本发明公开涉及食品加工技术领域，尤其涉及一种猴头菇多糖冻干粉、猴头菇多糖含片及制备方法。
背景技术：
多糖是由多个单糖聚合而成的一类天然高分子物质，普遍存在于植物、微生物细胞壁和动物细胞膜当中。近年来，多种含有多糖类活性成分的中药都被发现具有提高机体免疫能力的功效，而且最大的优点是毒副作用低，在临床和保健方面起到了重要的作用。经试验表明，猴头菇多糖具有抗肿瘤活性，可调节免疫功能，同时具有抗疲劳、降血糖、降血脂等功效。猴头菇多糖作为天然化合物，在食品、药品和保健品研发中具有良好的发展前景。
挤压膨化技术是通过水分、热量、机械剪切、压力等综合作用，使物料在内部机构和性质上发生变化的过程。目前对于猴头菇多糖提取方法研究广泛，如热水浸提、酶解法提取、超声辅助提取、微波辅助提取等。发明专利cn110922494a公开了一种猴头菇多糖提取分离方法，该发明采用纯物理法提取多糖，使葡聚糖链不被破坏，保留了猴头菇的结构完整性，但此方法提取成本高，操作要求高，且高压环境具有一定危险性，不适合工业化生产。发明专利cn106820141a公开了一种地黄花多糖口含片及其制备方法，该发明采用传统水提醇沉法提取多糖，但并不能达到理想破壁效果，并且以地黄花多糖为原料制备了含片，使含片酸甜可口，富有地黄花特色风味，但其配方甜味剂的选择对可食用人群的范围有一定限制，不能确保适合各类人群食用，而对于猴头菇多糖在保健品领域的应用大多以胶囊形式，含片形式未见报道。
技术实现要素：
鉴于此，本发明公开提供了一种猴头菇多糖冻干粉、猴头菇多糖含片及制备方法，将挤压膨化技术与酶解法高效结合，大幅度提高多糖得率；
本发明提供的技术方案，具体为，一种猴头菇多糖冻干粉，所述猴头菇多糖冻干粉由如下步骤制备而成：
(1)预处理：将猴头菇进行挑选、清洗；
(2)提取：采用挤压膨化联合酶解法提取猴头菇多糖；
(3)浓缩：抽滤取上清液，旋蒸进行浓缩；
(4)沉淀：醇沉法收集沉淀，得到猴头菇多糖；
(5)制备：沉淀经真空冷冻干燥后，获得猴头菇多糖冻干粉。
进一步优选，步骤(2)所述挤压膨化联合酶解法具体为：将清洗后的猴头菇烘干，粉碎，并用双螺杆挤压机进行挤压，其中，双螺杆挤压机的设定参数为：喂料速度10kg/h、螺杆转速400r/min、水分含量16％、挤压温度120℃，挤压膨化后粉碎过80目筛，得到猴头菇粉末，备用；
取50g猴头菇粉末与纤维素酶混合，其中按照质量百分比计，纤维素酶添加量为2％；
按照料液比为1：20g/ml加入蒸馏水，将混合液的ph调至5，再依次进行酶解、灭活。
进一步优选，所述步骤(3)进行旋蒸温度为60℃，转速为40r/min，旋蒸浓缩到原溶液体积的1/4即可。
进一步优选，所述步骤(4)中醇沉法具体为：加入浓缩后溶液体积的4倍量的无水乙醇进行沉淀，再离心，离心条件为：温度－4℃，转速4000r/min，时间20min，离心后倒掉上清液，得到猴头菇多糖沉淀。
进一步优选，所述步骤(5)中将猴头菇多糖真空冷冻干燥的温度为-40℃，真空度为1pa，冷冻干燥时间12h。
一种猴头菇多糖含片，按照重量份数计，包括以下组分：
猴头菇多糖冻干粉50-80份、微晶纤维素15-20份、淀粉10-20份、麦芽糊精15-25份、苹果酸5-25份、新橙皮苷二氢查尔酮10-15份、硬脂酸镁1-2份。
一种猴头菇多糖含片的制备方法，包括如下步骤：
(1)过筛：将新橙皮苷二氢查尔酮、微晶纤维素、淀粉、麦芽糊精、苹果酸分别过筛；
(2)混料：按照重量百分比计，将猴头菇多糖冻干粉与新橙皮苷二氢查尔酮、微晶纤维素、淀粉、麦芽糊精、苹果酸按比例混匀，加入粘合剂，制成混料；
