本发明属于微生态制剂
技术领域：
，涉及禽类饲用的长效共生复合液态微生态制剂及其制备方法。
背景技术：
：近年来，我国畜牧业有较大发展，但是随着畜牧养殖业的发展和养殖业集约化程度的提高，抗生素的过度使用，造成了各种各样的问题，养殖环境恶化，病原体变异率提升，症状不典型，旧病抬头，新病频发，越来越难控制。禽类常见疾病有大肠杆菌、肠炎、输卵管炎等疾病，而目前常用的解决办法就是使用抗生素，不合理使用抗生素的现象也频频发生，抗生素在发挥作用的同时起到筛选耐药菌的作用，根据我国细菌耐药检测网检测的数据显示，在国内100多家国内检出的细菌中，葡萄球菌，对甲氧西林、大环内酯类、喹诺酮类等多种常见抗生素均有超过50％的耐药性，大肠杆菌对抗生素类药物的耐药性在50％以上。目前国家对抗生素的使用有了严格的使用条例，宗旨是“饲料禁抗，养殖限抗，食品无抗”。2018年，农业农村部发布《兽用抗菌药使用减量化行动试点工作方案(2018—2021年)》明确了饲料端减抗和限抗的时间表，饲料无抗已经迫在眉睫。家禽肠道微生态平衡的重要性：肠道不仅是机体营养物质消化吸收的主要场所，也是机体抵御外界病原微生物及其有害代谢产物的先天性屏障。肠道屏障从肠腔基底侧依次由微生物屏障、化学屏障、物理屏障及免疫屏障组成，不同的屏障具有不同的生物学功能和分子调节机制。健康动物肠道存在大量细菌，构成动物肠道的微生态系统，正常的肠道功能是动物机体健康的保证，是提高家禽生长性能的关键，家禽肠道屏障受到损伤，会导致动物健康受到不同程度的影响。益生菌可通过定植颉颃、优势种群作用、产生抑菌代谢产物及促进机体免疫等方式抑制肠道内病原菌的生长与黏附，建立自身的主导地位，从而维持肠道内微生态平衡。而现有的微生态制剂在动物机体内活菌数存活率较差，因而调节肠道作用较差。技术实现要素：本发明提出禽类饲用的长效共生复合液态微生态制剂及其制备方法，解决了现有技术中微生态制剂在动物机体内活菌数存活率较差，因而调节肠道作用较差的问题。本发明的技术方案是这样实现的：禽类饲用的长效共生复合液态微生态制剂，按质量份数计，包括5-10份植物乳杆菌lp45、1-5份枯草芽孢杆菌、1-5份地衣芽孢杆菌、2-3份酿酒酵母菌、11-16份赤砂糖、30-40份水。进一步地，所述长效共生复合微生态制剂的活菌数≥5*108cfu/ml。禽类饲用的长效共生复合液态微生态制剂的制备方法，包括如下步骤：a、按上述禽类饲用的长效共生复合微生态制剂的配方准备各组分；b、将植物乳杆菌lp45接种到发酵培养基a中混合，37℃厌氧发酵16小时，ph值控制在5.0，得到植物乳杆菌lp45发酵液；将枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌和酿酒酵母菌分别接种到发酵培养基b中混合，37℃好氧发酵48h，得到枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌和酿酒酵母菌的微发酵物；c、在步骤b中得到的植物乳杆菌lp45发酵液中加入赤砂糖，再加入枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌和酿酒酵母菌的微发酵物混合，37℃厌氧发酵85h，每5h搅拌5min，ph值降到4.0，终止发酵。进一步地，所述步骤b中植物乳杆菌lp45接种量为发酵培养基a质量的5％。进一步地，所述步骤b中枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌的接种量均为芽孢培养基质量的5％，酿酒酵母菌的接种量为发酵培养基b质量的5％。进一步地，按质量百分数计，所述步骤b中发酵培养基a包括牛肉浸粉1％，酵母膏0.5％，蛋白胨1％，葡萄糖2％，k2hpo40.2％，醋酸钠0.5％，mgso4·7h2o0.02％，mnso4·4h2o0.005％，吐温80.1％，柠檬酸三铵0.2％，余量为水；发酵培养基a经过灭菌，灭菌前ph为6.2-6.6。