本申请涉及茶叶处理领域,具体而言,涉及一种茶多肽及其制备方法、茶蛋白的制备方法。
背景技术:
茶叶中的蛋白质绝大多数是非水溶性的,只有1%-2%为水溶性的,在制茶过程中,由于蛋白质的变性凝固,使一些蛋白质的水溶性进一步降低。导致茶叶蛋白的利用率较低。
目前,出现一些将茶叶酶解等制备多肽的方法以增加茶蛋白利用率的技术;但是,现有技术中提取得到的茶蛋白的纯度不高,导致茶蛋白的利用率不高。
技术实现要素:
本申请实施例的目的在于提供一种茶多肽及其制备方法、茶蛋白的制备方法,其旨在提供一种新的茶多肽的制备方法,增加其纯度和利用率。
本申请提供一种茶多肽的制备方法,主要包括:
将茶叶、提取物以及碱性溶液混合搅拌得到中间产物;
去除所述中间产物中的提取物和茶渣,然后进行蛋白质分解得到蛋白多肽;
其中,所述提取物包括交联聚乙烯基吡咯烷酮、膨润土以及硅胶中的至少一种。
采用交联聚乙烯基吡咯烷酮、膨润土以及硅胶中的至少一种与茶叶进行搅拌混合然后再分离、分解可以得到纯度较高的茶多肽,且交联聚乙烯基吡咯烷酮、膨润土以及硅胶可以富集茶叶中的蛋白质,使较多的蛋白质与茶渣分离,并进入滤液中。且该茶多肽能够有效抑制胶原蛋白酶的活性。此外,采用交联聚乙烯基吡咯烷酮、膨润土以及硅胶制备茶多肽,可以减少有机试剂的使用,同时交联聚乙烯基吡咯烷酮、膨润土以及硅胶可重复使用,能有效降低成本,减少污水排放,有效提高提取率。
在本申请第一方面的一些实施例中,去除所述中间产物中的提取物和茶渣是采用离心分离的方式;
可选地,离心分离的转速为8000-10000rpm,离心时间为30-50min。
在本申请第一方面的一些实施例中,所述将茶叶、提取物以及碱性溶液混合搅拌得到中间产物的步骤包括:
将茶叶、提取物以及碱性溶液混合并调节ph值至7-14,在40-70℃下搅拌得到中间产物;
可选地,搅拌的转速为400-500rpm,温度为65℃~75℃。
在本申请第一方面的一些实施例中,所述提取物与所述茶叶的质量比为(0.01~0.1):1;
可选地,所述提取物的浓度为0.05wt%-0.5wt%。
在本申请第一方面的一些实施例中,所述碱性溶液选自氢氧化钠、氨水、氢氧化钾以及碳酸钙中至少一种。
在本申请第一方面的一些实施例中,所述将茶叶、提取物以及碱性溶液混合之前还包括将茶叶粉碎成过60目的粉料;
可选地,蛋白质分解得到蛋白多肽之后还包括;对分解物进行过滤,取滤液。
在本申请第一方面的一些实施例中,所述进行蛋白质分解得到蛋白多肽的步骤包括;
调节所述去除所述中间产物中的提取物和茶渣余下的滤液的ph值至3-5使其沉淀,对沉淀物进行超声分解;
可选地,超声分解10-20min,超声功率为500-800w。
在本申请第一方面的一些实施例中,所述进行蛋白质分解得到蛋白多肽的步骤包括;
调节所述去除所述中间产物中的提取物和茶渣余下的滤液的ph值至3-5使其沉淀,采用蛋白酶分解沉淀物;
可选地,所述蛋白酶选自中性蛋白酶、碱性蛋白酶、复合蛋白酶、胰蛋白酶以及木瓜蛋白酶中的至少一种。
本申请第二方面提供一种茶多肽,茶多肽通过上述的茶多肽的制备方法制得;所述茶多肽中以多肽总重量计算,分子量在(5±0.2)kd的组分含量为45.0%-65.0%。
分子量在5kd左右的茶多肽对抑制胶原蛋白酶的活性效果较佳。本申请提供的茶多肽分子量在(5±0.2)kd的组分含量为45.0%-65.0%,占比较大,抑制胶原蛋白酶的活性效果较佳。可以有效减缓皱纹的产生。
