本发明涉及化学合成技术领域，具体涉及一种硫酸长春碱的合成方法。
背景技术：
硫酸长春碱英文名vinblastinesulfate,casno.143-67-9，分子式c46h58n4o9·h2so4，分子量909.06，结构式如下式1：
硫酸长春碱主要抑制微管蛋白的聚合，而妨碍纺锤体微管的形成，使有丝分裂停止于中期。也可作用于细胞膜，干扰细胞膜对氨基酸的转运，使蛋白质合成受抑制，亦可抑制rna合成。主要用于实体瘤的治疗。对恶性淋巴瘤、睾丸肿瘤、绒毛膜癌疗效较好，对肺癌、乳腺癌、卵巢癌、皮肤癌、肾母细胞瘤及单核细胞白血病也有一定疗效。硫酸长春碱是另一种抗癌药物硫酸长春新碱的原料，在国内市场，硫酸长春碱比较紧缺。
目前，市面上的硫酸长春碱生产或制备方法有：
1、植物提取：从长春花草中提取、精制、成盐。此方法较为成熟，是市面上最主要的生产方式，部分厂家能得到纯度较高的长春碱，但单靠提取工艺获得的长春碱仍难满足市场的需求。有很多研究者在研究长春碱的提取工艺，并发表了很多文献和专利，取得了不错的进展。但植物提取的工艺存在明显的不足，如长春花草中长春碱的含量低，加上提取收率不高，一吨长春花草只能提取几克的高纯度长春碱，其次，提取工艺及其精制工艺需要用到大量的有机溶剂，提取后大量的的长春花草废料需要处理，并产生大量的废水，对环境不友好。
2、生物技术制备：生物合成工艺目前研究较少，受限于其收率低，车间、设备和生产成本较高，目前难以规模化生产。
3、化学合成：专利申请号为cn201110378355.0的发明专利公开了一种长春碱的制备方法，以脱水长春碱为原料，将脱水长春碱溶于无机酸溶液中，加入氯化铁和草酸铵，通入空气，然后与硼氢化钠或硼氢化钾反应，反应毕，加氨水至呈碱性，经萃取、旋干、柱层析后，得长春碱，长春碱溶于无水乙醇中，滴加硫酸-乙醇溶液成盐、析晶、干燥，得到硫酸长春碱，含量≥60％，收率(w/w)约40％(对脱水长春碱计)。该专利使用的原料脱水长春碱同样较为紧缺，此外获得的硫酸长春碱含量较低，难以满足市场对质量的要求。
技术实现要素：
为了克服现有技术的不足，本发明的目的在于提供一种硫酸长春碱的合成方法，该方法的原料价格低廉且容易获取，无需精制，简化了工艺过程，反应副产物少，产品收率高、纯度高，适合规模化生产。
本发明的目的采用如下技术方案实现：
一种硫酸长春碱的制备方法，包括：
1)脱水长春碱反应液的制备步骤：以文多灵或其对应的盐、长春质碱或其对应的盐为原料，在无机酸和氯化铁的作用下反应，得到脱水长春碱反应液；
2)长春碱粗品的制备步骤：在脱水长春碱反应液中加入在草酸铁和水的混合液中，通入空气，滴加硼氢化钠进行还原反应，得到长春碱粗品；
3)长春碱粗品的纯化步骤：长春碱粗品通过过柱纯化，得到长春碱纯品；
4)硫酸长春碱的制备步骤：长春碱纯品与硫酸进行成盐反应，得到硫酸长春碱。
进一步地，1)脱水长春碱反应液的制备步骤中，具体制备过程如下：称取文多灵或其对应的盐、长春质碱或其对应的盐，氮气保护下，将文多灵或其对应的盐、长春质碱或其对应的盐溶于有机溶剂中，加入纯化水，用无机酸调节ph值至1.0-1.5，加入氯化铁，控制温度20-30℃，反应2小时，得脱水长春碱反应液，备用。
进一步地，1)脱水长春碱反应液的制备步骤中，文多灵与长春质碱的质量比为10：(7.4-8)，文多灵与有机溶剂的质量体积比为1：(10-12)g/ml，有机溶剂与纯化水的体积比为1：(10-15)，文多灵与氯化铁的质量比为10：(20-24)。
