本发明涉及医药领域,具体涉及一种包含海鞘内囊的产品及其制备方法。
背景技术:
海鞘是被囊动物亚门(urochordata)海鞘纲(ascidiacea)无脊椎动物的统称,在全球各大洋均有分布,约1250种。真海鞘(halocynthiaroretzidrasche),是海鞘纲中一种大型海鞘,栖息在海藻繁茂、水深体清洁的浅海海底。真海鞘现已于日、韩实现人工繁育并作为高端海产品上市销售,多以生鲜食用其鳃囊为主。真海鞘营养丰富、味道鲜美,尤其夏季味道最鲜美,深受日韩国民的青睐,以生食为主,同时远销日本、意大利、法国等国家。我国辽宁、山东等地也已引种并繁育成功,但目前仅作为新鲜食材于近海区域推广,未形成完善的产业链以及便宜推广且保留原生态活性的功能食品制剂,以致其市场规模小,影响了该产业的健康可持续发展。
目前柄海鞘仍未实现人工繁育,也未作为食品推广,可食用内囊部分含量低,致其经济效益低,产业开发利用不足。
技术实现要素:
本发明的目的在于提供一种包含海鞘内囊的产品及其制备方法,能够降低血糖水平,改善胰岛素抵抗状态,增强胰岛素敏感性,改善脂代谢紊乱,降低血游离脂肪酸水平,从而改善糖尿病及其并发症患者生存质量。
糖尿病(diabetesmellitus,dm)是一组以高血糖为特征的代谢性疾病。高血糖则是由于胰岛素分泌缺陷或其生物作用受损,或两者兼有引起。胰岛素抵抗及糖脂代谢障碍导致糖尿病患者各种组织器官,包括眼、肾、心脏、血管、神经系统的慢性损害以及功能障碍,使糖尿病患者处于多种致残致命的健康风险中。糖尿病并发症已经成为严重危害公众健康的关键问题之一,各种治疗药物虽可一定程度上控制血糖水平,但仍难以改善糖尿病多种并发症的进展,如糖尿病心肌病等。因此,寻找活性较强、可预防糖尿病发生,或改善胰岛素抵抗,延缓其并发症进展的新型功能食品十分必要。
发明人研究发现,海鞘内囊中脂肪、蛋白质、总糖和微量元素含量远高于被囊,尤其ω-3多不饱和脂肪酸含量丰富。将海鞘内囊制备成冻干粉后发现其对糖尿病人高血糖和氧化胁迫有一定的改善作用,但由于加工过程易导致了其关键功能因子氧化损伤而失活,使得海鞘内囊冻干粉的产品功效不稳定,效果不佳。
因此,本发明发明人对海鞘内囊产品进行了开发,将海鞘内囊与不同的辅料制备成方便服用的产品,但通过生物活性试验发现产品在改善糖尿病病症时效果均较差,难以进一步提升。
经过长期不断的尝试和探索后,发明人意外地发现,将β-环糊精、抗氧化物与海鞘内囊混合后,再进行加工,制备的产品降血糖活性提升、能够有效改善糖尿病引起的脂代谢紊乱、体重低等症状,可用于制备海鞘内囊功能性产品。
为实现上述目的,本发明提供如下技术方案:
一种包含海鞘内囊的产品,它至少包括海鞘内囊、环糊精、抗氧化物。
在本发明具体实施方式中,包括如下重量份原料:海鞘内囊0.5~5份、环糊精0.05~0.5份、抗氧化物0.01~0.5份;
进一步地,海鞘内囊1~2份、环糊精0.05~0.3份、抗氧化物0.01~0.1份;更进一步地,海鞘内囊1份、环糊精0.05~0.2份、抗氧化物0.01~0.05份。
在本发明具体实施方式中,所述环糊精选自α-环糊精、β-环糊精、γ-环糊精的一种或几种,优选为β-环糊精;
进一步地,所述抗氧化物可以选自甘草抗氧化物,或其他抗氧化物,本发明一个具体实施方式中,所述抗氧化物选自甘草抗氧化物。
本发明还提供了一种包含海鞘内囊的产品的制备方法,将海鞘内囊与环糊精、抗氧化物混合后,再加工。