(3)造粒：将上述混料过筛造粒、整粒，置于恒温干燥箱中干燥备用；
(4)压片：将整粒置于压片机模具内压片，得到猴头菇多糖含片。
进一步优选，步骤(2)中所述粘合剂为低取代羟丙基甲基纤维素、浓度百分比为25％的液状葡萄糖、浓度百分比为4％的羧甲基纤维素钠中的一种或多种混合物。
进一步优选，所述步骤(3)将混料过20目筛进行湿法造粒，置于恒温干燥箱中50℃干燥至混料的含水量低于3％，过18目筛再进行整粒，选用大小均匀的颗粒进行压片。
进一步优选，所述步骤(4)中压片机模具采用直径为5mm进行压片，压片前涂1-2克硬脂酸镁置于模具作为脱模剂。
本发明提供的一种猴头菇多糖含片及其制备方法，制备出的含片具有提高免疫力、抗氧化、健脾和胃等多种保健功效，且生产工艺简单、成本低、便于携带，适合各类人群食用。其中在提取猴头菇多糖时，采用挤压膨化技术联合酶解技术提取猴头菇多糖，将挤压膨化技术与传统提取工艺相结合，这大大提高了猴头菇多糖的得率。本发明提供的猴头菇多糖提取方法成本低、提取率高、节约能耗，适合工业化生产。
应当理解的是，以上的一般描述和后文的细节描述仅是示例性和解释性的，并不能限制本发明的公开。
附图说明
此处的附图被并入说明书中并构成本说明书的一部分，示出了符合本发明的实施例，并与说明书一起用于解释本发明的原理。
为了更清楚地说明本发明实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，对于本领域普通技术人员而言，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。
图1为本发明公开实施例提供的一种猴头菇多糖冻干粉及一种猴头菇多糖含片的制备方法示意图。
具体实施方式
这里将详细地对示例性实施例进行说明，其示例表示在附图中。下面的描述涉及附图时，除非另有表示，不同附图中的相同数字表示相同或相似的要素。以下示例性实施例中所描述的实施方式并不代表与本发明相一致的所有实施方式。相反，它们仅是与如所附权利要求书中所详述的、本发明的一些方面相一致的系统的例子。
为解决现有技术中，多糖提取方法的提取率不高、破壁效果差、不适合工业化生产等缺陷。此外本实施方案制备的含片也适宜各类人群食用，便于携带，同时具有一定的保健功效。
参见图1，一种猴头菇多糖含片，按照重量份数计，包括以下组分：
猴头菇多糖冻干粉50-80份、微晶纤维素15-20份、淀粉10-20份、麦芽糊精15-25份、苹果酸5-25份、新橙皮苷二氢查尔酮10-15份、硬脂酸镁1-2份。
猴头菇多糖冻干粉由如下步骤制备而成：
(1)预处理：将猴头菇进行挑选、清洗，所选为大小均匀，颜色鲜亮，状如猴头的猴头菇，使用清水对选好的猴头菇进行清洗，去除表面灰尘。
(2)提取：采用挤压膨化联合酶解法提取猴头菇多糖；
挤压膨化联合酶解法具体为：将猴头菇烘干，粉碎，并用双螺杆挤压机进行挤压。其中，喂料速度10kg/h、螺杆转速400r/min、水分含量16％、挤压温度120℃，挤压膨化后粉碎过80目筛，得到猴头菇粉末，备用。取50g猴头菇粉末置于烧杯中，加入纤维素酶，其中按照质量百分比计，纤维素酶添加量为2％，按照1：20(g/ml)的料液比要求加入蒸馏水，将混合液的ph调至5，放入50℃恒温水浴锅中，酶解2h后，再放入100℃恒温水浴锅中灭活15min。
