目的,本发明采取以下技术方案:用于冠状动脉粥样硬化诊断的生物标志物atg7蛋白或其rna,所述atg7其rna的核苷酸序列如seq id no.1所示。

    3、检测atg7蛋白或其rna表达量的制剂在制备冠状动脉粥样硬化诊断试剂中的应用,所述atg7其rna的核苷酸序列如seq id no.1所示。

    4、进一步的,检测制剂通过检测被试者冠脉组织中atg7蛋白的表达,或pbmc中atg7其rna的表达,其rna表达水平较健康对照组相比显著上调,以此来判断被试者存在冠状动脉粥样硬化。

    5、一种冠状动脉粥样硬化的诊断试剂,包括检测atg7蛋白或其rna表达量的制剂,所述atg7其rna的核苷酸序列如seq id no.1所示。

    6、一种冠状动脉粥样硬化的诊断试剂盒,所述诊断试剂盒中包括权利要求4所述的诊断试剂。

    7、进一步的,诊断试剂包括正向及反向扩增引物,其中正向引物核苷酸序列如seqid no.2所示,反向引物核苷酸序列如seq id no.3所示。

    8、进一步的,诊断试剂包括atg7蛋白的抗体,所述atg7蛋白的抗体为重组抗atg7单克隆抗体。

    9、本发明在人冠状动脉粥样硬化组织中验证了atg7蛋白在as不同分期间的变化趋势,发现atg7蛋白表达改变与as进展有关,提示二者间存在关联;随后在冠心病组与健康对照组患者外周血来源pbmc中使用qpcr技术对atg7转录水平进行检测,证实其表达水平在冠心病组中显著升高,roc曲线分析提示其具有as诊断生物标志物价值。

    10、本发明提供了一种适用于冠状动脉粥样硬化分子鉴定的标准基因及分子鉴定方法,该基因能有效的区分健康人群及冠状动脉粥样硬化患病人群,有助于便捷、早期发现冠心病患者,降低冠心病死亡率,改善患者预后。外周血来源生物标志物检测具有创伤小、可重复性好等优点,临床更易实现与接受。



    技术特征:

    1.用于冠状动脉粥样硬化诊断的生物标志物atg7蛋白或其rna,其特征在于:所述atg7其rna的核苷酸序列如seq id no.1所示。

    2.检测atg7蛋白或其rna表达量的制剂在制备冠状动脉粥样硬化诊断试剂中的应用,其特征在于:所述atg7其rna的核苷酸序列如seq id no.1所示。

    3.根据权利要求2所述的应用,其特征在于:所述检测制剂通过检测被试者冠脉组织中atg7蛋白的表达,或pbmc中atg7其rna的表达,其rna表达水平较健康对照组相比显著上调,以此来判断被试者存在冠状动脉粥样硬化。

    4.一种冠状动脉粥样硬化的诊断试剂,其特征在于:包括检测atg7蛋白或其rna表达量的制剂,所述atg7其rna的核苷酸序列如seq id no.1所示。

    5.一种冠状动脉粥样硬化的诊断试剂盒,其特征在于:所述诊断试剂盒中包括权利要求4所述的诊断试剂。

    6.根据权利要求5所述的诊断试剂盒,其特征在于:所述诊断试剂包括正向及反向扩增引物,其中正向引物核苷酸序列如seq id no.2所示,反向引物核苷酸序列如seq id no.3所示。

    7.根据权利要求5所述的诊断试剂盒,其特征在于:所述诊断试剂包括atg7蛋白的抗体,所述atg7蛋白的抗体为重组抗atg7单克隆抗体。


    技术总结
    本发明公开了一种冠状动脉粥样硬化诊断生物标志物ATG7及其应用。ATG7其RNA的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明通过检测人冠状动脉粥样硬化组织中ATG7蛋白表达改变趋势与PBMC临床标本中ATG7表达差异,确定ATG7用于冠状动脉粥样硬化诊断生物标志物。本发明提出了一种作为早期冠状动脉粥样硬化的诊断生物标志物ATG7,用于冠状动脉粥样硬化性心脏病生物学鉴定及临床应用,并为诊疗动脉粥样硬化提供了新的分子标记和干预靶点。

    技术研发人员:贾恩志,王彦君,迟博予,符亚红,何书,周晗笑,李城城,贾侨伟,任梦梦,别恒杰,张鑫
    受保护的技术使用者:江苏省人民医院(南京医科大学第一附属医院)
    技术研发日:
    技术公布日:2024/4/29
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