进一步地，按质量百分数计，所述步骤b中发酵培养基b包括酵母浸粉1％，蛋白胨2％，葡萄糖2％，余量为水；发酵培养基b经过灭菌，灭菌前ph为6.2-6.6；按质量百分数计，所述步骤b中芽孢培养基包括蛋白胨1％，牛肉浸粉0.3％，氯化钠0.5％，余量为水；芽孢培养基经过灭菌，灭菌前ph为7.0-7.3。进一步地，步骤c中当压力高于0.1兆帕，排气降到0.025兆帕。本发明的工作原理及有益效果为：1、本发明中该微生态制剂产品在经过4小时的酸性条件处理，仍有90％以上的存活率可以到肠道内发挥定植与益生作用；0.3％牛胆盐处理，存活率为80％，仍有足够活菌数到达肠道定植，发挥益生作用，能够显著改善肉鸡体质，提高肉鸡健康状况，降低肉鸡发病率，解决调节肠道作用较差的问题。2、本发明中通过长效共生复合液态微生态制剂的特定制备工艺，更好的发挥了菌种的协同作用，将高酶活力的植物乳杆菌产生的蛋白酶、淀粉酶更好的提高家禽饲料转化率，降低料肉比，提高了机体免疫力、抗病力、鸡表现冠红、活力强。3、本发明中菌种采集基地：菌株来源于四川、云南、西藏、新疆、内蒙古等30多个地区健康动物体及粪便；其中根据菌株细胞形态、生理生化特征、16srrna基因序列、phes基因序列等综合分析，lp45(ymc1005)鉴定为植物乳杆菌(lactobacillusplantarum)，植物乳杆菌lp45(ymc1005)，专利保藏号为cgmccno.8072，其具有肠道粘膜定植能力的益生菌群，具有较强的粘附力，对病原性微生物起到竞争排斥的作用，建立和维持肠道正常的优势菌群，调整肠道平衡。植物乳杆菌能合成多种维生素和营养元素，产生多种消化酶，提高饲料利用率，能产生有机酸，促进营养物质吸收；还可有效预防胃肠炎症，胃肠过敏，病原菌感染，内源性感染和抗生素相关腹泻。本发明长效共生复合液态微生态制剂产品作用机理：a.优势菌群学说：产生酸类代谢产物，如乳酸、甲酸、乙酸、丙酸和丁酸。这类酸性物质酸降低肠道ph值，有效地抑制多种病原菌的生长与繁殖，而又对周围的益生菌没有影响，最终在肠道内建立以益生菌为主导地位的微生态环境。b.生物拮抗学说：代谢过程中产生过氧化氢，能激活肠道中的过氧化物酶-硫氰酸盐反应系统，使乳酸过氧化物酶与过氧化氢结合，再将硫氰酸盐氧化成氧化性中间产物，抑制病原菌的生长和繁殖。c.清除毒素学说：代谢能够产生细菌素，如片球菌素、链球菌素等，能够进入病原体菌体内部对其遗传物质或重要的代谢途径造成破坏。附图说明下面结合附图和具体实施方式对本发明作进一步详细的说明。图1为本发明实施例1sd-3301产品对大肠杆菌抑菌效果。图2为本发明实施例1sd-3301产品对鸡白痢沙门抑菌效果。图3为本发明实施例1sd-3301产品对痢疾志贺抑菌效果。图4为本发明实施例1sd-3301产品对肠炎沙门抑菌效果。图5为本发明实施例1sd-3301产品在ph3.0条件下存活情况。图6为本发明实施例1sd-3301产品在0.3％牛胆盐条件下存活情况。图7为本发明实施例1sd-3301产品活菌数稳定性情况。图8为本发明实验组和对照组肉鸡肠道结构的影响；其中(1)表示对照组养殖21d，(2)表示实验组养殖21d，(3)表示对照组养殖42d，(4)表示实验组养殖42d。图9为本发明实验组使用前肉鸡的粪便。图10为本发明实验组使用后肉鸡的粪便。图11为本发明实验组和对照组对肉鸡的增重影响。图12为本发明实验组和对照组对肉鸡的料肉比影响。图13为本发明实验组和对照组对肉鸡的成活率影响。具体实施方式下面将结合本发明实施例，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。下述实施例所用培养基按照如下准备：按质量百分数计，发酵培养基a包括牛肉浸粉1％，酵母膏0.5％，蛋白胨1％，葡萄糖2％，k2hpo40.2％，醋酸钠0.5％，mgso4·7h2o0.02％，mnso4·4h2o0.005％，吐温80.1％，柠檬酸三铵0.2％，余量为水；发酵培养基a经过灭菌，灭菌前ph为6.2-6.6；发酵培养基b包括酵母浸粉1％，蛋白胨2％，葡萄糖2％，余量为水；发酵培养基b经过灭菌，灭菌前ph为6.2-6.6；芽孢培养基包括蛋白胨1％，牛肉浸粉0.3％，氯化钠0.5％，余量为水；芽孢培养基经过灭菌，灭菌前ph为7.0-7.3。