本发明涉及生物医学技术领域，尤其涉及粒细胞分离液制备方法。
背景技术：
粒细胞是机体固有免疫系统的重要组成部分，在调节机体免疫应答过程中发挥重要作用。近年来研究表明：粒细胞不仅具有抗菌作用，而且具有显著的抗肿瘤作用。对于粒细胞，作为生物制剂，同一来源的粒细胞对不同肿瘤的杀伤活性不同；同一肿瘤，不同的粒细胞对其的杀伤活性也不同。因此需要切实可行的技术方法筛选出抗癌活性高的粒细胞，为临床提供治疗方案依据，现有技术如红细胞裂解法以及红细胞沉降法无法高效的分离出高纯度、高活性的粒细胞，也就没办法进一步的筛选出抗癌活性高的粒细胞。
技术实现要素：
基于背景技术存在的技术问题，本发明提出了粒细胞分离液制备方法。
本发明提出的粒细胞分离液制备方法，包括两种分离液，且两种分离液分别为a液和b液；
a液的制备方法如下：
s1准备一支干净的离心管，做好标记：a液；
s2在离心管中加入12.615ml纯水；
s3再加入5ml1.5m的nacl溶液；
s4将离心管以及内部溶液放入无菌恒温箱中加热到70摄氏度，保存1小时；
s5取出离心管迅速加入加入32.385mlporcell原液；
s6把离心管放入搅拌机内充分搅拌5分钟，a液制备完成；
s7将制备完成的溶液放入无菌试剂瓶中，密封保存，保存环境为0度——6度，制备成密度为1.090g/ml的a液；
b液的制备方法如下：
s1准备一支干净的离心管，做好标记：b液；
s2在离心管中加入17.615ml纯水；
s3再加入5ml1.5m的nacl溶液；
s4将离心管以及内部溶液放入无菌恒温箱中加热到70摄氏度，保存1小时；
s5取出离心管迅速加入加入27.385mlporcell原液；
s6把离心管放入搅拌机内充分搅拌5分钟，b液制备完成；
s7将制备完成的溶液放入无菌试剂瓶中，密封保存，保存环境为0度——6度，制备成密度为1.077g/ml的b液。
优选的，所述a液和b液的制备均位于无菌、无尘车间内。
优选的，所述a液的制备方法中通过移液枪将制备完成的溶液放入无菌试剂瓶中。
优选的，所述b液的制备方法中通过移液枪将制备完成的溶液放入无菌试剂瓶中。
优选的，所述a液和b液均放置在低温冰箱中保存。
本发明中，所述粒细胞分离液制备方法，以所配制出来的两种密度的分离液结合使用，对粒细胞进行分离，其效果相比于市面上所售的粒细胞分离试剂盒的效果要好，所分离分出来的粒细胞在细胞数量、细胞活性、细胞纯度方面都是较优的，其次利用该分离液进行粒细胞分离操作简单，用时较短。
具体实施方式
下面将对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。
粒细胞分离液制备方法，包括两种分离液，且两种分离液分别为a液和b液；
a液的制备方法如下：
s1准备一支干净的离心管，做好标记：a液；
s2在离心管中加入12.615ml纯水；
s3再加入5ml1.5m的nacl溶液；
s4将离心管以及内部溶液放入无菌恒温箱中加热到70摄氏度，保存1小时；
s5取出离心管迅速加入加入32.385mlporcell原液；
s6把离心管放入搅拌机内充分搅拌5分钟，a液制备完成；
s7将制备完成的溶液放入无菌试剂瓶中，密封保存，保存环境为0度——6度，制备成密度为1.090g/ml的a液；
b液的制备方法如下：
s1准备一支干净的离心管，做好标记：b液；
s2在离心管中加入17.615ml纯水；
s3再加入5ml1.5m的nacl溶液；
s4将离心管以及内部溶液放入无菌恒温箱中加热到70摄氏度，保存1小时；
s5取出离心管迅速加入加入27.385mlporcell原液；
