本发明涉及农业
技术领域：
，具体涉及一种鉴定花生苗期耐盐性的方法。
背景技术：
：花生是我国重要的油料作物和经济作物，在国民经济中占据重要的地位。增加花生种植面积，有利于保障国家油脂安全，缓解我国食用油短缺的问题，提高我国食用油的自给率。目前中国盐渍化土地约占全国耕地的10%左右，由于不合理的轮作，盲目使用化肥等原因，使盐碱土地的面积呈逐年不可逆增加的趋势，预计到2050年，可用耕地的50%将面临盐渍化。土壤盐渍化已经成为限制农业生产的主要因素之一，危害作物的生长发育，造成作物的大量减产，严重制约了农业的可持续发展，因此如何解决土壤盐渍化对农业的危害已成为世界性的难题。花生是中度耐盐类作物，不同生育时期的耐盐能力存在差异，其中芽期和幼苗期对盐害最敏感，在苗期更易受到盐胁迫的危害，大大影响花生的生长发育，造成减产。迄今为止，全国有80%左右的盐渍土地尚未得到开发利用，增加花生种植面积具有重大潜力，因此，选育和鉴定耐盐花生品种是解决盐碱地花生种植的首要问题，其中花生苗期耐盐性鉴定适宜浓度的筛选、耐盐鉴定指标鉴定与评价方法是这个环节中先行解决的首要技术问题。关于花生耐盐性的研究已有不少报道，苗华荣等认为ril群体芽期耐盐性的鉴定适宜nacl浓度是120mmol/l；胡晓辉等利用盆栽法鉴定花生品种耐盐性的适宜nacl浓度是120mmol/l；杨圆圆利用沙水培鉴定花生品种苗期耐盐性的适宜nacl浓度是172mmol/l，认为主茎高、侧枝长能作为主要耐盐鉴定指标；慈敦伟等研究结果表明地上部形态和生物量可作为花生耐盐评价首选测定指标，沈一等认为主根长和苗高可作为花生品种幼苗期耐盐评价指标。这些研究集中于花生种质资源的耐盐性筛选，但评价指标较少，试验设置的nacl胁迫范围较小，研究者采用的培养方式各不相同，关于花生苗期耐盐鉴定机制仍缺乏系统深入的研究。本研究以耐盐性差异较大的花生品种白沙1016、丰花2号、山花18号和icgv86699为材料，利用水培法进行花生苗期耐盐性鉴定，拟研究确定花生苗期耐盐鉴定的适宜nacl浓度，并筛选出苗期耐盐鉴定的适宜评价性状，提供一种鉴定花生苗期耐盐性的方法，以期为花生苗期耐盐性材料的筛选与评价提供参考。技术实现要素：为解决以上技术上的不足，本发明提供了一种鉴定花生苗期耐盐性的方法。本发明是通过以下技术方案实现的：本发明提供的一种鉴定花生苗期耐盐性的方法，包括以下步骤：(1)选取颗粒饱满、未受损伤的花生种子，用1%h2o2侵泡12h后，去离子水冲洗3次，放入含有湿润脱脂棉的发芽盒中，附上一层保鲜膜，在黑暗，25℃恒温条件下培养5d，子叶完全展开；(2)选取子叶展开较好的材料移入装有hogland营养液的水培盒中，在每个水培盒中种满12株，培养8天；(3)进行盐胁迫处理，200mmol/lnacl溶液培养7天，生长条件为25℃恒温，光照强度11.4klux，每天光照时间16h；(4)观察植株萎焉等级，测定耐盐系数、耐盐指数、植株性状，综合评价品种耐盐性。优选的，步骤（4）中所述植株性状包括主茎高、茎叶鲜重、茎叶干重、根长、根鲜重、根干重、根表面积和根体积。更优选的，步骤（4）中所述植株性状包括茎叶干重、根长、茎叶鲜重。步骤（4）中所述综合评价品种耐盐性可以是指利用相对茎叶干重、相对根长、相对茎叶鲜重指标评价品种耐盐性。优选的，所述相对茎叶干重为0.62~0.81、相对根长0.69~0.76、相对茎叶鲜重指标0.33~0.42。优选的，步骤（4）中所述耐盐系数为0.64~0.77。优选的，步骤（4）中所述耐盐指数为0.60~0.89。