本实施方案采用挤压膨化技术联合酶解技术提取猴头菇多糖，将挤压膨化与传统提取工艺相结合，大大提高了猴头菇多糖的得率。挤压过程中，物料分子中的内部纤维结构和物理化学性质均发生了改变，经过挤压机高温高剪切力作用可使原料达到更好的破壁效果，更利于有效成分溶出。在植物有效成分提取方面，挤压法也发挥了很大的作用。挤压处理的方法使物料反复受到挤压，物料颗粒间不断地产生摩擦，在两种作用下，物料颗粒被逐渐粉碎细化；同时，物料的细胞内部将会产生持续的拉压应力和剪切应力，两种应力同时作用下，植物细胞内的氢键发生断裂，从而导致细胞壁破碎，以致于植物细胞内的有效成分的溶出。且在本实施方案中经试验发现双螺杆挤压机在物料传送性、加工性、能量利用率等方面都要优于单螺杆挤压机，挤压含水量小的物料也不易结块。纤维素酶的加入可使木质素、纤维素、半纤维素等物质发生降解，在比较温和的条件下分解植物组织，有利于有效成分向提取介质扩散，同时可以分解提取液中的淀粉、果胶、蛋白等产物，降低其对多糖的结合率，使多糖组分更易提取。将挤压膨化技术与酶解法高效结合，可大幅度提高多糖得率，且本发明对于所有种类的多糖提取及其他有效成分的提取均适用。
(3)浓缩：抽滤取上清液，旋蒸进行浓缩；
进行旋蒸温度为60℃，转速为40r/min，旋蒸浓缩到原溶液浓度的1/4即可。
(4)沉淀：醇沉法收集沉淀，得到猴头菇多糖；醇沉法具体为：加入浓缩后溶液体积的4倍量的无水乙醇进行沉淀，再离心，离心条件为：温度－4℃，转速4000r/min，时间20min，离心后倒掉上清液，得到猴头菇多糖沉淀。
(5)制备：沉淀经真空冷冻干燥后，获得猴头菇多糖冻干粉。
将猴头菇多糖真空冷冻干燥的温度为-40℃，真空度为1pa，冷冻干燥时间12h。
一种猴头菇多糖含片的制备方法，包括如下步骤：
(1)过筛：将新橙皮苷二氢查尔酮、微晶纤维素、淀粉、麦芽糊精、苹果酸分别过筛；
其中，新橙皮苷二氢查尔酮、微晶纤维素、淀粉、麦芽糊精、苹果酸分别过100目筛，备用。
(2)混料：按照重量百分比计，将猴头菇多糖冻干粉与新橙皮苷二氢查尔酮、微晶纤维素、淀粉、麦芽糊精、苹果酸按比例混匀，加入粘合剂，制成混料；采取的比例为：猴头菇多糖冻干粉50-80份、微晶纤维素15-20份、淀粉10-20份、麦芽糊精15-25份、苹果酸3-25份、新橙皮苷二氢查尔酮8-15份、硬脂酸镁1-2份。
其中粘合剂为低取代羟丙基甲基纤维素、浓度百分比为25％的液状葡萄糖、浓度百分比为4％的羧甲基纤维素钠中的一种或多种混合物。
(3)造粒：将上述混料过筛造粒、整粒，置于恒温干燥箱中干燥备用；步骤(3)将混料过20目筛进行湿法造粒，置于恒温干燥箱中50℃干燥至混料的含水量低于3％，过18目筛再进行整粒，选用大小均匀的颗粒进行压片。
(4)压片：将整粒置于压片机模具内压片，得到猴头菇多糖含片。压片机模具采用直径为5mm进行压片，压片前涂1-2份硬脂酸镁置于模具作为脱模剂。
本实施方案所制备的含片以猴头菇为原料，猴头菇属于药食两用真菌，尤其是其医药方面的药用价值，受到广大消费者的青睐，具有健脾养胃、安神、抗癌的功效，对体虚乏力、消化不良、失眠、胃与十二指肠溃疡、慢性胃炎、消化道肿瘤等症有特效。
含片添加了液体葡萄糖、羧甲基纤维素钠，二者均能增强含片的稳定性，制成的含片不易干燥，改善了其生物降解性差的特点，同时也能改善一定适口性。另外本含片采用新型甜味剂新橙皮苷二氢查尔酮代替传统含片中的蔗糖、木糖醇、果葡糖浆等，且新橙皮苷二氢查尔酮代谢快，无毒副作用，同时也能够降低血糖含量，减少机体对糖类的吸收，达到降血糖作用，因此适合糖尿病人群及其他抗糖人群食用；