进一步地，1)脱水长春碱反应液的制备步骤中，文多灵对应的盐为硫酸文多灵，长春质碱对应的盐为硫酸长春质碱或酒石酸长春质碱，有机溶剂为四氢呋喃或三氟乙醇，无机酸为盐酸。
进一步地，2)长春碱粗品的制备步骤中，具体制备过程如下：将草酸铁溶于纯化水中，降温至-5-5℃，搅拌下加入脱水长春碱反应液，泵入空气或氧气30分钟，缓慢滴加硼氢化钠或硼氢化钾的水溶液，滴加过程中用盐酸控制体系的ph值至3.0-5.0，滴加完毕，继续反应30min，反应完毕，用氨水调节ph值至8-9，用二氯甲烷萃取三次，饱和食盐水洗涤有机层，旋干，得长春碱粗品。
进一步地，2)长春碱粗品的制备步骤中，文多灵与草酸铁的质量比为1：(25-28)，草酸铁与纯化水的质量体积比为1：(100-120)g/ml，文多灵与硼氢化钠或硼氢化钾水溶液的质量体积比为1：21g/ml，硼氢化钠或硼氢化钾水溶液的浓度为1:(6-10)g/ml。
进一步地，3)长春碱粗品的纯化步骤中，具体纯化过程如下：
3-1)一次过柱步骤：采用200-300目的碱性氧化铝为固定相，装柱，用二氯甲烷溶解样品，上样，体积比为(5:1)-(1:5)的石油醚和二氯甲烷为流动相，tlc检测，展开剂为二氯甲烷和甲醇的体积比为8:1的混合溶液，收集长春碱段流动相，旋干，得一次过柱产物；
3-2)二次过柱步骤：采用200-300目硅胶为固定相，装柱，用二氯甲烷溶解样品，上样，体积比为(20-40)：1的二氯甲烷和甲醇为流动相，tlc检测，展开剂为二氯甲烷和甲醇的体积比为8:1的混合溶液，收集长春碱段流动相，旋干，得长春碱纯品。
进一步地，
3-1)一次过柱步骤中，文多灵与碱性氧化铝的质量比为1：(30-40)，文多灵与溶解样品的二氯甲烷的质量体积比为1:5g/ml；
3-2)二次过柱步骤中，文多灵与硅胶的质量比为1：(30-35)，文多灵与溶解样品的二氯甲烷的质量体积比为1:4g/ml。
进一步地，4)硫酸长春碱的制备步骤中，具体制备过程为：长春碱纯品溶于有机溶剂中，低温搅拌下滴加硫酸和有机溶剂的混合液至ph值至3.0-4.5，滴毕，搅拌30分钟，继续静置析晶4小时，趁冷过滤，用无水乙醇洗涤，60℃真空干燥5小时，得硫酸长春碱。
进一步地，4)硫酸长春碱的制备步骤中，有机溶剂为甲醇或乙醇，长春碱纯品与有机溶剂质量体积比为1：(10-15)g/ml，硫酸和有机溶剂的混合液的浓度为5-10％，滴加温度为0℃-10℃。
相比现有技术，本发明的有益效果在于：
1、文多灵和长春质碱同样来自长春花草的提取，是合成长春瑞滨、脱水长春碱等抗癌药物的重要原料，它们在长春花草中含量远高于长春碱，且提取工艺成熟，市场价格不到长春碱的十分之一，市场供应充足，可作为合成长春碱的原料。为了获得成本较低的硫酸长春碱，充分利用文多灵和长春质碱两种资源，同时解决合成硫酸长春碱纯度较低的问题，本发明以文多灵和长春碱为原料，在无机酸和氯化铁的作用下，生成脱水长春碱，反应液加入在草酸铁和水的混合液中，通入空气，滴加硼氢化钠还原，反应得长春碱，通过过柱得精制长春碱，最后成盐反应得硫酸长春碱，纯度≥98％。本发明的原料价格低廉且容易获取，无需精制，简化了工艺过程，反应副产物少，产品收率高、纯度高，适合规模化生产。