s6把离心管放入搅拌机内充分搅拌5分钟，b液制备完成；
s7将制备完成的溶液放入无菌试剂瓶中，密封保存，保存环境为0度——6度，制备成密度为1.077g/ml的b液。
本发明中，a液和b液的制备均位于无菌、无尘车间内。
本发明中，a液的制备方法中通过移液枪将制备完成的溶液放入无菌试剂瓶中。
本发明中，b液的制备方法中通过移液枪将制备完成的溶液放入无菌试剂瓶中。
本发明中，a液和b液均放置在低温冰箱中保存。
本发明：a液的制备方法如下：准备一支干净的离心管，做好标记：a液；在离心管中加入12.615ml纯水；再加入5ml1.5m的nacl溶液；将离心管以及内部溶液放入无菌恒温箱中加热到70摄氏度，保存1小时；取出离心管迅速加入加入32.385mlporcell原液；把离心管放入搅拌机内充分搅拌5分钟，a液制备完成；将制备完成的溶液放入无菌试剂瓶中，密封保存，保存环境为0度——6度，制备成密度为1.090g/ml的a液；
b液的制备方法如下：准备一支干净的离心管，做好标记：b液；在离心管中加入17.615ml纯水；再加入5ml1.5m的nacl溶液；将离心管以及内部溶液放入无菌恒温箱中加热到70摄氏度，保存1小时；取出离心管迅速加入加入27.385mlporcell原液；把离心管放入搅拌机内充分搅拌5分钟，b液制备完成；将制备完成的溶液放入无菌试剂瓶中，密封保存，保存环境为0度——6度，制备成密度为1.077g/ml的b液；
以所配制出来的两种密度的分离液结合使用，对粒细胞进行分离。
以上所述，仅为本发明较佳的具体实施方式，但本发明的保护范围并不局限于此，任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明揭露的技术范围内，根据本发明的技术方案及其发明构思加以等同替换或改变，都应涵盖在本发明的保护范围之内。
1.粒细胞分离液制备方法，其特征在于，包括两种分离液，且两种分离液分别为a液和b液；
a液的制备方法如下：
s1准备一支干净的离心管，做好标记：a液；
s2在离心管中加入12.615ml纯水；
s3再加入5ml1.5m的nacl溶液；
s4将离心管以及内部溶液放入无菌恒温箱中加热到70摄氏度，保存1小时；
s5取出离心管迅速加入加入32.385mlporcell原液；
s6把离心管放入搅拌机内充分搅拌5分钟，a液制备完成；
s7将制备完成的溶液放入无菌试剂瓶中，密封保存，保存环境为0度——6度，制备成密度为1.090g/ml的a液；
b液的制备方法如下：
s1准备一支干净的离心管，做好标记：b液；
s2在离心管中加入17.615ml纯水；
s3再加入5ml1.5m的nacl溶液；
s4将离心管以及内部溶液放入无菌恒温箱中加热到70摄氏度，保存1小时；
s5取出离心管迅速加入加入27.385mlporcell原液；
s6把离心管放入搅拌机内充分搅拌5分钟，b液制备完成；
s7将制备完成的溶液放入无菌试剂瓶中，密封保存，保存环境为0度——6度，制备成密度为1.077g/ml的b液。
2.根据权利要求1所述的粒细胞分离液制备方法，其特征在于，所述a液和b液的制备均位于无菌、无尘车间内。
3.根据权利要求1所述的粒细胞分离液制备方法，其特征在于，所述a液的制备方法中通过移液枪将制备完成的溶液放入无菌试剂瓶中。
4.根据权利要求1所述的粒细胞分离液制备方法，其特征在于，所述b液的制备方法中通过移液枪将制备完成的溶液放入无菌试剂瓶中。
5.根据权利要求1所述的粒细胞分离液制备方法，其特征在于，所述a液和b液均放置在低温冰箱中保存。
技术总结