猴头菇多糖的药理活性部分为葡聚糖，新橙皮苷二氢查尔酮的加入可与葡聚糖有效结合，更能起到健脾和胃，润肠通便的效果，即经本实施方案实验发现新橙皮苷二氢查尔酮在体内分解后，可与猴头菇多糖分解后的葡聚糖产生协同增效的效果；另外新橙皮苷二氢查尔酮还具有增香、增甜、掩饰苦味等特性，由于糖苷基不参与代谢，也不会产生热量，让含片保留风味的同时也不会导致肥胖。
下面结合具体的实施例对本发明进行更近一步的解释说明，但是并不用于限制本发明的保护范围。
实施例1
将猴头菇原料烘干粉碎，以10kg/h的喂料速度进挤压机，设置螺杆转速为400r/min、水分含量为16％、挤压温度为120℃，挤出后放入恒温干燥箱内50℃烘干。使用粉碎机将挤压后的猴头菇粉碎，过80目筛。取50g猴头菇粉末置于烧杯中，加入纤维素酶，其中纤维素酶添加量为2％，按照1：15(g/ml)的料液比要求加入蒸馏水，将ph调至5，放入50℃恒温水浴锅中，酶解2h后，再放入100℃恒温水浴锅中灭活15min。将混悬液进行抽滤取上清液，将上清液倒入旋转蒸发瓶内，置于旋蒸仪上，调节温度为60℃，转速为40r/min，观察蒸发瓶内剩余液体的容量，将溶液浓缩至原液体积的1/4左右，加入上述浓缩液体积4倍量的无水乙醇进行沉淀，离心收集沉淀，置于真空冷冻干燥机冷冻干燥12h，得到猴头菇多糖冻干粉。按照重量份数计，准确称取新橙皮苷二氢查尔酮8份、微晶纤维素15份、淀粉10份、麦芽糊精5份、苹果酸5份，分别研细过100目筛后与50份猴头菇多糖冻干粉混合，再与低取代羟丙基甲基纤维素、4％羧甲基纤维素钠混匀，制成混料，用手轻捏分散即可。将混料过20目筛进行湿法造粒，置于恒温干燥箱中50℃干燥至含水量低于3％，过18目筛进行整粒，选用大小均匀的颗粒置于压片机。在模具上涂1g硬脂酸镁进行压片，压片完成即得猴头菇多糖含片。
实施例2
将猴头菇原料烘干粉碎，以10kg/h的喂料速度进挤压机，设置螺杆转速为400r/min、水分含量为16％、挤压温度为120℃，挤出后放入恒温干燥箱内50℃烘干。使用粉碎机将挤压后的猴头菇粉碎，过80目筛。取50g猴头菇粉末置于烧杯中，加入纤维素酶，其中纤维素酶添加量为2％，按照1：20(g/ml)的料液比要求加入蒸馏水，将ph调至5，放入50℃恒温水浴锅中，酶解2h后，再放入100℃恒温水浴锅中灭活15min。将混悬液进行抽滤取上清液，将上清液倒入旋转蒸发瓶内，置于旋蒸仪上，调节温度为60℃，转速为45r/min，将溶液浓缩至原液的1/4，加入浓缩液4倍体积量的无水乙醇沉淀，离心收集沉淀，置于真空冷冻干燥机冷冻干燥14h，得到猴头菇多糖冻干粉。准确称取新橙皮苷二氢查尔酮15份、微晶纤维素20份、淀粉20份、麦芽糊精25份、苹果酸25份，分别研细过100目筛后与猴头菇多糖冻干粉80份混合，再与25％液状葡萄糖、4％羧甲基纤维素钠混匀，制成混料，用手轻捏分散即可。将混料过20目筛进行湿法造粒，置于恒温干燥箱中50℃干燥至含水量低于3％，过18目筛进行整粒，选用大小均匀的颗粒置于压片机。在模具上涂2g硬脂酸镁进行压片，压片完成即得猴头菇多糖含片。
实施例3
将猴头菇原料烘干粉碎，以10kg/h的喂料速度进挤压机，设置螺杆转速为400r/min、水分含量为16％、挤压温度为120℃，挤出后放入恒温干燥箱内50℃烘干。使用粉碎机将挤压后的猴头菇粉碎，过80目筛。取50g猴头菇粉末置于烧杯中，加入纤维素酶，其中纤维素酶添加量为2％，按照1：20(g/ml)的料液比要求加入蒸馏水，将ph调至5，放入60℃恒温水浴锅中，酶解2.5h后，再放入100℃恒温水浴锅中灭活10min。将混悬液进行抽滤取上清液，将上清液倒入旋转蒸发瓶内，置于旋蒸仪上，调节温度为63℃，转速为45r/min，将溶液浓缩至原液的1/4，加入4倍浓缩液体积量的无水乙醇沉淀，离心收集沉淀，置于真空冷冻干燥机冷冻干燥14h，得到猴头菇多糖冻干粉。