所述加工可以是本领域内知晓的任意加工方法,如匀浆、粉碎、搅拌、干燥等,只要是将海鞘内囊与环糊精、抗氧化物混合后进行加工的,都属于本发明制备方法的保护范围。
本发明所述包含海鞘内囊的产品,原料除了海鞘内囊、环糊精、抗氧化物外,还可以包含其他组分;将海鞘内囊与环糊精、抗氧化物混合可以理解为将海鞘内囊、环糊精、抗氧化物混合后,再与其他组分混合后再加工,或者将海鞘内囊、环糊精、抗氧化物、其他组分同时混合后再加工。
在本发明的制备方法中,所制备的产品的原料还可以包括其它组分,但其它组分、溶剂的混合方式、加工步骤和方法不限,只要是在加工的时刻,将海鞘内囊、环糊精、抗氧化物混合后进行加工的,都属于本发明制备方法的保护范围。
进一步地,将所有组分以及溶剂混合,再加工;
进一步地,所述溶剂选自水和/或乙醇,优选乙醇或体积分数为40~60%的乙醇水溶液,更优选乙醇或体积分数为50%的乙醇水溶液。
发明人发现,将海鞘内囊、环糊精、抗氧化物用水溶解后进行加工制备得到的产品能够有效改善糖尿病引起的不良症状,在经过无数次试验探究后,发明人进一步发现,使用乙醇水溶液作为溶剂,能够进一步提升所得产品的抗糖尿病活性。
进一步地,所述的制备方法包括如下内容:将所有组分以及溶剂混合,匀浆;
匀浆后得到粒径细小的混合物,即是本发明制备的产品之一。采用其他方法使得原料被粉碎的方式,也都在本发明所述匀浆范围内。
为了满足不同的实际生产生活需求,可以在匀浆后再进行浓缩、干燥或/和粉碎等操作,本发明一个具体实施方式中,匀浆后,进行干燥,粉碎;
为了提高匀浆后产品的均一性,可以将原料匀浆至粒径≤100目。
所述干燥的方法可以选自常压干燥、冷冻干燥、喷雾干燥等,由于海鞘内囊含有生物活性物质,其干燥温度不易过高,具体干燥温度可以通过具体筛选实验得到,本发明一个具体实施方式中,所述干燥的温度≤120℃。
本发明还提供了一种包含海鞘内囊的组合物,它包括上述的产品。
进一步地,所述组合物还包括药学上可接受的辅料。
本发明所述药学上可接受的辅料是药物中除主药以外的一切附加材料的总称,辅料应当具备如下性质:(1)对人体无毒害作用,几无副作用;(2)化学性质稳定,不易受温度、ph、保存时间等的影响;(3)与主药无配伍禁忌,不影响主药的疗效和质量检查;(4)不与包装材料相互发生作用。本发明中辅料包括但不仅限于填充剂(稀释剂)、润滑剂(助流剂或抗粘着剂)、分散剂、湿润剂、粘合剂、调节剂、增溶剂、抗氧剂、抑菌剂、乳化剂、崩解剂等。粘合剂包含糖浆、阿拉伯胶、明胶、山梨醇、黄芪胶、纤维素及其衍生物(如微晶纤维素、羧甲基纤维素钠、乙基纤维素或羟丙甲基纤维素等)、明胶浆、糖浆、淀粉浆或聚乙烯吡咯烷酮等;填充剂包含乳糖、糖粉、糊精、淀粉及其衍生物、纤维素及其衍生物、无机钙盐(如硫酸钙、磷酸钙、磷酸氢钙、沉降碳酸钙等)、山梨醇或甘氨酸等;润滑剂包含微粉硅胶、硬脂酸镁、滑石粉、氢氧化铝、硼酸、氢化植物油、聚乙二醇等;崩解剂包含淀粉及其衍生物(如羧甲基淀粉钠、淀粉乙醇酸钠、预胶化淀粉、改良淀粉、羟丙基淀粉、玉米淀粉等)、聚乙烯吡咯烷酮或微晶纤维素等;湿润剂包含十二烷基硫酸钠、水或醇等;抗氧剂包含亚硫酸钠、亚硫酸氢钠、焦亚硫酸钠、二丁基苯酸等;抑菌剂包含0.5%苯酚、0.3%甲酚、0.5%三氯叔丁醇等;调节剂包含盐酸、枸橼酸、氢氧化钾(钠)、枸橼酸钠及缓冲剂(包括磷酸二氢钠和磷酸氢二钠)等;乳化剂包含聚山梨酯-80、没酸山梨坦、普流罗尼克f-68,卵磷酯、豆磷脂等;增溶剂包含吐温-80、胆汁、甘油等。
本发明还提供了上述产品或组合物在制备预防和/或治疗糖脂代谢紊乱的产品中的用途。