更优选的，所述相对茎叶干重为0.62~0.81、相对根长0.69~0.76、相对茎叶鲜重指标0.33~0.42；所述耐盐系数为0.64~0.77；所述耐盐指数为0.60~0.89。本发明所提供的方法适用于鉴定白沙1016、丰花2号、山花18号、icgv86699或其杂交群体分离的品系。本发明的有益效果是：一、本发明提供的鉴定方法简单易行，大多数实验室具备水培的实验设备和光照箱等设备，可以在实验室内进行。二、本方法稳定可靠，和大田实验相比，实验条件可控，实验标准清晰，实验结果可靠，不会因为实验条件不一致而发生结果不可靠。附图说明图1是花生子叶完全展开图。图2是水培法培养8天时的花生植株。图3是nacl盐处理7天后植株的表型特征，其中a、b、c、d分别表示0、100、200和300mmol/lnacl处理下的幼苗特征。图4是花生幼苗叶片萎焉程度评价分级示意图。图5是100mmol/lnacl处理下花生萎焉等级的变化图。图6是200mmol/lnacl处理下花生萎焉等级的变化图。图7是300mmol/lnacl处理下花生萎焉等级的变化图。图8是盐处理下对花生苗期株高的影响。图9是盐处理下对花生苗期根长的影响。图10是盐处理下对花生苗期茎叶鲜重的影响。图11是盐处理下对花生苗期茎叶干重的影响。图12是盐处理下对花生苗期根鲜重的影响。图13是盐处理下对花生苗期根干重的影响。图14是盐处理后亲本及20个家系相对性状的聚类分析。具体实施方式实施例1鉴定花生苗期耐盐性的方法的建立1材料与方法1.1试验材料试验品种为山花18号、丰花2号、白沙1016和icgv86699。1.2试验方法1.2.1材料培养条件材料培养在作物生物学国家重点实验室的植物生长室进行。生长室条件为25℃恒温，光照强度11.4klux，每天光照时间16h。1.2.2试验设计每个品种选取颗粒饱满，未受损伤的种子，用1%h2o2侵泡12h后，去离子水冲洗3次，放入含有湿润脱脂棉的发芽盒中，附上一层保鲜膜，在黑暗，25℃恒温条件下培养5d，子叶完全展开（图1）。选取子叶展开较好的材料移入装有hogland营养液的水培盒中，在每个水培盒中种满12株，培养8天（图2），生长条件为25℃恒温，光照强度11.4klux，每天光照时间16h，进行盐胁迫处理。试验分两批进行。第一批试验确定鉴定花生苗期耐盐性的方法适宜nacl浓度和耐盐性状测定的适宜时间。试验以hogland营养液为对照，设置100mmol/l、200mmol/l、300mmol/l的3种nacl浓度。每个处理3个重复，每个重复12株。为确保nacl浓度的相对恒定，每2天进行补水，采用称重法补水，4天更换一次营养液，对照组也进行相同处理，盐胁迫处理12天，处理当天开始，每天上午9点观察植株萎焉程度，确定进行耐盐性状测定适宜时间、耐盐鉴定适宜nacl浓度。第一批试验确定鉴定花生苗期耐盐性的方法中适宜的耐盐性状及参数。第二批试验采用相同的试验设置，盐处理7天后（图3），用去离子水冲洗植株，测植株主茎高、茎叶鲜重、茎叶干重、主根长、根鲜重、根干重、根表面积、根体积。1.2.3性状测定方法主茎高：花生从子叶节至茎端生长点的距离。主根长：主根着生位置至主根末端的距离。茎叶鲜重、根鲜重：将花生幼苗分成茎叶部、胚轴、根三部分，取茎叶部、根部称量鲜重。茎叶干重：称完鲜重后，将样品分别放入对应信封，先于105℃下杀青30min，再于80℃下烘干至恒重，称重。根干重：扫描完根系后，将样品分别放入对应信封，先于105℃下杀青30min，再于80℃下烘干至恒重，称重。根表面积、根体积：每个重复随机选取3个植株根系，将根系放水中，使根系均匀铺开，侧根不重叠，利用万方根系扫描仪扫描获取图片，la-s根系分析系统处理获得数据。