本发明涉及食品和药物领域，具体涉及一种促进钙口服吸收的葛花提取物。
背景技术：
钙是生物体内重要的结构组成成分且参与调节细胞的多种生理过程，例如钙在人体内的生理功能包括体内的生物钙化、血液凝固、肌肉收缩及神经信号传递等等，从而维持正常的生理机能。
缺钙会引起各种疾病的发生，尤其是对于婴幼儿、儿童和孕妇而言，缺钙常常引起骨质软化症、抽搐、惊厥、腰酸背痛，关节疼痛等等。口服钙片如碳酸钙片是常用的补钙方式，然而，口服钙片常常存在吸收效率低的问题，尤其是对老年人而言，因此，为了补钙，需要长期大量服用钙片，导致患者顺应性低，此外，对于钙缺乏严重的患者，由于口服钙片吸收速率慢，往往需要注射补钙，然而注射补钙成本高、患者顺应性低，不适合长期补钙的患者。现有技术中缺乏促进钙口服吸收的药物，从而限制了口服钙片对钙缺乏的有效治疗。
因此，本领域需要开发一种促进钙口服吸收的方法来提高钙吸收和治疗钙缺乏症。
技术实现要素：
本发明的目在于提供一种葛花提取物，所述的葛花提取物能够有效促进钙的口服吸收，提高血钙水平，治疗钙缺乏症。
本发明第一方面提供一种葛花提取物，所述的葛花提取物通过以下方法制备：
(1)用醇溶剂对葛花进行提取，得到醇提取液；
(2)所述的醇提取液经浓缩后，加入有机溶剂进行萃取，将有机相减压蒸馏除去溶剂，得到葛花提取物，其中，所述的有机溶剂包括石油醚、氯仿、乙酸乙酯中的一种或多种。
优选地，所述的葛花提取物包括干浸膏。
优选地，所述的葛花提取物为干提取物。
优选地，所述的步骤(1)中，所述的醇溶剂为c1-c4低级醇或c1-c4低级醇水溶液。
优选地，所述的c1-c4低级醇包括甲醇、乙醇、丙醇和丁醇中的一种或多种。
优选地，所述的c1-c4低级醇水溶液中，c1-c4低级醇的体积分数为40-70％，较佳地50-60％，更佳地55-65％。
优选地，所述的步骤(2)中，所述的有机溶剂包括石油醚。
优选地，所述的葛花提取物通过以下方法制备而得：
向葛花中加入6-10倍量的55-65％(v/v)乙醇水溶液，加热回流提取4-8h后，过滤，滤液经减压浓缩，得到浓缩液，向所述浓缩液中加入石油醚萃取，将得到的石油醚有机相层减压蒸馏除去溶剂，干燥，得到葛花提取物。
优选地，所述的55-65％(v/v)乙醇水溶液为60％(v/v)乙醇水溶液。
本发明第二方面，提供一种如本发明第一方面所述的葛花提取物的用途，用于制备组合物，所述的组合物用于促进钙的口服吸收。
优选地，所述的组合物为药物组合物、食品组合物或保健品组合物。
优选地，所述的组合物还包括药学上、食品上或保健品上可接受的载体。
优选地，所述的组合物的剂型为固体制剂或液体制剂。
优选地，所述的组合物的剂型为口服制剂或注射制剂。
优选地，所述的钙包括碳酸钙中的钙。
优选地，所述的食品组合物为饮料或酸奶。
优选地，所述的组合物的剂型为乳液、片剂、胶囊剂、口服液、颗粒剂、散剂或糖浆剂。
优选地，所述的组合物还包括维生素d。
优选地，所述的维生素d包括维生素d3。
优选地，所述的葛花提取物与维生素d的比(mg:iu)为(1-40)：(80-320)，较佳地(5-20)：(100-300)，更佳地(5-15)：(150-250)，更佳地(8-12)：(180-220)。
优选地，所述的组合物还包括l-阿拉伯糖。
本发明第三方面提供一种组合物，所述的组合物包括如本发明第一方面所述的葛花提取物和维生素d。
优选地，所述的维生素d包括维生素d3。
优选地，所述的组合物还包括l-阿拉伯糖。
优选地，所述的组合物还包括碳酸钙。
优选地，所述的组合物为药物组合物、食品组合物、保健品组合物或饮料组合物。
优选地，所述的组合物还包括药学上、食品上或保健品上可接受的载体。
优选地，所述的组合物的剂型为固体制剂或液体制剂。
优选地，所述的组合物的剂型为口服制剂或注射制剂。
优选地，所述的组合物为食品组合物，所述的食品组合物为饮料或酸奶。
优选地，所述的组合物的剂型为乳液、片剂、胶囊剂、口服液、颗粒剂、散剂或糖浆剂。
优选地，所述的饮料为健康均衡营养性饮料或运动性饮料。
优选地，所述的酸奶为酸乳、发酵乳、风味酸乳或风味发酵乳。