准确称取新橙皮苷二氢查尔酮12份、微晶纤维素15份、淀粉12份、麦芽糊精16份、苹果酸20份，分别研细过100目筛后与猴头菇多糖冻干粉60份混合，再与低取代羟丙基甲基纤维素、25％液状葡萄糖、4％羧甲基纤维素钠混匀，制成混料，用手轻捏分散即可。将混料过20目筛进行湿法造粒，置于恒温干燥箱中50℃干燥至含水量低于3％，过18目筛进行整粒，选用大小均匀的颗粒置于压片机。在模具上涂1份硬脂酸镁进行压片，压片完成即得猴头菇多糖含片。
对比例1
将猴头菇原料烘干粉碎，以10kg/h的喂料速度进挤压机，设置螺杆转速为400r/min、水分含量为16％、挤压温度为150℃，挤出后放入恒温干燥箱内50℃烘干。使用粉碎机将挤压后的猴头菇粉碎，过80目筛。取50g猴头菇粉末置于烧杯中，加入纤维素酶，其中纤维素酶添加量为2％，按照1：20(g/ml)的料液比要求加入蒸馏水，将ph调至5，放入50℃恒温水浴锅中，酶解2h后，再放入100℃恒温水浴锅中灭活10min。将混悬液进行抽滤取上清液，将上清液倒入旋转蒸发瓶内，置于旋蒸仪上，调节温度为55℃，转速为40r/min，将溶液浓缩至原液的1/4，加入4倍量无水乙醇沉淀，离心收集沉淀，置于真空冷冻干燥机冷冻干燥12h，得到猴头菇多糖冻干粉。准确称取新橙皮苷二氢查尔酮10份、微晶纤维素15份、淀粉10份、麦芽糊精18份、苹果酸8份，分别研细过100目筛后与猴头菇多糖冻干粉50份混合，再与明胶混匀，制成混料，用手轻捏分散即可。将混料过20目筛进行湿法造粒，置于恒温干燥箱中50℃干燥至含水量低于3％，过18目筛进行整粒，选用大小均匀的颗粒置于压片机。在模具上涂1g硬脂酸镁进行压片，压片完成即得猴头菇多糖含片。
对比例2
将猴头菇原料烘干粉碎，以10kg/h的喂料速度进挤压机，设置螺杆转速为400r/min、水分含量为16％、挤压温度为90℃，挤出后放入恒温干燥箱内50℃烘干。使用粉碎机将挤压后的猴头菇粉碎，过80目筛。取50g猴头菇粉末置于烧杯中，加入纤维素酶，其中纤维素酶添加量为2％，按照1：20(g/ml)的料液比要求加入蒸馏水，将ph调至5，放入50℃恒温水浴锅中，酶解2h后，再放入100℃恒温水浴锅中灭活10min。将混悬液进行抽滤取上清液，将上清液倒入旋转蒸发瓶内，置于旋蒸仪上，调节温度为60℃，转速为40r/min，将溶液浓缩至原液的1/4，加入4倍量无水乙醇沉淀，离心收集沉淀，置于真空冷冻干燥机冷冻干燥12h，得到猴头菇多糖冻干粉。准确称取新橙皮苷二氢查尔酮14份、微晶纤维素20份、淀粉18份、麦芽糊精15份、苹果酸20份，分别研细过100目筛后与猴头菇多糖冻干粉70份混合，再与聚维酮混匀，制成混料，用手轻捏分散即可。将混料过20目筛进行湿法造粒，置于恒温干燥箱中50℃干燥至含水量低于3％，过18目筛进行整粒，选用大小均匀的颗粒置于压片机。在模具上涂1g硬脂酸镁进行压片，压片完成即得猴头菇多糖含片。
对比例1-2为实验初期探索案例，在初期实验过程中，我们发现，挤压机的挤压温度会影响后续多糖提取的提取率，这可能是由于温度过高对物料中活性物质造成了破坏，挤压作用效果过于剧烈，部分多糖可能会出现降解，以至于提取率下降。而温度较低时，水分子与物料不能作用完全，导致膨化程度不高，物料结构无法得到有效破坏。适当高温可以促进物料与水分子之间的相互作用，可以达到较好的破壁效果，有利于多糖溶出。