1.3数据分析性状相对值=该指标盐胁迫下数值/对照条件下数值生物量=茎叶干重 根干重耐盐系数=盐胁迫下生物量/对照生物量耐盐指数=(盐胁迫下生物量/对照生物量)×(盐胁迫下生物量/所有品种盐胁迫下平均生物量)采用spss软件对数据进行统计分析，pearson法进行相关性分析，运用excel2003进行数据的整理和作图。2.结果与分析2.1花生幼苗萎焉程度评价分级标准根据pantalone、lee、aladdin等大豆叶片盐害等级建立了花生幼苗萎焉程度评价分级系统（图4），分级标准如下：1级幼苗生长正常，没有盐害症状；2级幼苗的生长轻微受到盐抑制，仅叶尖失绿；3级幼苗叶片30%失绿；4级幼苗叶片50%失绿；5级幼苗叶片大部分失绿；6级幼苗叶片完全失绿；7级幼苗叶片完全枯黄；8级幼苗叶片完全枯黄卷曲；9级幼苗叶片完全干枯。2.2花生苗期耐盐鉴定适宜nacl浓度的筛选100mmol/lnacl溶液处理花生幼苗12天，观察植株萎焉程度的变化，4个品种萎焉等级随着盐处理时间的延长缓慢增大（图5）。在盐处理第12天时，icgv86699、白沙1016和丰花2号的萎焉程度达到3级，山花18号达到2级。4个品种间萎焉等级差别较小。因此，100mmol/lnacl培养液不能有效鉴定品种的耐盐性。200mmol/lnacl溶液处理花生幼苗12天，4个品种植株萎焉程度随着盐处理时间的延长逐渐增大（图6）。在200mmol/lnacl溶液处理7天之前，4个品种萎焉等级具有一定的差异；盐处理7天时，4个品种萎焉等级差异最明显，其中icgv86699达到7级，丰花2号达到6级，白沙1016达到4级，山花18号达到2级；盐处理7天之后，品种之间萎焉等级也具有明显的差异，但是4个品种萎焉等级迅速增大，尤其是不耐盐品种icgv86699植株接近枯死，无法进行植株性状测定。因此，200mmol/lnacl培养液适于进行花生苗期耐盐鉴定，植株性状测定的适宜盐处理7天后进行。300mmol/lnacl溶液处理花生幼苗12天，4个品种萎焉等级随着盐处理时间的延长迅速地增大，品种之间萎焉级别差异较小(图7)。盐处理7天时，丰花2号萎焉达到9级，icgv86699达到8级，白沙1016与山花18号达到7级；盐处理9天时，4个花生品种都达到死亡状态。因此，300mmol/lnacl培养液不能有效鉴定品种的耐盐性。2.3盐胁迫条件下不同花生品种植株性状的差异2.3.1100mmol/lnacl胁迫下植株性状的差异100mmol/lnacl溶液培养处理7d，丰花2号、白沙1016、山花18号、icgv86699耐盐系数分别是1.01、0.85、0.82、0.62，icgv86699耐盐系数最小，与其他3个品种之间存在显著差异，丰花2号、白沙1016、山花18号这3个品种之间差异不显著。4个品种的耐盐指数与耐盐系数变化趋势相一致，icgv86699耐盐指数最小，与其他3个品种之间存在显著差异(表1)。100mmol/lnacl胁迫对丰花2号、白沙1016和山花18号的相对茎叶干重、相对茎叶鲜重影响较小，对icgv86699影响较大，icgv86699与丰花2号之间差异显著，而白沙1016与山花18号差异不显著；4个品种之间相对主茎高没有显著差异（表1）。100mmol/lnacl胁迫对幼苗根部生长的影响小于对茎叶生长的影响（表1）。相对根长、相对根干重、相对根体积下降幅度分别为0.14~0.29、0.07~0.16、0.06~0.18；4个品种的相对根长差异显著，白沙1016最大，icgv86699最小；丰花2号相对根干重最大，与白沙1016、icgv86699差异不显著；山花18号、丰花2号相对根体积较大，显著大于icgv86699。