本申请第三方面提供一种茶蛋白的制备方法,主要包括:
将茶叶、提取物以及碱性溶液混合搅拌得到中间产物;
去除所述中间产物中的提取物和茶渣,取滤液;
其中,所述提取物包括交联聚乙烯基吡咯烷酮、膨润土以及硅胶中的至少一种。
采用交联聚乙烯基吡咯烷酮、膨润土以及硅胶作为提取物与茶叶充分混合,然后再离心分离,可以很大程度地提高茶蛋白中蛋白质的纯度。
附图说明
为了更清楚地说明本申请实施例的技术方案,下面将对实施例中所需要使用的附图作简单地介绍,应当理解,以下附图仅示出了本申请的某些实施例,因此不应被看作是对范围的限定,对于本领域普通技术人员来讲,在不付出创造性劳动的前提下,还可以根据这些附图获得其他相关的附图。
图1为实施例1-实施例8和对比例1的茶多肽的胶原蛋白酶抑制效果。
图2为实施例1和对比例1提供的茶多肽分子量的分布情况。
图3示出了实施例1的茶多肽分子量的分布情况。
图4示出了实施例1的茶多肽对3t3细胞ⅰ胶原蛋白分泌水平。
具体实施方式
为使本申请实施例的目的、技术方案和优点更加清楚,下面将对本申请实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述。实施例中未注明具体条件者,按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者,均为可以通过市售购买获得的常规产品。
下面对本申请实施例的茶多肽及其制备方法进行具体说明。
一种茶多肽的制备方法,主要包括:
将茶叶、提取物以及碱性溶液混合搅拌得到中间产物;
去除所述中间产物中的提取物和茶渣,然后进行蛋白质分解得到蛋白多肽;
其中,所述提取物包括交联聚乙烯基吡咯烷酮、膨润土以及硅胶中的至少一种。
交联聚乙烯基吡咯烷酮,ctfa名称:crosslinkedpolyvinylpyrrolidone,简称pvpp,具有很强的膨胀性能和与多类物质的络合能力。
发明人意外地发现,将茶叶、提取物以及碱性溶液混合搅拌得到中间产物;可以使茶叶中较多的蛋白质与茶渣分离进入水相或者与提取物结合。再去除所述中间产物中的提取物和茶渣,可以得到纯度较高、含量较高的蛋白质,提高蛋白质的提取率。对上述蛋白质进行分解可以得到含量较高的分子量在5kd左右的茶多肽。
在本申请的一些实施例中,将将茶叶、提取物以及碱性溶液混合之前还包括将茶叶粉碎成过60目的粉料。可以理解的是,在本申请的其他实施例中,在不考虑产率等因素的情况下,也可以不对茶叶进行粉碎,或者茶叶可以被粉碎成粒径更小或者更大的粉料。
作为示例性地,碱性溶液可以是氨水、氢氧化钾、碳酸钠以及氢氧化钠中的至少一种,例如,在本实施例中,碱性溶液采用氢氧化钠水溶液。需要说明的是,在本申请的其他实施例中,也可以采用其他碱性溶液与茶叶混合并调节其ph值。
提取物包括交联聚乙烯基吡咯烷酮、膨润土以及硅胶中的至少一种。
在一些实施例中,提取物与茶叶的质量比为(0.01~0.1):1。例如,提取物与茶叶的质量比可以为0.01:1、0.02:1、0.05:1、0.07:1、0.09:1、0.1:1等等。
在本申请的实施例中,提取物、茶叶以及碱性溶液的混合,可以先将其中两者混合,再与余下一种混合,例如先混合茶叶以及碱性溶液,再与提取物混合。也可以三者同时混合。
例如,在一些实施例中,取过60目的粉料,添加粉末重量20-60倍的水,使用氢氧化钠调节ph值7-14。例如,可以调节ph值至7、7.5、8、8.5、9、9.5、10、10.5、12、12.5、13、13.5或者14等等。