含片制作初期阶段，选用明胶与聚维酮作为粘合剂，但实验过程中发现单独采用明胶做粘合剂时，粘度过大，在混料期间很容易发生胶凝，导致混料不均匀等缺陷。单独采用聚维酮作为粘合剂时，虽混料容易，但制成的含片脆碎度过高，有的甚至会出现龟裂现象。通过实验发现使用低取代羟丙基甲基纤维素、25％浓度液状葡萄糖、4％浓度羧甲基纤维素钠中的一种或多种混合作为粘合剂效果均优于明胶与聚维酮，易于混料，硬度适宜，脆碎度也均在合格范围内，且未出现粉碎、断裂等现象。
将实施例1-3及对比例1-2获得的含片在室温(湿度65％±5％)条件下保存30天，发现对比例1的含片放置30天后会有变硬的现象，对比例2的含片出现一定的返潮现象。通过反复实验发现以低取代羟丙基甲基纤维素、25％浓度液状葡萄糖、4％浓度羧甲基纤维素钠中的一种或多种混合作为粘合剂(实施例1-3)同样条件下45天未见变硬、返潮等现象。
将实施例1-3经挤压膨化处理制得的高提取率多糖与未经挤压膨化处理提取的多糖进行提率对比。
表1经挤压膨化处理与未经挤压膨化处理的多糖提率对比结果
由表1可知，经过挤压膨化处理后，猴头菇多糖平均提取率可以达到7.83％，而未经挤压膨化处理的多糖平均提取率只有4.11％，因此，通过挤压膨化处理联合酶解技术可大幅度提高猴头菇多糖提取率。
将实施例1-3制得的猴头菇多糖含片进行质量检测
表2猴头菇多糖含片质量检测结果
药典规定重量差异限度为±5％，由表2可知实施例1-3重量差异合格。
药典规定硬度测试值在30n-40n最为适宜，由表2可知实施例1-3硬度合格。
药典规定含片不应在10min内全部崩解或融化，由表2可知实施例1-3崩解时限合格。
将实施例1-3制得的猴头菇多糖含片进行营养成分检测。
表3猴头菇多糖含片营养成分检测结果
将实施例1-3制得的猴头菇多糖含片进行脆碎度检测
表4猴头菇多糖含片脆碎度检测结果
药典规定脆碎度不得超过1％，由表4可知实施例1-3脆碎度合格。
将实施例1-3制得的猴头菇多糖含片进行体内健胃消食功能研究
表5猴头菇多糖含片对小鼠胃排空率的影响
由表5可知，通过喂食猴头菇多糖含片，可以有效促进小鼠胃排空率，说明本发明所制得的猴头菇多糖含片可以起到良好的调节胃肠功能，从而起到润肠通便、健胃消食等功效。服用3天后，两组小鼠体重无明显差异，说明本含片作为一种保健食品，既能改善胃排空功能，同时也不会引起正常小鼠体重异常。
将实施例1-3制得的猴头菇多糖含片进行体内抗氧化抗衰老活性研究
表6猴头菇多糖含片对小鼠抗氧化抗衰老活性的影响
由表6可知，与正常组相比，给予猴头菇多糖含片后，可显著提高小鼠肝脏中超氧化物歧化酶(sod)以及谷胱甘肽(gsh)的含量，降低丙二醛(mda)含量，提高抗氧化酶的活性从而缓解氧化应激，保护小鼠肝脏免受氧化损伤，维护机体稳态，延缓衰老。
将实施例1-3制得的猴头菇多糖含片进行体内外免疫调节作用研究
表7猴头菇多糖含片对小鼠免疫功能的影响
**表示与正常组相比差异极显著(p＜0.01),#表示与模型组相比差异显著(p＜0.05)
由表7可知，通过体外实验可以发现，猴头菇多糖含片可以促进体外脾淋巴细胞的增殖，从而增强机体免疫能力，介导免疫应答。脾脏是机体重要的免疫器官，富含t淋巴细胞、b淋巴细胞，是获取淋巴细胞的重要场所之一，其增殖能力是反映机体免疫功能最直接的指标之一。另外，通过体内实验可以发现，喂食猴头菇多糖含片后，可以显著提高由环磷酰胺(ctx)诱导的免疫低下小鼠的胸腺指数、脾脏指数及免疫因子il-2、il-8的含量，从而起到调节机体免疫功能的作用。