一、具体实施例实施例1禽类饲用的长效共生复合液态微生态制剂的制备方法，包括如下步骤：a、按表1禽类饲用的长效共生复合液态微生态制剂的配方准备各组分；b、将植物乳杆菌lp45接种到发酵培养基a中混合，37℃厌氧发酵16小时，接种量为发酵培养基a质量的5％，ph值控制在5.0，得到植物乳杆菌lp45发酵液；将枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌接种到芽孢培养基，酿酒酵母菌接种到发酵培养基b中，37℃好氧发酵48h，得到枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌和酿酒酵母菌的微发酵物；其中枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌的接种量均为芽孢培养基质量的5％，酿酒酵母菌的接种量为发酵培养基b质量的5％；c、在步骤b中得到的植物乳杆菌lp45发酵液中加入赤砂糖，再加入枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌和酿酒酵母菌的微发酵物混合，37℃厌氧发酵85h，每5h搅拌5min，当压力高于0.1兆帕，排气降到0.025兆帕，ph值降到4.0，终止发酵。实施例2禽类饲用的长效共生复合液态微生态制剂的制备方法，包括如下步骤：a、按表1禽类饲用的长效共生复合液态微生态制剂的配方准备各组分；b、将植物乳杆菌lp45接种到发酵培养基a中混合，37℃厌氧发酵16小时，接种量为发酵培养基a质量的5％，ph值控制在5.0，得到植物乳杆菌lp45发酵液；将枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌接种到芽孢培养基，酿酒酵母菌接种到发酵培养基b中，37℃好氧发酵48h，得到枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌和酿酒酵母菌的微发酵物；其中枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌的接种量均为芽孢培养基质量的5％，酿酒酵母菌的接种量为发酵培养基b质量的5％；c、在步骤b中得到的植物乳杆菌lp45发酵液中加入赤砂糖，再加入枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌和酿酒酵母菌的微发酵物混合，37℃厌氧发酵85h，每5h搅拌5min，当压力高于0.1兆帕，排气降到0.025兆帕，ph值降到4.0，终止发酵。实施例3禽类饲用的长效共生复合液态微生态制剂的制备方法，包括如下步骤：a、按表1禽类饲用的长效共生复合液态微生态制剂的配方准备各组分；b、将植物乳杆菌lp45接种到发酵培养基a中混合，37℃厌氧发酵16小时，接种量为发酵培养基a质量的5％，ph值控制在5.0，得到植物乳杆菌lp45发酵液；将枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌接种到芽孢培养基，酿酒酵母菌接种到发酵培养基b中，37℃好氧发酵48h，得到枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌和酿酒酵母菌的微发酵物；其中枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌的接种量均为芽孢培养基质量的5％，酿酒酵母菌的接种量为发酵培养基b质量的5％；c、在步骤b中得到的植物乳杆菌lp45发酵液中加入赤砂糖，再加入枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌和酿酒酵母菌的微发酵物混合，37℃厌氧发酵85h，每5h搅拌5min，当压力高于0.1兆帕，排气降到0.025兆帕，ph值降到4.0，终止发酵。