进一步地,所述产品包括预防和/或治疗肥胖症、糖尿病、高血压、高血脂、心血管疾病的产品中的至少一种;
进一步地,所述糖尿病为一型糖尿病或二型糖尿病;
进一步地,所述产品是降糖产品、降脂产品或胰岛素增敏剂;
进一步地,所述产品是提高糖耐量的产品。
本发明所述“降糖产品”为可降低血糖的产品,所述“降脂产品”为可降低血脂的产品,所述“胰岛素增敏剂”为可增强胰岛素敏感性,促进胰岛素充分利用的产品。
本发明还提供了上述的产品或组合物在制备抗氧化产品中的用途;
进一步地,所述产品为改善糖尿病氧化胁迫水平的产品。
进一步地,所述产品为提高总抗氧化能力t-aoc的产品。
进一步地,所述产品的剂型选自粉剂、胶囊剂、片剂、冲剂、丸剂,优选粉剂或冲剂。
本发明所述产品包括但不限于食品、药品、保健品等。
本发明的有益效果是:
(1)本发明将海鞘内囊、β-环糊精(即倍他环糊精)、抗氧化物混合后在制备成功能性产品的方法,能够减少海鞘内囊抗糖尿病的功能成分在加工过程中的损失,提高产品的生物活性,为海鞘内囊产品的生产提供了有效可行的生产方法。
(2)本发明制备的海鞘内囊功能食品具有明显的抗糖尿病活性,能够降低1型、2型糖尿病小鼠血糖水平、改善脂代谢紊乱、增加体重、提高胰岛素增敏性,也可进一步用于相关产品的制备。
(3)本发明实现了海鞘内囊的高价值利用,同时本发明提供的高活性海鞘功能食品,经试验,无明显毒性作用,安全性高。
具体实施方式
下面对本发明的技术方案进行清楚、完整地描述,显然,所描述的实施例是本发明一部分实施例,而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例,本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例,都属于本发明保护的范围。
实施例1
将海鞘内囊洗净后,剥去海鞘被囊,除去袋状鳃囊中的内脏(包括消化管、生殖腺),纯净水洗净粘附泥沙,得可食用内囊部位,沥干水分,备用。
新鲜海鞘内囊10.0kg,倍他环糊精0.5kg,甘草抗氧化物0.2kg,纯净水10.0kg,各物料混匀后,破壁机匀浆,胶体磨研磨至可过100目筛,80℃减压蒸馏浓缩至膏状,电热恒温干燥箱,120℃烘干6小时,至水分含量小于5%,再用粉碎机粉碎,过100筛,得2.2kg高活性海鞘功能食品a。
实施例2
将海鞘内囊洗净后,剥去海鞘被囊,除去袋状鳃囊中的内脏(包括消化管、生殖腺),纯净水洗净粘附泥沙,得可食用内囊部位,沥干水分,备用。
新鲜海鞘内囊10.0kg,倍他环糊精1.0kg,甘草抗氧化物0.1kg,无水乙醇10.0kg,各物料混匀后,破壁机匀浆,胶体磨研磨至可过100目筛,减压浓缩至膏状,冷冻干燥24小时,至水分含量小于5%,粉碎过100目筛,得2.6kg高活性海鞘功能食品b。
实施例3
将海鞘内囊洗净后,剥去海鞘被囊,除去袋状鳃囊中的内脏(包括消化管、生殖腺),纯净水洗净粘附泥沙,得可食用内囊部位,沥干水分,备用。
新鲜海鞘内囊10.0kg,倍他环糊精2.0kg,甘草抗氧化物0.5kg,50%乙醇水溶液15.0kg,各物料混匀后,破壁机匀浆,胶体磨研磨至可过100目筛,减压浓缩至10l,喷雾干燥,得4.0kg高活性海鞘功能食品c。
试验例1抗糖尿病活性试验
本发明产品对二型糖尿病小鼠降血糖作用研究的实验测试