4个品种间相对根鲜重、相对根表面积差异不显著（表1）。表1100mmol/lnacl胁迫下不同花生品种植株性状的差异注：同列数值后不同小写字母表示品种间差异显著（p<0.05），下同。2.3.2200mmol/lnacl胁迫下胁迫下植株性状的差异200mmol/lnacl溶液培养幼苗7d，测定植株性状（表2）。白沙1016、丰花2号、山花18号、icgv86699耐盐系数分别是0.77、0.72、0.64、0.53，丰花2号、山花18号、icgv86699这3个品种之间存在显著差异，白沙1016耐盐系数与丰花2号、山花18号之间差异不显著。白沙1016、丰花2号和山花18号3个品种耐盐指数较高，耐盐指数分别是0.89、0.85、0.6，icgv86699耐盐指数最低，为0.39，白沙1016、丰花2号、icgv86699之间差异显著，丰花2号、山花18号之间差异不显著。相对主茎高与相对茎叶干重变化趋势相一致，丰花2号、山花18号、icgv86699之间差异显著，白沙1016与丰花2号差异不显著；相对茎叶鲜重最大值为0.42，最小值为0.23，白沙1016、丰花2号、山花18号之间差异不显著。相对根长最小值是0.66，白沙1016与山花18号、白沙1016与icgv86699、丰花2号与icgv86699之间差异显著；山花18号的相对根干重最大，山花18号与其他三个品种之间差异显著，而白沙1016、丰花2号、icgv86699之间差异不显著；相对根体积最大值0.77，最小值0.57，白沙1016、山花18号、icgv86699之间差异显著；除此之外，4个品种之间相对根鲜重、相对根表面积差异不显著。表2200mmol/lnacl胁迫下不同花生品种植株性状的差异2.3.3300mmol/lnacl胁迫下植株性状的差异300mmol/lnacl溶液培养幼苗7d，测定植株性状（表3）。丰花2号、白沙1016、山花18号、icgv86699耐盐系数分别是0.72、0.57、0.50、0.45，白沙1016、丰花2号和山花18号这3个品种之间存在显著差异，icgv86699与山花18号之间差异不显著。丰花2号、白沙1016、山花18号、icgv86699耐盐指数分别是0.83、0.66、0.44、0.34，丰花2号耐盐指数最大，与白沙1016、icgv86699之间差异显著，icgv86699与山花18号之间差异不显著。100mmol/l、200mmol/l、300mmol/lnacl胁迫下相对茎叶鲜重下降幅度分别为0.17~0.53、0.58~0.77、0.80~0.82（表1、表2、表3），说明随着nacl浓度增加，对幼苗茎叶鲜重影响逐渐增大，4个品种在300mmol/lnacl胁迫下，相对茎叶鲜重差异不显著；相对茎叶干重最大值是0.74，最小值是0.47，丰花2号、山花18号、icgv86699之间差异显著，白沙1016与山花18号之间差异不显著。丰花2号、山花18号和icgv86699这3个品种之间相对根长差异显著，白沙1016与丰花2号之间差异不显著；相对根鲜重与相对根干重变化趋势一致，icgv86699最大，山花18号值最小，山花18号和丰花2号、icgv86699这3个品种之间差异显著，白沙1016与丰花2号之间差异不显著；4个品种之间相对根表面积差异不显著。