比较例1与实施例1相比，区别仅在于步骤b和步骤c：将植物乳杆菌lp45、枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌和酿酒酵母菌接种到发酵培养基b中混合，37℃厌氧发酵48小时，接种量为发酵培养基b质量的5％，得到发酵液；在得到的发酵液中加入赤砂糖，混合，37℃厌氧发酵85h，每5h搅拌5min，当压力高于0.1兆帕，排气降到0.025兆帕，ph值降到4.0，终止发酵。比较例2与实施例1相比，区别仅在于步骤b和步骤c：将植物乳杆菌lp45、枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌和酿酒酵母菌接种到发酵培养基a中混合，37℃厌氧发酵16小时，接种量为发酵培养基a质量的5％，ph值控制在5.0，得到发酵液；在得到的发酵液中加入赤砂糖，混合，37℃厌氧发酵85h，每5h搅拌5min，当压力高于0.1兆帕，排气降到0.025兆帕，ph值降到4.0，终止发酵。比较例3与实施例1相比，区别仅在于步骤b和步骤c：将枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌接种到芽孢培养基，植物乳杆菌lp45、酿酒酵母菌接种到发酵培养基b中，37℃好氧发酵48h，得到枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌和植物乳杆菌lp45、酿酒酵母菌的微发酵物；其中枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌的接种量均为芽孢培养基质量的5％，植物乳杆菌lp45、酿酒酵母菌的接种量为发酵培养基b质量的5％；在得到的枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌和植物乳杆菌lp45、酿酒酵母菌的微发酵物中加入赤砂糖，混合，37℃厌氧发酵85h，每5h搅拌5min，当压力高于0.1兆帕，排气降到0.025兆帕，ph值降到4.0，终止发酵。比较例4与实施例1相比，区别仅在于步骤b和步骤c：将枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌接种到芽孢培养基，植物乳杆菌lp45、酿酒酵母菌接种到发酵培养基a中，37℃好氧发酵48h，得到枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌和植物乳杆菌lp45、酿酒酵母菌的微发酵物；其中枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌的接种量均为芽孢培养基质量的5％，植物乳杆菌lp45、酿酒酵母菌的接种量为发酵培养基a质量的5％；在得到的枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌和植物乳杆菌lp45、酿酒酵母菌的微发酵物中加入赤砂糖，混合，37℃厌氧发酵85h，每5h搅拌5min，当压力高于0.1兆帕，排气降到0.025兆帕，ph值降到4.0，终止发酵。表1二.抑菌效果试验1、实施例1长效共生复合液态微生态制剂(以下称为sd-3301产品)的抑菌圈实验，结果如下表2。表2实施例1、比较例1-2产品抑菌圈直径(单位：cm)由图1-图4抑菌效果图以及表2可看出，sd-3301产品抑菌圈直径均在2cm以上，明显大于0.8cm，表明该产品能够显著抑制大肠杆菌、沙门氏菌等肠道致病菌的繁殖，有利于维持肠道健康，减少肠炎腹泻发病率，而比较例未采用本发明制备方法，得到的产品抑菌效果有所降低。