2、本发明以文多灵和长春质碱为原料，合成硫酸长春碱，原料在市场上供应充裕，且价格较低，容易获取。本发明制得脱水长春碱后，反应液直接进行后续反应，无需精制，简化了工艺过程，减少了生产操作和生产成本。长春碱粗品的制备步骤中，通过用盐酸调控ph值，避免由于硼氢化钠或硼氢化钾过量，使滴加过程中反应体系呈碱性，此操作保证了脱水长春碱反应较完全(反应液经液相检测，脱水长春碱含量低于3％)，同时减少副产物的产生。本工艺反应条件温和，设备简单，适合规模化生产，本工艺通过两次的过柱精制，最终获得的硫酸长春碱，纯度大于等于98％，收率大于35％(相对文多灵的摩尔收率)。
附图说明
图1为实施例1的硫酸长春碱的液相色谱图。
图2为实施例2的硫酸长春碱的液相色谱图。
具体实施方式
下面，结合附图以及具体实施方式，对本发明做进一步描述，需要说明的是，在不相冲突的前提下，以下描述的各实施例之间或各技术特征之间可以任意组合形成新的实施例。除特殊说明的之外，本实施例中所采用到的材料及设备均可从市场购得。
一种硫酸长春碱的制备方法，包括：
1)脱水长春碱反应液的制备步骤：以文多灵或其对应的盐、长春质碱或其对应的盐为原料，在无机酸和氯化铁的作用下反应，得到脱水长春碱反应液；
2)长春碱粗品的制备步骤：在脱水长春碱反应液中加入在草酸铁和水的混合液中，通入空气，滴加硼氢化钠进行还原反应，得到长春碱粗品；
3)长春碱粗品的纯化步骤：长春碱粗品通过过柱纯化，得到长春碱纯品；
4)硫酸长春碱的制备步骤：长春碱纯品与硫酸进行成盐反应，得到硫酸长春碱。
作为优选的实施方式，1)脱水长春碱反应液的制备步骤中，具体制备过程如下：称取文多灵或其对应的盐、长春质碱或其对应的盐，氮气保护下，将文多灵或其对应的盐、长春质碱或其对应的盐溶于有机溶剂中，加入纯化水，用无机酸调节ph值至1.0-1.5，加入氯化铁，控制温度20-30℃，反应2小时，得脱水长春碱反应液，备用。
作为优选的实施方式，1)脱水长春碱反应液的制备步骤中，文多灵与长春质碱的质量比为10：(7.4-8)，文多灵与有机溶剂的质量体积比为1：(10-12)g/ml，有机溶剂与纯化水的体积比为1：(10-15)，文多灵与氯化铁的质量比为10：(20-24)。
作为优选的实施方式，1)脱水长春碱反应液的制备步骤中，文多灵对应的盐为硫酸文多灵，长春质碱对应的盐为硫酸长春质碱或酒石酸长春质碱，有机溶剂为四氢呋喃或三氟乙醇，无机酸为盐酸。
作为优选的实施方式，2)长春碱粗品的制备步骤中，具体制备过程如下：将草酸铁溶于纯化水中，降温至-5-5℃，搅拌下加入脱水长春碱反应液，泵入空气或氧气30分钟，缓慢滴加硼氢化钠或硼氢化钾的水溶液，滴加过程中用盐酸控制体系的ph值至3.0-5.0，滴加完毕，继续反应30min，反应完毕，用氨水调节ph值至8-9，用二氯甲烷萃取三次，饱和食盐水洗涤有机层，旋干，得长春碱粗品。
作为优选的实施方式，2)长春碱粗品的制备步骤中，文多灵与草酸铁的质量比为1：(25-28)，草酸铁与纯化水的质量体积比为1：(100-120)g/ml，文多灵与硼氢化钠或硼氢化钾水溶液的质量体积比为1：21g/ml，硼氢化钠或硼氢化钾水溶液的浓度为1:(6-10)g/ml。
作为优选的实施方式，3)长春碱粗品的纯化步骤中，具体纯化过程如下：
3-1)一次过柱步骤：采用200-300目的碱性氧化铝为固定相，装柱，用二氯甲烷溶解样品，上样，体积比为(5:1)-(1:5)的石油醚和二氯甲烷为流动相，tlc检测，展开剂为二氯甲烷和甲醇的体积比为8:1的混合溶液，收集长春碱段流动相，旋干，得一次过柱产物；