表3300mmol/lnacl胁迫下不同花生品种植株性状的差异2.4盐胁迫下植株性状相对值与耐盐指数相关性2.4.1100mmol/lnacl胁迫下性状相对值与耐盐指数相关性从表4看出，在100mmol/lnacl胁迫下，耐盐系数、相对茎叶鲜重、相对茎叶干重、相对主茎高与耐盐指数呈极显著正相关，相关系数分别为0.98、0.96、0.87、0.69。相对根长与耐盐指数呈显著正相关，相关系数为0.61。相对茎叶鲜重、相对茎叶干重、相对主茎高与耐盐系数呈极显著正相关，相关系数分别为0.95、0.82、0.75。相对茎叶鲜重与主茎高极显著相关、与相对根长、相对根体积显著相关。表4100mmol/lnacl胁迫下性状相对值与耐盐指数相关性注：*和**分别表示相关系数r在0.05和0.01水平相关显著。2.4.2200mmol/lnacl胁迫下性状相对值与耐盐指数相关性在200mmol/lnacl胁迫下，耐盐系数、相对茎叶干重、相对根长与耐盐指数呈极显著正相关，相关系数分别为0.95、0.95、0.90，相对茎叶鲜重与耐盐指数呈显著正相关，相关系数为0.51；相对茎叶干重、相对根长、相对茎叶鲜重与耐盐系数呈极显著正相关，相关系数分别为0.94、0.84、0.63（表5）。相对根长与相对茎叶干重呈极显著正相关，相对茎叶鲜重与相对根鲜重呈极显著负相关，与相对茎叶干重呈显著正相关；相对根表面积与相对根体积呈显著正相关（表5）。表5200mmol/lnacl胁迫下性状相对值与耐盐指数相关性注：*和**分别表示相关系数r在0.05和0.01水平相关显著。2.4.3300mmol/lnacl胁迫下性状相对值与耐盐指数相关性在300mmol/lnacl胁迫下，耐盐系数、相对茎叶干重、相对主茎高与耐盐指数呈极显著正相关，相关系数分别为0.97、0.88、0.80，相对根长与耐盐指数呈正显著相关，相关系数为0.64；相对茎叶干重、相对主茎高与耐盐系数呈极显著正相关，相关系数分别为0.91、0.73，相对根长与耐盐系数呈显著正相关，相关系数为0.60；相对主茎高与相对根长呈显著正相关；相对根鲜重与相对根干重呈极显著正相关，相关系数为0.96（表6）。表6300mmol/lnacl胁迫下性状相对值与耐盐指数相关性注：*和**分别表示相关系数r在0.05和0.01水平相关显著。3适宜耐盐性状分析和结论从植株萎焉等级划分品种的耐盐性可以看出，山花18号耐盐性最高，其次是白沙1016、丰花2号，icgv86699的耐盐性最差。4个品种耐盐系数从高到低依次为丰花2号、白沙1016、山花18号、icgv86699，耐盐指数从高到低依次为白沙1016、丰花2号、山花18号、icgv86699。说明不耐盐品种icgv86699的表现一致，耐盐品种响应盐胁迫机理存在差异。花生不同生育时期的耐盐能力不同，芽期和幼苗期对盐害最敏感，生产上苗期更易受到盐胁迫的危害，大大影响花生的生长发育，造成减产，提高花生苗期的耐盐特性有利于花生后期的生长发育，因此，建立花生苗期耐盐性鉴定的方法对花生耐盐品种筛选和新品种选育具有重要意义。苗华荣等认为ril群体芽期耐盐性的鉴定适宜nacl浓度是120mmol/l；胡晓辉等利用盆栽法鉴定花生品种耐盐性的适宜nacl浓度是120mmol/l；杨圆圆利用沙水培鉴定花生品种苗期耐盐性的适宜nacl浓度是172mmol/l，本研究水培法鉴定花生苗期耐盐适宜浓度是200mmol/lnacl，高于前人报导的盐浓度。原因可能是研究者采用的培养方式各不相同，选取的试验材料本身耐盐性存在差异。本研究发现，在盐处理7天时，适于进行苗期耐盐性状测定。