本领域技术人员在考虑说明书及实践这里公开的发明后，将容易想到本发明的其它实施方案。本申请旨在涵盖本发明的任何变型、用途或者适应性变化，这些变型、用途或者适应性变化遵循本发明的一般性原理并包括本发明未公开的本技术领域中的公知常识或惯用技术手段。说明书和实施例仅被视为示例性的，本发明的真正范围和精神由权利要求指出。
应当理解的是，本发明并不局限于上面已经描述并在附图中示出的精确结构，并且可以在不脱离其范围进行各种修改和改变。本发明的范围仅由所附的权利要求来限制。
1.一种猴头菇多糖冻干粉，其特征在于，所述猴头菇多糖冻干粉由如下步骤制备而成：
(1)预处理：将猴头菇进行挑选、清洗；
(2)提取：采用挤压膨化联合酶解法提取猴头菇多糖；
(3)浓缩：抽滤取上清液，旋蒸进行浓缩；
(4)沉淀：醇沉法收集沉淀，得到猴头菇多糖；
(5)制备：沉淀经真空冷冻干燥后，获得猴头菇多糖冻干粉。
2.根据权利要求1所述的一种猴头菇多糖冻干粉，其特征在于，步骤(2)所述挤压膨化联合酶解法具体为：将清洗后的猴头菇烘干，粉碎，并用双螺杆挤压机进行挤压，其中，双螺杆挤压机的设定参数为：喂料速度10kg/h、螺杆转速400r/min、水分含量16％、挤压温度120℃，挤压膨化后粉碎过80目筛，得到猴头菇粉末，备用；
取50g猴头菇粉末与纤维素酶混合，其中按照质量百分比计，纤维素酶添加量为2％；
按照料液比为1：20g/ml加入蒸馏水，将混合液的ph调至5，再依次进行酶解、灭活。
3.根据权利要求1所述的一种猴头菇多糖冻干粉，其特征在于，所述步骤(3)进行旋蒸温度为60℃，转速为40r/min，旋蒸浓缩到原溶液体积的1/4即可。
4.根据权利要求1所述的一种猴头菇多糖冻干粉，其特征在于，所述步骤(4)中醇沉法具体为：加入浓缩后溶液体积的4倍量的无水乙醇进行沉淀，再离心，离心条件为：温度－4℃，转速4000r/min，时间20min，离心后倒掉上清液，得到猴头菇多糖沉淀。
5.根据权利要求1所述的一种猴头菇多糖冻干粉，其特征在于，所述步骤(5)中将猴头菇多糖真空冷冻干燥的温度为-40℃，真空度为1pa，冷冻干燥时间12h。
6.一种猴头菇多糖含片，其特征在于，按照重量份数计，包括以下组分：
猴头菇多糖冻干粉50-80份、微晶纤维素15-20份、淀粉10-20份、麦芽糊精15-25份、苹果酸5-25份、新橙皮苷二氢查尔酮10-15份、硬脂酸镁1-2份。
7.一种如权利要求6所述的猴头菇多糖含片的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
(1)过筛：将新橙皮苷二氢查尔酮、微晶纤维素、淀粉、麦芽糊精、苹果酸分别过筛；
(2)混料：按照重量百分比计，将猴头菇多糖冻干粉与新橙皮苷二氢查尔酮、微晶纤维素、淀粉、麦芽糊精、苹果酸按比例混匀，加入粘合剂，制成混料；
(3)造粒：将上述混料过筛造粒、整粒，置于恒温干燥箱中干燥备用；
(4)压片：将整粒置于压片机模具内压片，得到猴头菇多糖含片。
8.根据权利要求7所述的一种猴头菇多糖含片的制备方法，其特征在于，步骤(2)中所述粘合剂为低取代羟丙基甲基纤维素、浓度百分比为25％的液状葡萄糖、浓度百分比为4％的羧甲基纤维素钠中的一种或多种混合物。
9.根据权利要求7所述的一种猴头菇多糖含片的制备方法，其特征在于，所述步骤(3)将混料过20目筛进行湿法造粒，置于恒温干燥箱中50℃干燥至混料的含水量低于3％，过18目筛再进行整粒，选用大小均匀的颗粒进行压片。
10.根据权利要求7所述的一种猴头菇多糖含片的制备方法，其特征在于，所述步骤(4)中压片机模具采用直径为5mm进行压片，压片前涂1-2克硬脂酸镁置于模具作为脱模剂。
技术总结