3-2)二次过柱步骤：采用200-300目硅胶为固定相，装柱，用二氯甲烷溶解样品，上样，体积比为(20-40)：1的二氯甲烷和甲醇为流动相，tlc检测，展开剂为二氯甲烷和甲醇的体积比为8:1的混合溶液，收集长春碱段流动相，旋干，得长春碱纯品。
作为优选的实施方式，3-1)一次过柱步骤中，文多灵与碱性氧化铝的质量比为1：(30-40)，文多灵与溶解样品的二氯甲烷的质量体积比为1:5g/ml；
3-2)二次过柱步骤中，文多灵与硅胶的质量比为1：(30-35)，文多灵与溶解样品的二氯甲烷的质量体积比为1:4g/ml。
作为优选的实施方式，4)硫酸长春碱的制备步骤中，具体制备过程为：长春碱纯品溶于有机溶剂中，低温搅拌下滴加硫酸和有机溶剂的混合液至ph值至3.0-4.5，滴毕，搅拌30分钟，继续静置析晶4小时，趁冷过滤，用无水乙醇洗涤，60℃真空干燥5小时，得硫酸长春碱。
作为优选的实施方式，4)硫酸长春碱的制备步骤中，有机溶剂为甲醇或乙醇，长春碱纯品与有机溶剂质量体积比为1：(10-15)g/ml，硫酸和有机溶剂的混合液的浓度为5-10％，滴加温度为0℃-10℃。
实施例1：
一种硫酸长春碱的制备方法，包括：
1)脱水长春碱反应液的制备步骤：氮气保护下，将文多灵10.0g和长春质碱7.4g，溶于100ml三氟乙醇中，加纯化水1200ml，用盐酸调节ph值至1.2，加入氯化铁20g，溶解后，控温25℃，反应两小时，得脱水长春碱反应液。
2)长春碱粗品的制备步骤：草酸铁250g加入22.5l纯化水中，控制温度0℃，搅拌下加入脱水长春碱反应液，泵入空气30min，缓慢滴加硼氢化钠水溶液(21g/210ml),滴加过程中用适量0.1mol/l盐酸控制体系的ph值在3.0-4.0，滴加完毕，继续反应30min，反应完毕，用氨水调节ph值至8，用二氯甲烷萃取三次(15l*3次)，饱和食盐水洗涤有机层，旋干，得长春碱粗品9.8g；
3)长春碱粗品的纯化步骤：
3-1)一次过柱步骤：称量200-300目的碱性氧化铝300g，装柱，用50ml二氯甲烷溶解样品，上样，石油醚：二氯甲烷(3：1)为流动相，tlc检测(二氯甲烷：甲醇＝8:1)，收集长春碱段流动相，旋干，得一次过柱产物8.4g；
3-2)二次过柱步骤：称量200-300目硅胶300g，装柱，用40ml二氯甲烷溶解样品，上样，二氯甲烷：甲醇(30:1)为流动相，tlc检测(二氯甲烷：甲醇＝8:1)，收集长春碱段流动相，旋干，得长春碱纯品7.1g；
4)硫酸长春碱的制备步骤：长春碱纯品7.1g溶于80ml无水乙醇中，5℃搅拌下，滴加8％(w/v)硫酸和有机溶剂的混合液至ph值为3.5，滴毕，搅拌30分钟，继续静置析晶4小时，趁冷过滤，用无水乙醇洗涤，60℃真空干燥5小时，得硫酸长春碱7.0g。
本实施例中，硫酸长春碱的摩尔收率为35.2％，硫酸长春碱的摩尔收率＝硫酸长春碱摩尔量/文多灵摩尔量*100％。
参照图1，具体测试条件为：取硫酸长春碱样品，精密称定，加水溶解并定量稀释制成每1ml中约含0.4mg的溶液，作为供试品溶液，用十八烷基硅烷键合硅胶(粒度5μm)为填充剂，以二乙胺溶液(取二乙胺14ml，加水986ml，混匀，用磷酸调节ph值至7.5)-乙腈-甲醇(32：14：54)为流动相，流速1ml/min，检测波长262nm，柱温30℃。按面积归一法计算硫酸长春碱纯度，纯度为98.3％。