随着盐浓度升高，不同花生品种的相对根长、相对主茎高、相对茎叶鲜重、相对茎叶干重、相对根鲜重、相对根干重、相对根表面积、相对根体积均呈现下降的趋势，比较三个不同盐处理下植株根系和茎叶的下降幅度，发现在不同浓度nacl处理下，植株相对茎叶鲜重下降幅度是相对根鲜重的4倍，相对茎叶干重下降幅度是相对根干重的3倍，茎叶部受盐胁迫影响大。前人研究表明，不同浓度nacl胁迫条件下，幼苗地上部鲜重、根鲜重、地上部干重、主根干重4个指标都有不同程度降低，主根长和苗高比鲜重、干重等指标更敏感，盐胁迫对植物的生长发育影响总体表现为抑制作用，首先表现为植株生长减缓，根系的伸长受抑制，鲜重的增长及干物质积累、侧根的减少。杨圆圆认为主茎高、侧枝长能作为主要耐盐鉴定指标；慈敦伟等研究结果表明地上部形态和生物量可作为花生耐盐评价首选测定指标，沈一等认为主根长和苗高可作为花生品种幼苗期耐盐评价指标。本研究发现，在3个盐浓度下，耐盐系数与耐盐指数均呈极显著正相关的关系，相对根长与耐盐指数均呈现显著正相关的关系，相对茎叶干重与耐盐指数均呈极显著正相关的关系，所以耐盐系数、相对茎叶干重、相对根长可以作为花生苗期耐盐鉴定的适宜评价性状。在100mmol/l、200mmol/lnacl胁迫下，相对茎叶鲜重与耐盐指数均呈现显著正相关的关系，在100mmol/l、300mmol/lnacl胁迫下相对主茎高与耐盐指数均呈现显著正相关的关系，所以相对茎叶鲜重、相对根鲜重、相对主茎高可作为花生苗期耐盐鉴定的参考性状，本研究结果增加了耐盐系数作为花生苗期耐盐鉴定的适宜评价性状，为花生苗期耐盐性材料的筛选与评价提供借鉴。本研究建立了水培法鉴定花生苗期耐盐性的技术体系。技术要点是：萌发5d的花生种子移栽至水培盒，hogland营养液培养8d，200mmol/lnacl溶液培养7d，观察植株萎焉等级，测定耐盐系数、耐盐指数、植株性状，综合评价品种耐盐性。材料的生长条件为25℃恒温，光照强度11.4klux，每天光照时间16h。实施例2鉴定花生苗期耐盐性的方法的验证1材料与方法1.1试验材料白沙1016×icgv86699，杂交后代连续自交后获得的f8代ril群体，随机选取20个家系进行耐盐鉴定试验。1.2试验方法设置1个对照和1个nacl处理浓度200mmol/l。实验方法同实施例1。2结果与分析2.1ril群体各性状在不同处理条件下的表现由表7可以看出，在正常培养条件下，ril群体20个家系株高的变化范围在5.34cm～11.99cm之间；茎叶鲜重变化范围在15.03g～53.06g之间；茎叶干重变化范围在2.42g～7.01g之间；根长的变化范围在14.16cm～33.00cm之间；根鲜重的变化范围在13.02g～22.30g之间；根干重的变化范围在0.86g～1.93g之间。说明家系间基础生长量差异明显。在200mmol/lnacl处理条件下，ril群体20个家系株高的变化范围在3.82cm～8.01cm之间；茎叶鲜重变化范围在4.27g～14.10g之间；茎叶干重变化范围在1.99g～4.68g之间；根长的变化范围在10.69cm～23.84cm之间；根鲜重的变化范围在6.71g～16.30g之间；根干重的变化范围在0.36g～1.15g之间。说明20家系间对盐胁迫的耐受力存在明显差异。表7不同处理下ril群体20个家系各性状的变化3.2盐胁迫对花生苗期生长的影响盐处理下幼苗各性状相对值见表8。家系间存在显著差异，茎叶鲜重家系间差异最大，从高到低依次是根鲜重相对值、根干重相对值、茎叶干重相对值、株高相对值和根长相对值。表820个家系花生苗期各个性状的相对值由图8和图9可以看出，盐处理下对花生苗期株高的影响高于对根长的影响。盐处理后对苗期根长的影响较小，但处理后总体根长下降，lf105根长下降最大，lf101下降的最少。