受试样品:本发明中所用新鲜真海鞘购自荣成爱伦湾食品有限公司;倍他环糊精为淄博千汇生物科技有限公司产品;甘草抗氧化物为甘肃亚兰药业有限公司产品。实验组为本发明实施例1~3分别制备的高活性海鞘功能食品a、b和c,
对照组:取新鲜海鞘内囊50.0kg,冷冻干燥,粉碎机粉碎,过100目筛,得海鞘冻干粉7.5kg,1.5kg海鞘冻干粉与0.5kg倍他环糊精、0.2kg甘草抗氧化物混合均匀,得2.2kg对照海鞘功能食品a;
取1.5kg海鞘冻干粉与1.0kg倍他环糊精、0.1kg甘草抗氧化物混合均匀,得2.6kg对照海鞘功能食品b;
取1.5kg海鞘冻干粉与2.0kg倍他环糊精、0.5kg甘草抗氧化物混合均匀,得4.0kg对照海鞘功能食品c。
实验采用健康icr小鼠,18~22g,spf级,雄性,购自山东由济南朋悦实验动物繁育有限公司提供,实验动物生产许可证号:syxk(鲁)20190003。饲养于烟台大学实验动物中心,使用许可证号:syxk(鲁)20170027,自由摄食饮水。
小鼠适应环境一周,随机选取8只作为空白对照组,给予正常饲料。糖尿病模组小鼠给予高脂饲料,连续8周,随后复制2型糖尿病小鼠模型。造模第一天小鼠腹腔注射120mg/kg烟酰胺溶液,半小时后腹腔注射50mg/kg链脲佐菌素(stz)柠檬酸缓冲液;第二天腹腔注射50mg/kgstz柠檬酸缓冲液;注射前,小鼠禁食12h,给药体积10ml/kg。造模后小鼠继续饲喂高脂饮料,造模1周后检测小鼠随机血糖,筛选血糖值高于11.1mmol/l小鼠作为2型糖尿病小鼠。参照表1,按小鼠随机血糖值随机分组,每组8只,每日灌胃给予纯水混悬高活性海鞘功能食品和对照海鞘功能食品,每日1次,每日灌胃前禁食4小时,连续给药4周,期间正常对照组及模型组灌胃给予纯水,灌胃容积10ml/kg体重。期间正常对照组给予正常饲料,其余各组继续给予高脂饲料。
小鼠于末次给药后禁食12小时,眼眶采血,3000×g离心15min,分离血清,空腹血糖、血清总胆固醇(tc)、甘油三酯(tg)、游离脂肪酸(nefa)、总抗氧化能力(t-aoc)的测定均按照试剂盒说明书进行。
采血后小鼠,灌胃给予2.0g/kg葡萄糖溶液,灌胃容积10ml/kg。于灌胃后于30、60、90和120min时间点尾尖采血,由血糖仪测定血糖值。
本实验数以平均值±标准差
表1高活性海鞘功能食品对高脂喂养联合stz复制2型糖尿病小鼠血糖水平的影响
注:与给药前正常对照组比较:**p<0.01。与给药后正常对照组比较:##p<0.01。与给药后模型组比较:&p<0.05,&&<0.01。与对照海鞘功能食品组比较(avsa,bvsb,cvsc):$p<0.05,$$<0.01。
表2高活性海鞘功能食品对高脂喂养联合stz复制2型糖尿病小鼠脂代谢紊乱的影响
注:与正常对照组比较:**p<0.01。与模型组比较:#p<0.05,##p<0.01。与对照海鞘功能食品组比较(avsa,bvsb,cvsc):&p<0.05,&&p<0.01。
表3高活性海鞘功能食品对高脂喂养联合stz复制2型糖尿病小鼠糖耐量的影响
注:与正常对照组比较:**p<0.01。与模型组比较:#p<0.05,##p<0.01。与相应对照海鞘功能食品组比较(avsa,bvsb,cvsc):&p<0.05,&&p<0.01。
由表1可以看出,按本发明实施例1~3分别制备而成的高活性海鞘功能食品a、b、c,以及对照海鞘功能食品a、b、c,均可明显降低2型糖尿病小鼠空腹血糖(p<0.05);但高活性海鞘内囊功能食品a、b、c活性均明显优于相应对照海鞘内囊功能食品a、b和c(p<0.01);表明于加工干燥前,预先添加倍他环糊精和甘草抗氧化物明显保护了海鞘降血糖功能成分,从而获得了高活性海鞘功能食品。