在本申请的一些实施例中,将茶叶、提取物以及碱性溶液混合搅拌得到中间产物的步骤包括:
将茶叶、提取物以及碱性溶液混合之后在40-70℃下搅拌得到中间产物;例如,上述温度可以为40℃、42℃、45℃、50℃、55℃、60℃、62℃、65℃、68℃或者70℃等等。
作为示例性地,在40-70℃下搅拌得到中间产物的步骤中,搅拌的转速为400-500rpm,温度为65℃~75℃;例如,搅拌的转速可以为400rpm、410rpm、420rpm、450rpm、470rpm、490rpm或者500rpm等等,搅拌过程中的温度例如可以为65℃、68℃、70℃、72℃、75℃或者78℃等等。
在40-70℃下搅拌得到中间产物之后去除所述中间产物中的提取物和茶渣,在本申请的实施例中,去除提取物和茶渣采用离心分离中间产物的方式,然后取离心后的滤液。
离心分离有利于使附着于提取物的蛋白质与提取物分离进入滤液中。需要说明的是,在本申请的其他实施例中,也可以采用其他方式分离中间产物。
作为示例性地,离心分离中间产物的步骤中,转速为8000-10000rpm,离心时间为30-50min。例如,在离心分离过程中,转速可以为8000rpm、8200rpm、8600rpm、9000rpm、9200rpm、9500rpm或者10000rpm等等,离心的时间可以为30min、32min、35min、40min、42min、46min或者50min等等。
离心后取滤液,调节滤液ph值至3-5使其沉淀,对沉淀物进行蛋白质分解得到蛋白多肽。例如,调节滤液ph值至3、3.5、4、4.5或者5使滤液沉淀。调节ph值可以采用盐酸。
调节ph值使滤液沉淀之后对沉淀物进行蛋白质分解得到蛋白多肽。
对沉淀物进行蛋白质分解可以采用酶分解的方式,也可以采用超声对蛋白质进行分解。采用超声对蛋白质进行分解有利于提高分解效率,且超声分解不易引入杂质。
例如,将所述沉淀物与水混合后超声分解10-20min,超声功率为500-800w。超声功率可以为500w、550w、580w、600w、650w、700w、750w或者800w等等。超声时间可以为10min、12min、13min、15min、18min或者20min等等。
或者,采用蛋白酶分解所述沉淀物;在一些实施例中,蛋白酶选自中性蛋白酶、碱性蛋白酶、复合蛋白酶、胰蛋白酶以及木瓜蛋白酶中的至少一种。将所述沉淀物与水按照质量比为1:10混合得到沉淀物水溶液,然后加入酶,酶活力与沉淀物水溶液的比例可以为1000u/ml。
在本申请的一些实施例中,蛋白质分解后还包括对分解物采用5kd陶瓷膜过滤,取滤液。5kd陶瓷膜过滤,可以截取分子量5kd左右的多肽。
在一些实施例中,为了便于储存,还包括对滤液进行干燥,例如干燥的方式可以选用冷冻干燥、真空干燥、喷雾干燥等。
本申请实施例提供的制备方法至少具有以下优点:
采用交联聚乙烯基吡咯烷酮、膨润土以及硅胶中的至少一种与茶叶进行搅拌混合然后再分离、分解可以得到纯度较高的茶多肽。且该茶多肽能够有效抑制胶原蛋白酶的活性。此外,采用交联聚乙烯基吡咯烷酮、膨润土以及硅胶制备茶多肽,可以减少有机试剂的使用,同时交联聚乙烯基吡咯烷酮、膨润土以及硅胶可重复使用,能有效降低成本,减少污水排放,有效提高提取率。
本申请还提供一种茶多肽,该茶多肽通过上述的茶多肽的制备方法制得;
所述茶多肽中以多肽总重量计算,分子量在(5±0.2)kd的组分含量为45.0%-65.0%。