实施例2：
一种硫酸长春碱的制备方法，包括：
1)脱水长春碱反应液的制备步骤：氮气保护下，将文多灵10.0g和长春质碱8.0g，溶于120ml四氢呋喃中，加纯化水1200ml，用盐酸调节ph值至1.1，加入氯化铁24g，溶解后，控温23℃，反应两小时，得脱水长春碱反应液。
2)长春碱粗品的制备步骤：草酸铁280g加入28l纯化水中，控制温度0℃，搅拌下加入脱水长春碱反应液，泵入空气30min，缓慢滴加硼氢化钾水溶液(35g/210ml),滴加过程中用适量0.1mol/l盐酸控制体系的ph值在3.0-4.0，滴加完毕，继续反应30min，反应完毕，用氨水调节ph值至8.5，用二氯甲烷萃取三次(20l*3次)，饱和食盐水洗涤有机层，旋干，得长春碱粗品9.9g；
3)长春碱粗品的纯化步骤：
3-1)一次过柱步骤：称量200-300目的碱性氧化铝400g，装柱，用50ml二氯甲烷溶解样品，上样，石油醚：二氯甲烷(2：1)为流动相，tlc检测(二氯甲烷：甲醇＝8:1)，收集长春碱段流动相，旋干，得一次过柱产物8.7g；
3-2)二次过柱步骤：称量200-300目硅胶350g，装柱，用40ml二氯甲烷溶解样品，上样，二氯甲烷：甲醇(25:1)为流动相，tlc检测(二氯甲烷：甲醇＝8:1)，收集长春碱段流动相，旋干，得长春碱纯品7.3g；
4)硫酸长春碱的制备步骤：长春碱纯品7.3g溶于80ml无水甲醇中，5℃搅拌下，滴加9％(w/v)硫酸和有机溶剂的混合液至ph值3.5，滴毕，搅拌30分钟，继续静置析晶4小时，趁冷过滤，用无水甲醇洗涤，60℃真空干燥5小时，得硫酸长春碱7.1g。
本实施例中，硫酸长春碱的摩尔收率为35.6％，硫酸长春碱的摩尔收率＝硫酸长春碱摩尔量/文多灵摩尔量*100％)。
参照图2，具体测试条件为：取硫酸长春碱样品，精密称定，加水溶解并定量稀释制成每1ml中约含0.4mg的溶液，作为供试品溶液，用十八烷基硅烷键合硅胶(粒度5μm)为填充剂，以二乙胺溶液(取二乙胺14ml，加水986ml，混匀，用磷酸调节ph值至7.5)-乙腈-甲醇(32：14：54)为流动相，流速1ml/min，检测波长262nm，柱温30℃。按面积归一法计算硫酸长春碱纯度，纯度为99.0％。
性能检测：
按美国药典42版分别对实施例1-2制备得到的硫酸长春碱进行检测，具体结果见表1。
表1
上述实施方式仅为本发明的优选实施例方式，不能以此来限定本发明保护的范围，本领域的技术人员在本发明的基础上所做的任何非实质性的变化及替换均属于本发明所要求保护的范围。
1.一种硫酸长春碱的制备方法，其特征在于，包括：
1)脱水长春碱反应液的制备步骤：以文多灵或其对应的盐、长春质碱或其对应的盐为原料，在无机酸和氯化铁的作用下反应，得到脱水长春碱反应液；
2)长春碱粗品的制备步骤：在脱水长春碱反应液中加入在草酸铁和水的混合液中，通入空气，滴加硼氢化钠进行还原反应，得到长春碱粗品；
3)长春碱粗品的纯化步骤：长春碱粗品通过过柱纯化，得到长春碱纯品；
4)硫酸长春碱的制备步骤：长春碱纯品与硫酸进行成盐反应，得到硫酸长春碱。