在图8中可以明显看出，株高下降趋势较大，其中lf111下降最大，lf110降低的最少。由图10和图11可以看出，nacl处理后茎叶鲜重和茎叶干重都有所下降，其中，茎叶鲜重下降趋势非常明显。在茎叶鲜重方面，每个家系降低程度都很高，其中lf102，lf117，lf120等家系下降幅度大，lf106，lf110下降幅度较小。在茎叶干重方面，总体下降幅度低，其中20个家系里lf120降幅最大，lf106降幅最少。图12和图13可以看出，nacl处理后对花生苗期根的鲜重和干重都有一定的影响，总体都呈现下降趋势，但降幅相对来说较低。在根鲜重方面，20个家系中lf120，lf110，lf103等降幅较高，而lf114，lf106，lf105等降幅较低。在根干重方面，20个家系中，lf109降低幅度最大，而lf114降低幅度最小。由以上六个图可以看出，nacl胁迫处理后，幼苗的株高，根长，茎叶鲜重，茎叶干重，根鲜重，根干重都有不同程度的降低。其中茎叶鲜重降幅非常明显，说明盐胁迫对茎叶鲜重影响较大，植株含水量下降幅度大。3.3ril群体20个家系耐盐性的聚类分析本次研究在200mmol/lnacl胁迫处理下检测了20个家系花生品种根长、株高、茎叶鲜重、根鲜重等6个性状。以这6个性状作为耐盐指标对20个家系进行聚类分析结果见图14。结果表明，20个家系可以归位3类，耐盐品系，中等耐盐品系，不耐盐品系。其中，lf100，lf101，lf102，lf103，lf111，lf112，lf113，lf114为耐盐品系，各性状受抑制程度轻，其性状相对值总体处于较高水平。lf104，lf107，lf108，lf109，lf110，lf116，lf118，lf119，lf120各性状受到明显抑制，属于不耐盐品系，其性状相对值处于较低水平。其中，lf116相对株高数值最低，株高生长受到抑制，耐盐性差。lf116相对茎叶鲜重值低，受抑制程度最大，耐盐性差。lf120相对茎叶鲜重和相对茎叶干重都处于最低值水平，这两个性状受抑制程度大，耐盐性差。lf107相对根干重值最低，受抑制程度大，耐盐性差。其中lf105，lf106，lf115为中等耐盐品系，各性状受到中等抑制，其各性状相对值处于中间水平。由此筛选出8个耐盐的家系，9个不耐盐的家系，3个中等耐盐的家系。3.4ril群体20个家系耐盐系数的比较耐盐系数越高，耐盐性越强。由表9可以看出，lf101，lf106，lf113，lf114，lf115耐盐系数高于亲本，说明耐盐性强。而lf107，lf110，lf116，lf118等家系耐盐系数低于亲本，耐盐性差，其中lf116，lf119，lf120耐盐系数明显低于亲本。表9亲本及20个家系的耐盐系数品种及家系处理条件下植株总干重/g正常条件下植株总干重/g耐盐系数白沙10163.865.780.67icgv866992.244.110.55lf1053.524.40.80lf1143.614.580.79lf1062.643.360.78lf1134.125.520.75lf1153.114.20.74lf1013.244.460.73lf1044.466.480.69lf1002.894.460.65lf1025.668.670.65lf1083.265.040.65lf1183.094.770.65lf1034.026.320.64lf1095.128.060.64lf1123.695.90.63lf1113.255.230.62lf1173.756.170.61lf1103.045.130.59lf1073.436.410.54lf1162.435.040.48lf1192.465.080.48lf1202.916.450.45本次研究随机选取20个家系，进行耐盐品种的筛选，证明实施例1建立的鉴定方法可行可靠，相对茎叶鲜重、相对根鲜重、相对主茎高、耐盐系数可作为花生苗期耐盐鉴定的参考性状。以上所述仅是本专利的优选实施方式，应当指出，对于本