换言之,通过上述茶多肽的制备方法制备得到的多肽中,分子量在(5±0.2)kd的组分含量为45.0wt%-65.0wt%。
胶原蛋白酶是一种水解蛋白的酶,会造成皮肤的水分和弹性缺失,皱纹形成。故抑制胶原蛋白酶的活性,可以有效减缓皱纹的产生。分子量在5kd左右的茶多肽对抑制胶原蛋白酶的活性效果较佳。因此,本申请实施例提供的茶多肽对抑制胶原蛋白酶的活性有较好的贡献。
此外,本申请实施例提供的方法得到的茶多肽中蛋白质的含量较高。
本申请还提供一种茶蛋白的制备方法,主要包括:
将茶叶、提取物以及碱性溶液混合并调节ph值7-14,在40-70℃下搅拌得到中间产物;离心分离所述中间产物,取离心后的滤液。
其中,所述提取物包括交联聚乙烯基吡咯烷酮、膨润土以及硅胶中的至少一种。
承上所述,将茶叶、提取物以及碱性溶液混合并调节ph值7-14,在40-70℃下搅拌得到中间产物;离心分离所述中间产物,取离心后的滤液。相应的工艺参数可以参阅上述,此处不再进行赘述。
发明人研究后发现,在制备茶多肽的过程中,采用交联聚乙烯基吡咯烷酮、膨润土以及硅胶作为提取物与茶叶充分混合,然后再离心分离,可以很大程度地提高茶蛋白中蛋白质的纯度。且得到的蛋白质分子分解后对胶原蛋白酶的抑制效果明显提升。
以下结合实施例对本申请的特征和性能作进一步的详细描述。
实施例1
本实施例提供一种茶多肽,主要通过以下制备方法制得:
(1)取干燥茶叶,粉碎,过60目筛,得到1.0kg茶粉末。
(2)取步骤(1)获得的1.0kg茶粉末,添加粉末重量的40倍水,搅拌均匀后使用氢氧化钠调节ph值至11,添0.2wt%的pvpp,pvpp与茶叶粉末的质量比为0.1:1;均匀搅拌1.0h。搅拌转速为500rpm,温度保持在60℃。
(3)在转速8000rpm条件下离心30min,取上清液用盐酸调ph值至4.0,离心,取沉淀,添加沉淀重量10倍的水,600w功率超声10min后,过滤取滤液。
(4)进行冷冻干燥,得茶多肽。
实施例2
本实施例提供一种茶多肽,主要通过以下制备方法制得:
(1)取干燥茶叶,粉碎,过60目筛,得到1.0kg茶粉末。
(2)取步骤(1)获得的1.0kg茶粉末,添加粉末重量的50倍水,搅拌均匀后使用氢氧化钠调节ph值至13,添0.5wt%的pvpp,pvpp与茶叶粉末的质量比为0.1:1;均匀搅拌2.0h。搅拌转速为500rpm,温度保持在70℃。
(3)在转速8000rpm条件下离心30min,取上清液用盐酸调ph值至4.0,离心,取沉淀,添加沉淀重量10倍的水;以600w功率超声10min后,过滤取滤液。
(4)进行冷冻干燥,得茶多肽。
实施例3
本实施例提供一种茶多肽,主要通过以下制备方法制得:
(1)取干燥茶叶,粉碎,过60目筛,得到1.0kg茶粉末。
(2)取步骤(1)获得的1.0kg茶粉末,添加粉末重量的40倍水,搅拌均匀后使用氢氧化钠调节ph值至12,添0.2wt%的膨润土,膨润土与茶叶粉末的质量比为0.1:1;均匀搅拌1.0h。搅拌转速为500rpm,温度保持在60℃。
(3)在转速8000rpm条件下离心30min,取上清液用盐酸调ph值至4.0,离心,取沉淀,添加沉淀重量10倍的水;以600w功率超声10min后,过滤取滤液。
(4)进行冷冻干燥,得茶多肽。
实施例4
本实施例提供一种茶多肽,主要通过以下制备方法制得:
(1)取干燥茶叶,粉碎,过60目筛,得到1.0kg茶粉末。