氧化胁迫参与了糖尿病各类并发症和微血管损害,干预氧化胁迫或可延缓糖尿病并发症发生。表2结果表明,高活性海鞘内囊功能食品a、b、c,以及对照海鞘内囊功能食品a、b和c,均可明显提高2型糖尿病小鼠血清总抗氧化能力,且高活性海鞘功能食品a、b、c提高糖尿病小鼠血清总抗氧化力活性明显优于相应对照海海鞘功能食品a、b、c。表明预先添加倍他环糊精和甘草抗氧化物,有力地保护了海鞘中改善糖尿病氧化胁迫水平的功能因子,从而获得了高活性海鞘功能食品。
糖耐量是衡量机体对葡萄糖耐受能力的重要指标之一。表3结果表明,高活性海鞘内囊功能食品a、b和c,以及对照海鞘功能食品a、b、c均明显降低了小鼠血糖水平(p<0.05),且本发明实施例所提供高活性海鞘内囊功能食品a、b和c于不同时间点降血糖效果均明显优于对照海鞘内囊功能食品a、b、c(p<0.05),表明预先添加倍他环糊精和甘草抗氧化物后,于加工过程中保护了海鞘改善糖耐量功能成分的损失,从而获得了高活性海鞘功能食品。
本发明高活性海鞘功能食品对1型糖尿病小鼠降血糖作用研究的实验测试受试样品:高活性海鞘功能食品a、b和c,对照海鞘功能食品a、b和c;
雄性spf级成年昆明小鼠:体重18~22g,购自山东由济南朋悦实验动物繁育有限公司,实验动物生产许可证号:scxk(鲁)20140007,饲养于烟台大学实验动物中心,使用许可证号:syxk(鲁)20170027,自由摄食饮水;链脲佐菌素,购自上海阿拉丁公司;注射用胰岛素,万邦生化医药股份有限公司产品。
小鼠适应环境一周,随机选取10只作为正常对照组,其余小鼠禁食12小时后,1次性腹腔注射stz柠檬酸缓冲液150mg/kg。注射后,常规饲养。注射完成后第5天,禁食6小时,测小鼠空腹血糖,空腹血糖值超过11.1mmol/l者,认定为造模成功。
干预1型糖尿病实验中,将造模成功的72只小鼠,按照空腹血糖值,随机分为9组。按表4分所示分组情况分别给予不同受试物,每日一次,连续4周。正常对照组和模型组每日灌胃纯水,阳性对照组每日腹部皮下注射胰岛素iu/kg,其余各组每日灌胃给予相应海鞘功能食品。末次给药后,小鼠禁食12h,称量体重,剪尾采血,血糖仪测定小鼠空腹血糖值。
胰岛素增敏实验中,已复制成功1型糖尿病小鼠72只,禁食6小时后,剪尾采血,测定空腹血糖,并按空腹血糖值随机分为9组,按表5所示分组情况,灌胃给予受试物,正常对阳组、模型组和胰岛素对照组灌胃给予纯水,海鞘功能食品各组灌胃给予相应海鞘功能食品纯水混悬液,给予容积10.0ml/kg体重。给予受试物后2h,除正常对照组、模型组外,其余各组小鼠均于腹部皮下注射胰岛素2iu/kg体重,2h后,剪尾采血,血糖仪测定小鼠血糖水平。
本实验各组数据以平均值±标准差
表4高活性海鞘功能食品对stz诱导1型糖尿病小鼠空腹血糖和体重的影响
注:与给药前正常对照组比较:**p<0.01。与给药后正常对照组比较:##p<0.01。与给药后模型组比较:&p<0.05,&&p<0.01。与相应对照海鞘功能食品组比较(avsa,bvsb,cvsc):$p<0.05。
表5高活性海鞘功能食品对胰岛素降血糖活性的影响
注:与给药前正常对照组比较:**p<0.01。与给药后正常对照组比较:##p<0.01。与给药后模型组比较:&p<0.05,&&p<0.01。与相应对照海鞘功能食品组比较(avsa,bvsb,cvsc):$p<0.05。