优选地，所述的葛花提取物与维生素d的比(mg:iu)为(1-40)：(80-320)，较佳地(5-20)：(100-300)，更佳地(5-15)：(150-250)，更佳地(8-12)：(180-220)。
优选地，所述的葛花提取物与碳酸钙的重量比为(1-40)：(500-1200)，较佳地(5-20)：(600-1000)，更佳地(5-15)：(700-900)，更佳地(8-12)：(750-850)。
优选地，所述的葛花提取物的含量为1-99wt％，较佳地10-90wt％，更佳地20-80wt％，以组合物的总重量计算。
优选地，所述的维生素d的含量为1-99wt％，较佳地10-90wt％，更佳地20-80wt％，以组合物的总重量计算。
本发明第三四方面提供一种本发明第三方面所述的组合物的用途，用于制备促进钙口服吸收的制剂。
优选地，所述的钙包括碳酸钙中的钙。
优选地，所述制剂为口服制剂。
本发明第五方面提供一种含钙组合物，，所述的含钙组合物包括如本发明第一方面所述的葛花提取物、维生素d和碳酸钙。
优选地，所述的含钙组合物为饮料或酸奶。
优选地，所述含钙组合物的剂型为口服制剂。
优选地，所述的维生素d包括维生素d3。
向葛花中加入6-10倍量的55-65％(v/v)乙醇水溶液，加热回流提取4-8h后，过滤，滤液经减压浓缩，得到浓缩液，向所述浓缩液中加入石油醚萃取，将得到的石油醚有机相层减压蒸馏除去溶剂，干燥，得到葛花提取物。
优选地，所述的55-65％(v/v)乙醇水溶液为60％(v/v)乙醇水溶液。
优选地，所述的葛花提取物与维生素d的比(mg:iu)为(1-40)：(80-320)，较佳地(5-20)：(100-300)，更佳地(5-15)：(150-250)，更佳地(8-12)：(180-220)。
优选地，所述的葛花提取物与碳酸钙的重量比为(1-40)：(500-1200)，较佳地(5-20)：(600-1000)，更佳地(5-15)：(700-900)，更佳地(8-12)：(750-850)。
本发明第六方面提供一种如本发明第五方面所述的含钙组合物的用途，用于制备(i)预防和/治疗钙缺乏症；和/或(ii)预防和/治疗与钙缺乏相关的疾病的制剂。
优选例中，所述的钙缺乏包括血钙缺乏。
优选例中，所述的钙缺乏症包括血钙缺乏症。
应理解，在本发明范围内中，本发明的上述各技术特征和在下文(如实施例)中具体描述的各技术特征之间都可以互相组合，从而构成新的或优选的技术方案。
具体实施方式
本发明开发了一种葛花提取物，所述的葛花提取物能够有效促进钙的口服吸收，提高血钙水平，治疗钙缺乏症。本发明的实验研究还表明，本发明所述的葛花提取物与维生素d能够协同促进钙的口服吸收，因此，葛花提取物与维生素d联用能够进一步促进钙的口服吸收，治疗钙缺乏症。
术语
除非另有定义，否则本文中所用的所有技术和科学术语的含义与本发明所属领域普通技术人员普遍理解的含义相同。
如本文所用，术语“包括”、“包含”与“含有”可互换使用，不仅包括开放式定义，还包括半封闭式、和封闭式定义。换言之，所述术语包括了“由……构成”、“基本上由……构成”。
如本文所用，“葛花”中药名，为豆科植物野葛puerarialobata(willd.)ohwi、甘葛藤p.thomsoniibenth.的花。
如本文所用，术语“iu”为国际单位(internationalunit)。
如本文所用，术语“60％(v/v)乙醇”或“60％(v/v)乙醇水溶液”可互换使用，是指乙醇的体积分数为60％的乙醇水溶液，例如，60％的乙醇通过60ml无水乙醇 40ml水配制。
维生素d3(vitamind3)是维生素d的一种。
葛花提取物及其用途
本发明提供一种葛花提取物，所述的葛花提取物优选为干浸膏或干提取物。
优选地，所述的葛花提取物通过以下方法制备：
(1)用醇溶剂对葛花进行提取，得到醇提取液；
(2)所述的醇提取液经浓缩后，加入有机溶剂进行萃取，将有机相减压蒸馏除去溶剂，得到葛花提取物，其中，所述的有机溶剂包括石油醚、氯仿、乙酸乙酯中的一种或多种。
优选地，所述的步骤(1)中，所述的醇溶剂为c1-c4低级醇或c1-c4低级醇水溶液。