三、耐酸耐胆盐实验由图5和图6可知，sd-3301产品具有非常高的抵抗人工胃液和人工肠液的特性，经过4小时的酸性条件处理，仍有90％以上的存活率可以到肠道内发挥定植与益生作用；0.3％牛胆盐处理，存活率为80％，仍有足够活菌数到达肠道定植，发挥益生作用。家禽肠道最低ph范围为3-4，由图2耐酸实验可看出该产品能在家禽肠道中存活并保持活性发挥作用。四、活菌数稳定性实验由图7可知，实施例1sd-3301产品在常温和暴晒环境下放置90天，从0天至10天，活菌数处于不断上升的状态，后期随着时间的推移，活菌数逐渐下降，大概下降至初始位点后下降趋势有所回升。暴晒环境下，活菌数保持相对稳定，没有很大的变化，表明本发明产品具有较好的稳定性，能够适应不同环境储存。五、应用实施首先将实施例1禽类饲用的长效共生复合液态微生态制剂放入储存罐中，放置温度为略高于使用场景温度，放置7-10天，定期检测ph值和活菌数，待稳定后进行灌装。具体禽类饲用的长效共生复合液态微生态制剂使用方法如下：1)分别设立对照组和实验组对照组肉鸡正常饲养不添加任何微生态制剂，实验组肉鸡正常饲喂并添加sd-3301饮水。实验组sd-3301分阶段使用：养殖全程分3段使用，每次集中2-4小时饮水完毕。表3sd-3301使用方法日龄用量5-8日龄0.5l/万羽/天13-19日龄1l/万羽/天32-40日龄2l/万羽/天1、肉鸡肠道健康结果如表4。表4sd-3301对肉鸡肠道的影响2、由肠道结构数据图8可知，实验组肠道绒毛长度/隐窝深度提高了8.56％，说明使用sd-3301产品可以改善禽类肠道结构，提高消化吸收能力。3、肠道菌群表5sd-3301益生菌对直肠粪便中乳酸杆菌和大肠杆菌数量的影响由表5实验组与对照组直肠肠道菌群数量的对比可知，sd-3301益生菌具有维持并促进肠道益生菌繁殖，抑制致病菌生长的作用。4、肠道免疫表6sd-3301益生菌对肉鸡抗体水平的影响由表6sd-3301益生菌对肉鸡抗体水平的数据可看出，使用微生态产品后，nd、h9抗体水平均比对照组明显提高，说明sd-3301益生菌能够刺激黏膜免疫功能，提高非特异性免疫，此外，sd-3301益生菌在消化道产生大量乳酸、乙酸等酸性物质，有效降低消化道后端ph，抑制大肠杆菌、沙门氏菌等致病菌的生长繁殖，防止沙门氏菌的垂直传播，减少肠炎的发生。表7sd-3301对免疫水平的影响由表7可看出，实验组抗体均高于对照组，差异均显著(p＜0.05)，表明免疫前后使用能明显提高免疫应答，提高疫苗效价，加速抗体产生及维持，且益生菌菌体成分以免疫佐剂形式作用于免疫器官，促进机体免疫反应，当雏禽饲喂sd-3301益生菌后机体处于高水平的免疫反应状态。5、改善粪便实验实验组腹泻发病率较对照组降低94％，明显减少腹泻及过料情况，提高饲料利用率，促进消化吸收，见图9-10。6、平均增重由图11，实验组的单只均重为5.57斤，对照组的单只均重为5.25斤。表明sd-3301产品可以提高鸡的增重，提高生产性能。7、料肉比由图12可以看出sd-3301实验组较对照组平均料肉比降低了0.02；表明sd-3301产品能够调节肉鸡肠道，促进营养物质吸收，提高饲料利用率。8、提高成活率由图13可以看出sd-3301实验组肉鸡成活率较对照组高1.96％，表明该产品能够显著改善肉鸡体质，提高肉鸡健康状况，降低肉鸡发病率。9、毛鸡重量表8毛鸡重量实验分组毛鸡重量(公斤)对照组87363实验组90658由表8得，实验组比对照组总重高3295kg。表明sd-3301产品可以提高鸡的体重，鸡的体重反应了鸡群的生长性能，体重越大，说明鸡的生长性能越好，收益越高。10、投入产出比表9使用sd-3301实验组与对照组投入产出比差异根据表9数据计算得出使用sd-3301产品与对照组在相同的投入成本下收入提高7.8％，表明sd-3301产品能显著增加肉鸡出栏重，降低料肉比，提高出鸡成活率，为养殖户带来更高经济效益。以上仅为本发明的较佳实施例而已，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。当前第1页1 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技术特征：1.禽类饲用的长效共生复合液态微生态制剂，其特征在于，按质量份数计，包括5-10份植物乳杆菌lp45、1-5份枯草芽孢杆菌、1-5份地衣芽孢杆菌、2-3份酿酒酵母菌、11-16份赤砂糖、30-40份水。