(2)取步骤(1)获得的1.0kg茶粉末,添加粉末重量的40倍水,搅拌均匀后使用氢氧化钠调节ph值至11,添0.2wt%的pvpp,pvpp与茶叶粉末的质量比为0.05:1;均匀搅拌1.0h。搅拌转速为500rpm,温度保持在60℃。
(3)在转速8000rpm条件下离心30min,取上清液用盐酸调ph值至4.0,离心,取沉淀,添加沉淀重量10倍的水;添加1000u/ml(酶活力/提取液体积)的碱性蛋白酶,在45℃酶解5.0h,过滤取滤液。
(4)进行冷冻干燥,得茶多肽。
实施例5
本实施例提供一种茶多肽,主要通过以下制备方法制得:
(1)取干燥茶叶,粉碎,过60目筛,得到1.0kg茶粉末。
(2)取步骤(1)获得的1.0kg茶粉末,添加粉末重量的40倍水,搅拌均匀后使用氢氧化钠调节ph值至7,添0.2wt%的硅胶,硅胶与茶叶粉末的质量比为0.05:1;均匀搅拌1.0h。搅拌转速为500rpm,温度保持在60℃。
(3)在转速8000rpm条件下离心30min,取上清液用盐酸调ph值至4.0,离心,取沉淀,添加沉淀重量10倍的水;以600w功率超声10min后,过滤取滤液。
(4)进行冷冻干燥,得茶多肽。
实施例6
本实施例提供一种茶多肽,主要通过以下制备方法制得:
(1)取干燥茶叶,粉碎,过60目筛,得到1.0kg茶粉末。
(2)取步骤(1)获得的1.0kg茶粉末,添加粉末重量的40倍水,搅拌均匀后使用氢氧化钠调节ph值至11,添0.2wt%的pvpp,pvpp与茶叶粉末的质量比为0.05:1;均匀搅拌1.0h。搅拌转速为500rpm,温度保持在60℃。
(3)在转速8000rpm条件下离心30min,取上清液用盐酸调ph值至4.0,离心,取沉淀,添加沉淀重量10倍的水;添加1000u/ml(酶活力/提取液体积)的中性蛋白酶,在65℃酶解5.0h,过滤取滤液。
(4)进行冷冻干燥,得茶多肽。
实施例7
本实施例提供一种茶多肽,主要通过以下制备方法制得:
(1)取干燥茶叶,粉碎,过60目筛,得到1.0kg茶粉末。
(2)取步骤(1)获得的1.0kg茶粉末,添加粉末重量的40倍水,搅拌均匀后使用氢氧化钾调节ph值至11,添0.2wt%的ppvp,ppvp与茶叶粉末的质量比为0.1:1;均匀搅拌1.0h。搅拌转速为500rpm,温度保持在60℃。
(3)在转速8000rpm条件下离心30min,取上清液用盐酸调ph值至4.0,离心,取沉淀,添加沉淀重量10倍的水;以600w功率超声10min后,过滤取滤液。
(4)进行冷冻干燥,得茶多肽。
实施例8
本实施例提供一种茶多肽,主要通过以下制备方法制得:
(1)取干燥茶叶,粉碎,过60目筛,得到1.0kg茶粉末。
(2)取步骤(1)获得的1.0kg茶粉末,添加粉末重量的40倍水,搅拌均匀后使用氨水调节ph值至11,添0.2wt%的ppvp,ppvp与茶叶粉末的质量比为0.1:1;均匀搅拌1.0h。搅拌转速为500rpm,温度保持在60℃。
(3)在转速8000rpm条件下离心30min,取上清液用盐酸调ph值至4.0,离心,取沉淀,添加沉淀重量10倍的水;以600w功率超声10min后,过滤取滤液。
(4)进行冷冻干燥,得茶多肽。
对比例1
本对比例提供一种茶多肽,主要通过以下制备方法制得:
(1)取干燥茶叶,粉碎,过60目筛,得到1.0kg茶粉末。
(2)取步骤(1)获得的1.0kg茶粉末,添加粉末重量的40倍水,搅拌均匀后使用氢氧化钠调节ph值至11,均匀搅拌1.0h。搅拌转速为500rpm,温度保持在60℃。