技术领域：
的普通技术人员来说，在不脱离本专利技术原理的前提下，还可以做出若干改进和替换，这些改进和替换也应视为本专利的保护范围。当前第1页1 2 3
技术特征：1.一种鉴定花生苗期耐盐性的方法，包括以下步骤：
（1）选取颗粒饱满、未受损伤的花生种子，用1%h2o2侵泡12h后，去离子水冲洗3次，放入含有湿润脱脂棉的发芽盒中，附上一层保鲜膜，在黑暗，25℃恒温条件下培养5d，子叶完全展开；
（2）选取子叶展开较好的材料移入装有hogland营养液的水培盒中，在每个水培盒中种满12株，培养8天；
（3）进行盐胁迫处理，200mmol/lnacl溶液培养7天，生长条件为25℃恒温，光照强度11.4klux，每天光照时间16h；
（4）观察植株萎焉等级，测定耐盐系数、耐盐指数、植株性状，综合评价品种耐盐性。
2.根据权利要求1所述的一种鉴定花生苗期耐盐性的方法，其特征在于：步骤（4）中所述植株性状包括主茎高、茎叶鲜重、茎叶干重、根长、根鲜重、根干重、根表面积和根体积。
3.根据权利要求1所述的一种鉴定花生苗期耐盐性的方法，其特征在于：步骤（4）中所述植株性状包括茎叶干重、根长、茎叶鲜重。
4.根据权利要求3所述的一种鉴定花生苗期耐盐性的方法，其特征在于：步骤（4）中所述综合评价品种耐盐性是指利用相对茎叶干重、相对根长、相对茎叶鲜重指标评价品种耐盐性。
5.根据权利要求4所述的一种鉴定花生苗期耐盐性的方法，其特征在于：所述相对茎叶干重为0.62~0.81、相对根长0.69~0.76、相对茎叶鲜重指标0.33~0.42。
6.根据权利要求1所述的一种鉴定花生苗期耐盐性的方法，其特征在于：步骤（4）中所述耐盐系数为0.64~0.77。
7.根据权利要求1所述的一种鉴定花生苗期耐盐性的方法，其特征在于：步骤（4）中所述耐盐指数为0.60~0.89。
8.根据权利要求5~7中任一项所述的一种鉴定花生苗期耐盐性的方法，其特征在于：所述相对茎叶干重为0.62~0.81、相对根长0.69~0.76、相对茎叶鲜重指标0.33~0.42；所述耐盐系数为0.64~0.77；所述耐盐指数为0.60~0.89。
9.根据权利要求8所述的一种鉴定花生苗期耐盐性的方法，其特征在于：所述方法适用于鉴定白沙1016、丰花2号、山花18号、icgv86699或其杂交群体分离的品系。
技术总结本专利提供了一种鉴定花生苗期耐盐性的方法，包括以下步骤：选取颗粒饱满、未受损伤的花生种子，用1% H2O2侵泡12 h后，去离子水冲洗3次，放入含有湿润脱脂棉的发芽盒中，附上一层保鲜膜，在黑暗，25℃恒温条件下培养5d，子叶完全展开；选取子叶展开较好的材料移入装有Hogland营养液的水培盒中，在每个水培盒中种满12株，培养8天；进行盐胁迫处理，200mMol/L NaCl溶液培养7天，生长条件为25℃恒温，光照强度11.4KLuX，每天光照时间16h；观察植株萎焉等级，测定耐盐系数、耐盐指数、植株性状，综合评价品种耐盐性。本方法简便易行，鉴定结果准确。
技术研发人员：刘风珍;万勇善;陈杨;骆璐;郭瑞杰;张昆;张秀荣
受保护的技术使用者：山东农业大学
技术研发日：2019.09.10
技术公布日：2021.03.12