2.根据权利要求1所述的禽类饲用的长效共生复合液态微生态制剂，其特征在于，所述长效共生复合液态微生态制剂的活菌数≥5*108cfu/ml。
3.禽类饲用的长效共生复合液态微生态制剂的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
a、按权利要求1所述禽类饲用的长效共生复合液态微生态制剂的配方准备各组分；
b、将植物乳杆菌lp45接种到发酵培养基a中混合，37℃厌氧发酵16小时，ph值控制在5.0，得到植物乳杆菌lp45发酵液；
将枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌接种到芽孢培养基，酿酒酵母菌接种到发酵培养基b中，37℃好氧发酵48h，得到枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌和酿酒酵母菌的微发酵物；
c、在步骤b中得到的植物乳杆菌lp45发酵液中加入赤砂糖，再加入枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌和酿酒酵母菌的微发酵物混合，37℃厌氧发酵85h，每5h搅拌5min，ph值降到4.0，终止发酵。
4.根据权利要求3所述的禽类饲用的长效共生复合液态微生态制剂的制备方法，其特征在于，所述步骤b中植物乳杆菌lp45接种量为发酵培养基a质量的5％。
5.根据权利要求3所述的禽类饲用的长效共生复合液态微生态制剂的制备方法，其特征在于，所述步骤b中枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌的接种量均为芽孢培养基质量的5％，酿酒酵母菌的接种量为发酵培养基b质量的5％。
6.根据权利要求3所述的禽类饲用的长效共生复合液态微生态制剂的制备方法，其特征在于，按质量百分数计，所述步骤b中发酵培养基a包括牛肉浸粉1％，酵母膏0.5％，蛋白胨1％，葡萄糖2％，k2hpo40.2％，醋酸钠0.5％，mgso4·7h2o0.02％，mnso4·4h2o0.005％，吐温80.1％，柠檬酸三铵0.2％，余量为水；发酵培养基a经过灭菌，灭菌前ph为6.2-6.6。
7.根据权利要求3所述的禽类饲用的长效共生复合液态微生态制剂的制备方法，其特征在于，按质量百分数计，所述步骤b中发酵培养基b包括酵母浸粉1％，蛋白胨2％，葡萄糖2％，余量为水；发酵培养基b经过灭菌，灭菌前ph为6.2-6.6；
按质量百分数计，所述步骤b中芽孢培养基包括蛋白胨1％，牛肉浸粉0.3％，氯化钠0.5％，余量为水；芽孢培养基经过灭菌，灭菌前ph为7.0-7.3。
8.根据权利要求3所述的禽类饲用的长效共生复合液态微生态制剂的制备方法，其特征在于，步骤c中当压力高于0.1兆帕，排气降到0.025兆帕。
技术总结本发明属于微生态制剂技术领域，提出了禽类饲用的长效共生复合液态微生态制剂禽类饲用的长效共生复合液态微生态制剂，包括5‑10份植物乳杆菌LP45、1‑5份枯草芽孢杆菌、1‑5份地衣芽孢杆菌、2‑3份酿酒酵母菌、11‑16份赤砂糖、30‑40份水。通过上述技术方案，解决了现有技术中微生态制剂在动物机体内活菌数存活率较差，因而调节肠道作用较差的问题。
技术研发人员：赵林森;鄢梦洁;张士成;何雨欣;路江浩;杨玲;康少华;刘正懿
受保护的技术使用者：河北一然生物科技有限公司
技术研发日：2020.11.27
技术公布日：2021.03.12