(3)在转速8000rpm条件下离心30min,取上清液用盐酸调ph值至4.0,离心,取沉淀,添加沉淀重量10倍的水,600w功率超声10min后,过滤取滤液。
(4)进行冷冻干燥,得茶多肽。
试验例1
测试实施例1-8、对比例1得到的茶多肽中蛋白含量。
采用bca(bicinchoninicacid)蛋白检测试剂盒方法测量蛋白质的含量。
在碱性条件下蛋白质将二价铜离子还原成一价铜离子,然后与bca试剂反应生成紫色化合物,在检测562nm处的吸光度。
蛋白含量(%)=测定样品蛋白质量(g)/样品冻干粉质量(g);
5kd分子量分布(%)=通过分离得5kd蛋白质量(g)/样品冻干粉质量(g);
测试结果见表1。
表1
从表1可以看出,实施例1-8得到的茶多肽中蛋白含量远高于对比例1。实施例1-6得到的茶多肽中蛋白含量高于实施例8与实施例7。实施例1得到的茶多肽中蛋白含量最高,且蛋白质的提取率也较高。
说明,通过添加交联聚乙烯基吡咯烷酮、膨润土以及硅胶可以提高茶多肽中蛋白含量,减低茶提取物中杂质含量,提高茶多肽的纯度。
实施例7与实施例8分别采用氢氧化钾和氨水调节ph值,蛋白纯度较低,且5kd分子量左右的占比也较少,蛋白溶出较少。说明碱性溶液采用氢氧化钠有利于茶蛋白的浸出,提高茶蛋白的提取率,从而有利于后续步骤的进行。超声分解茶蛋白具有时间短,不会引人其他物质。
试验例2胶原蛋白酶抑制实验
胶原蛋白酶作用于falgpa(c23h32n4o7)产生的物质在335nm处有吸收,通过监测335nm处的吸光值,考察胶原蛋白酶的活性。使用falgpa作为底物,以分光光度法测定单个样品的胶原蛋白酶抑制效果。
分别取实施例1-实施例8和对比例1的茶多肽,分别使用水溶解为0.5mg/ml(冻干粉质量mg/溶剂体积ml)的浓度,进行胶原蛋白酶测试。测试结果如图1所示。
从图1可知,实施例1-实施例8的茶多肽对胶原蛋白酶抑制效果佳,优于对比例1,胶原蛋白是细胞外基质的主要组成成分,使皮肤具有伸张性,可以补充皮肤各层所需的皮肤营养。而胶原蛋白酶是一种水解蛋白的酶,会造成皮肤的水分和弹性缺失,皱纹形成。故抑制胶原蛋白酶的活性,可以有效减缓皱纹的产生。
试验例3
采用1kd、3kd、5kd、8kd、10kd陶瓷膜分离不同分子量的茶多肽,将实施例1和对比例1提供的茶多肽分别配制成浓度为10mg/ml的水溶液,进行陶瓷膜分离。将滤液冻干,进行含量测定。含量测定方法按照下式进行,计算不同分子量占提取物的质量百分比,公式如下;
含量(%)=a/b*100%
式中:
a:滤液冻干粉的总蛋白质量,g;
b:对应过滤前冻干粉的质量,g。
测试结果如图2所示,从图2可知,实施例1提供的方法能提高5kd在提取物中的分布。
采用1kd、3kd、5kd、8kd、10kd陶瓷膜分离不同分子量的茶多肽,将实施例1制备得到的茶多肽配制浓度为10mg/ml,进行陶瓷膜分离。然后分别将滤液冻干,配制1mg/ml的浓度,进行功效测定。测试结果如图3。
从图3可以看出,5kd茶多肽正是主要功效成分,是主要目标产物,说明本申请提供的方法能有效提高目标物的浸出。
试验例4
对3t3细胞ⅰ胶原蛋白分泌的影响