由表4可知,高活性海鞘功能食品a、b、c,以及对照海鞘功能食品a、b、c,均可明显降低1型糖尿病小鼠空腹血糖(p<0.05)、改善1型糖尿病小鼠低体重,但高活性海鞘功能食品a、b、c活性均明显优于相应对照海鞘功能食品a、b和c(p<0.01)。表明于加工干燥前,预先添加倍他环糊精和甘草抗氧化物明显保护了海鞘改善1型糖尿病高血糖和低体重调节的功能成分,从而获得了干预1型糖尿病的高活性海鞘功能食品。
胰岛素是现有糖尿病治疗的关键药物之一,但胰岛素抵抗将严重影响胰岛素调节糖脂代谢功能的发挥。本试验例考察了本发明提供的高活性海鞘功能食品对胰岛素降血糖活性的增敏作用,结果见表5:与正常对照组相比,模型组小鼠空腹血糖值明显升高(p<0.01)。本发明制备得到的高活性海鞘功能食品a、b、c,以及对照海鞘功能食品a、b、c,与胰岛素联用,均可明显增强胰岛素的降血糖活性(p<0.05),但高活性海鞘功能食品a、b、c,效果明显优于相应的对照海鞘功能食品a、b和c(p<0.05)。表明于新鲜海鞘内囊加工干燥前,预先添加倍他环糊精和甘草抗氧化物,明显保护了海鞘胰岛素增敏功能因子,从而得到了具有更强胰岛素增敏活性的高活性海鞘功能食品。
以上所述仅为本发明的实施例,并非因此限制本发明的保护范围,凡是利用本发明的说明书所作的等效流程或等效结构的变换,或直接、或间接运用在其他相关的技术领域,均应同理包括在本发明的保护范围之内。
1.一种包含海鞘内囊的产品,其特征在于,它至少包括海鞘内囊、环糊精、抗氧化物。
2.根据权利要求1所述的产品,其特征在于,包括如下重量份原料:海鞘内囊0.5~5份、环糊精0.05~0.5份、抗氧化物0.01~0.5份;
进一步地,海鞘内囊1~2份、环糊精0.05~0.3份、抗氧化物0.01~0.1份;更进一步地,海鞘内囊1份、环糊精0.05~0.2份、抗氧化物0.01~0.05份。
3.根据权利要求1或2所述的产品,其特征在于,所述环糊精选自α-环糊精、β-环糊精、γ-环糊精的一种或几种,优选为β-环糊精;
进一步地,所述抗氧化物选自甘草抗氧化物。
4.一种包含海鞘内囊的产品的制备方法,其特征在于,将海鞘内囊与环糊精、抗氧化物混合后,再加工。
5.根据权利要求4所述的制备方法,其特征在于,将所有组分以及溶剂混合,再加工;
进一步地,所述溶剂选自水和/或乙醇,优选乙醇或体积分数为40~60%的乙醇水溶液,更优选乙醇或体积分数为50%的乙醇水溶液。
6.根据权利要求4或5所述的制备方法,其特征在于,包括如下内容:将所有组分以及溶剂混合,匀浆;
进一步地,匀浆后,干燥,粉碎;
更进一步地,所述干燥的温度≤120℃。
7.一种包含海鞘内囊的组合物,其特征在于,它包括权利要求1~3任一项所述的产品。
8.权利要求1~3任一项所述的产品或权利要求7所述的组合物在制备预防和/或治疗糖脂代谢紊乱的产品中的用途。
9.根据权利要求8所述的用途,其特征在于,所述产品包括预防和/或治疗肥胖症、糖尿病、高血压、高血脂、心血管疾病的产品中的至少一种;进一步地,所述糖尿病为一型糖尿病或二型糖尿病;
进一步地,所述产品是降糖产品、降脂产品或胰岛素增敏剂;
进一步地,所述产品是提高糖耐量的产品。
10.权利要求1~3任一项所述的产品或权利要求7所述的组合物在制备抗氧化产品中的用途;
进一步地,所述产品为改善糖尿病氧化胁迫水平的产品;
进一步地,所述产品为提高总抗氧化能力t-aoc的产品。
技术总结