2.如权利要求1所述的硫酸长春碱的制备方法，其特征在于，1)脱水长春碱反应液的制备步骤中，具体制备过程如下：称取文多灵或其对应的盐、长春质碱或其对应的盐，氮气保护下，将文多灵或其对应的盐、长春质碱或其对应的盐溶于有机溶剂中，加入纯化水，用无机酸调节ph值至1.0-1.5，加入氯化铁，控制温度20-30℃，反应2小时，得脱水长春碱反应液，备用。
3.如权利要求2所述的硫酸长春碱的制备方法，其特征在于，1)脱水长春碱反应液的制备步骤中，文多灵与长春质碱的质量比为10：(7.4-8)，文多灵与有机溶剂的质量体积比为1：(10-12)g/ml，有机溶剂与纯化水的体积比为1：(10-15)，文多灵与氯化铁的质量比为10：(20-24)。
4.如权利要求2所述的硫酸长春碱的制备方法，其特征在于，1)脱水长春碱反应液的制备步骤中，文多灵对应的盐为硫酸文多灵，长春质碱对应的盐为硫酸长春质碱或酒石酸长春质碱，有机溶剂为四氢呋喃或三氟乙醇，无机酸为盐酸。
5.如权利要求1所述的硫酸长春碱的制备方法，其特征在于，2)长春碱粗品的制备步骤中，具体制备过程如下：将草酸铁溶于纯化水中，降温至-5-5℃，搅拌下加入脱水长春碱反应液，泵入空气或氧气30分钟，缓慢滴加硼氢化钠或硼氢化钾的水溶液，滴加过程中用盐酸控制体系的ph值至3.0-5.0，滴加完毕，继续反应30min，反应完毕，用氨水调节ph值至8-9，用二氯甲烷萃取三次，饱和食盐水洗涤有机层，旋干，得长春碱粗品。
6.如权利要求5所述的硫酸长春碱的制备方法，其特征在于，2)长春碱粗品的制备步骤中，文多灵与草酸铁的质量比为1：(25-28)，草酸铁与纯化水的质量体积比为1：(100-120)g/ml，文多灵与硼氢化钠或硼氢化钾水溶液的质量体积比为1：21g/ml，硼氢化钠或硼氢化钾水溶液的浓度为1:(6-10)g/ml。
7.如权利要求1所述的硫酸长春碱的制备方法，其特征在于，3)长春碱粗品的纯化步骤中，具体纯化过程如下：
3-1)一次过柱步骤：采用200-300目的碱性氧化铝为固定相，装柱，用二氯甲烷溶解样品，上样，体积比为(5:1)-(1:5)的石油醚和二氯甲烷为流动相，tlc检测，展开剂为二氯甲烷和甲醇的体积比为8:1的混合溶液，收集长春碱段流动相，旋干，得一次过柱产物；
3-2)二次过柱步骤：采用200-300目硅胶为固定相，装柱，用二氯甲烷溶解样品，上样，体积比为(20-40)：1的二氯甲烷和甲醇为流动相，tlc检测，展开剂为二氯甲烷和甲醇的体积比为8:1的混合溶液，收集长春碱段流动相，旋干，得长春碱纯品。
8.如权利要求7所述的硫酸长春碱的制备方法，其特征在于，3-1)一次过柱步骤中，文多灵与碱性氧化铝的质量比为1：(30-40)，文多灵与溶解样品的二氯甲烷的质量体积比为1:5g/ml；3-2)二次过柱步骤中，文多灵与硅胶的质量比为1：(30-35)，文多灵与溶解样品的二氯甲烷的质量体积比为1:4g/ml。
9.如权利要求1所述的硫酸长春碱的制备方法，其特征在于，4)硫酸长春碱的制备步骤中，具体制备过程为：长春碱纯品溶于有机溶剂中，低温搅拌下滴加硫酸和有机溶剂的混合液至ph值至3.0-4.5，滴毕，搅拌30分钟，继续静置析晶4小时，趁冷过滤，用无水乙醇洗涤，60℃真空干燥5小时，得硫酸长春碱。
10.如权利要求9所述的硫酸长春碱的制备方法，其特征在于，4)硫酸长春碱的制备步骤中，有机溶剂为甲醇或乙醇，长春碱纯品与有机溶剂质量体积比为1：(10-15)g/ml，硫酸和有机溶剂的混合液的浓度为5-10％，滴加温度为0℃-10℃。
技术总结