采用蛋白免疫印迹法,使用3t3细胞,密度为1.7*10^6个/孔,作用时间为48h。铺板24h后,不同的实验组分别加入含有0.2mg/ml、0.4mg/ml质量分数药物的实施例1提供的茶多肽,培养48h后,吸取培养基上清,用pbs溶液洗涤两次,再用700μl的rapi裂解液裂解细胞,将上述裂解液收集,13200rpm、4℃离心30min,吸取上清液去沉淀并测定细胞培养上清液中的蛋白浓度。sds-page蛋白凝胶电泳,上样时保证每个样品的蛋白总量相同,免疫印迹检测。胶原蛋白的分泌水平如图4所示,由图4可知,实施例1能促进3t3细胞的ⅰ胶原蛋白分泌,能有效抑制胶原蛋白酶的活性。
综上可以看出,本申请实施例提供的茶多肽的制备方法得到的产物中多肽含量较高,且在5kd左右的茶多肽占比较高。对抑制胶原蛋白酶的活性有较优的效果。
以上所述仅为本申请的优选实施例而已,并不用于限制本申请,对于本领域的技术人员来说,本申请可以有各种更改和变化。凡在本申请的精神和原则之内,所作的任何修改、等同替换、改进等,均应包含在本申请的保护范围之内。
1.一种茶多肽的制备方法,其特征在于,主要包括:
将茶叶、提取物以及碱性溶液混合搅拌得到中间产物;
去除所述中间产物中的提取物和茶渣,然后进行蛋白质分解得到蛋白多肽;
其中,所述提取物包括交联聚乙烯基吡咯烷酮、膨润土以及硅胶中的至少一种。
2.根据权利要求1所述的茶多肽的制备方法,其特征在于,所述去除所述中间产物中的提取物和茶渣是采用离心分离的方式;
可选地,离心分离的转速为8000rpm-10000rpm,离心时间为30min-50min。
3.根据权利要求1所述的茶多肽的制备方法,其特征在于,所述将茶叶、提取物以及碱性溶液混合搅拌得到中间产物的步骤包括:
将茶叶、提取物以及碱性溶液混合并调节ph值至7-14,在40℃~70℃下搅拌得到中间产物;
可选地,搅拌的转速为400-500rpm,温度为65℃~75℃。
4.根据权利要求1所述的茶多肽的制备方法,其特征在于,所述提取物与所述茶叶的质量比为(0.01~0.1):1;
可选地,所述提取物的浓度为0.05wt%-0.5wt%。
5.根据权利要求1所述的茶多肽的制备方法,其特征在于,所述碱性溶液选自氢氧化钠、氨水、氢氧化钾以及碳酸钙中至少一种。
6.根据权利要求1所述的茶多肽的制备方法,其特征在于,所述将茶叶、提取物以及碱性溶液混合之前还包括将茶叶粉碎成过60目的粉料;
可选地,蛋白质分解得到蛋白多肽之后还包括;采用5kd的滤膜对分解物进行过滤,取滤液。
7.根据权利要求1-6任一项所述的茶多肽的制备方法,其特征在于,所述进行蛋白质分解得到蛋白多肽的步骤包括;
调节所述去除所述中间产物中的提取物和茶渣余下的滤液的ph值至3-5使其沉淀,对沉淀物进行超声分解;
可选地,超声分解10-20min,超声功率为500-800w。
8.根据权利要求1-6任一项所述的茶多肽的制备方法,其特征在于,所述进行蛋白质分解得到蛋白多肽的步骤包括;
调节所述去除所述中间产物中的提取物和茶渣余下的滤液的ph值至3-5使其沉淀,采用蛋白酶分解沉淀物;
可选地,所述蛋白酶选自中性蛋白酶、碱性蛋白酶、复合蛋白酶、胰蛋白酶以及木瓜蛋白酶中的至少一种。
9.一种茶多肽,其特征在于,所述茶多肽通过权利要求1-8任一项所述的茶多肽的制备方法制得;
所述茶多肽中以多肽总重量计算,分子量在(5±0.2)kd的组分含量为45.0%-65.0%。
10.一种茶蛋白的制备方法,其特征在于,主要包括:
将茶叶、提取物以及碱性溶液混合搅拌得到中间产物;
去除所述中间产物中的提取物和茶渣,取滤液;
其中,所述提取物包括交联聚乙烯基吡咯烷酮、膨润土以及硅胶中的至少一种。
技术总结