优选地，所述的c1-c4低级醇包括甲醇、乙醇、丙醇和丁醇中的一种或多种。
优选地，所述的c1-c4低级醇水溶液中，c1-c4低级醇的体积分数为40-70％，较佳地50-60％，更佳地55-65％。
优选地，所述的步骤(2)中，所述的有机溶剂为石油醚。
优选地，所述的葛花提取物通过以下方法制备而得：
向葛花中加入6-10倍量的55-65％(v/v)乙醇水溶液，加热回流提取4-8h后，过滤，滤液经减压浓缩，得到浓缩液，向所述浓缩液中加入石油醚萃取，将得到的石油醚有机相层减压蒸馏除去溶剂，干燥，得到葛花提取物。
本发明还提供一种本发明所述葛花提取物的用途，用于制备组合物，所述的组合物用于促进钙的口服吸收。
优选地，所述的钙包括碳酸钙中的钙。
组合物及其用途
本发明还提供一种组合物，所述的组合物可以为药物组合物、食品组合物或保健品组合物。
本发明所述的组合物还包括药学上、食品上或保健品上可接受的载体。
如本文所用，术语“药学上、食品上或保健品上可接受的载体”指的是：一种或多种相容性固体、半固体、液体或凝胶填料，它们适合于人体或动物使用，而且有足够的纯度和足够低的毒性。
应理解，在本发明中，所述的载体没有特别的限制，可选用本领域常用材料，或用常规方法制得，或从市场购买得到。药学可接受的载体部分例子有纤维素及其衍生物(如甲基纤维素、乙基纤维素、羟丙甲基纤维素、羧甲基纤维素钠等)、明胶、滑石粉、固体润滑剂(如硬脂酸、硬脂酸镁)、硫酸钙、植物油(如豆油、芝麻油等)、多元醇(如丙二醇、甘油、山梨醇等)、乳化剂(如吐温)、润湿剂(如十二烷基硫酸钠)、缓冲剂、螯合剂、增稠剂、ph调节剂、透皮促进剂、着色剂、调味剂、稳定剂、抗氧化剂、防腐剂、抑菌剂、无热原水等。
在本发明中，药物组合物的剂型包括(但不限于)口服制剂或注射制剂。
代表性地，所述的组合物的剂型为乳液、片剂、胶囊剂、口服液、颗粒剂、散剂或糖浆剂。
代表性地，本发明所述的组合物、制剂或含钙组合物为饮料或酸奶。
典型地，本发明所述的组合物、制剂或含钙组合物为饮料。本发明所述的葛花提取物能够制备成饮料，通过口服饮料能够简单、方便实现促进钙的口服吸收，从而能够方便实现大众补钙。
在本发明中，饮料并没有特别的限定，例如可以是固体饮料、液体饮料或半固体饮料等等。
在本发明的一个优选例中，所述的饮料还含有钙补充剂，例如葡萄糖酸钙。
代表性地，本发明所述的饮料为健康均衡营养性饮料或运动性饮料。
典型地，本发明所述的饮料可为健康均衡营养性饮料成分，例如，本发明所述的饮料可以含有氨基酸、单糖(如葡萄糖、果糖)、脂肪酸、维生素、电解质(如钙离子、钠离子、钾离子)、蛋黄卵磷脂、钠酪蛋白等营养性成分，在促进钙吸收的同时实现其它营养成分的补充，尤其是适合儿童、老年等群体在补钙的同时，实现均衡营养的补充。
典型地，本发明所述的饮料也可为运动性饮料。运动饮料是根据运动时生理消耗的特点而配制的，可以有针对性地补充运动时丢失的营养，起到保持、提高运动能力，加速运动后疲劳消除的作用。本发明所述的运动性饮料可以包含选自下组的一种或多种成分用于制备运动性饮料：蔗糖、葡萄糖、维生素(如维生素b12、维生素c)、电解质(如钙离子、钠离子、钾离子)、柠檬酸等等。在运动前或运动后服用本发明的运动性饮料，葛花提取物能够促进钙的口服吸收，从而及时补充运动导致的钙流失或钙缺失。
典型地，本发明所述的组合物、制剂或含钙组合物为酸奶。本发明所述的葛花提取物能够制备成酸奶，通过口服酸奶能够简单、方便实现促进钙的口服吸收，从而能够方便实现大众补钙。
酸奶是一种酸甜口味的牛奶饮品，是以牛奶为原料，经过巴氏杀菌后再向牛奶中添加有益菌(发酵剂)，经发酵后，再冷却灌装的一种牛奶制品。市场上酸奶制品多以凝固型、搅拌型和添加各种果汁果酱等辅料的果味型为多。
本发明所述葛花提取物能够促进钙的吸收，因此，将葛花提取物制备成酸奶能够更好地促进对酸奶制品中钙的吸收。
本发明的酸奶包括但不限于酸乳、发酵乳、风味酸乳或风味发酵乳。
酸乳是以生牛(羊)乳或乳粉为原料，经杀菌、接种嗜热链球菌和保加利亚乳杆菌(德氏乳杆菌保加利亚亚种)发酵制成的产品。
发酵乳是以生牛(羊)乳或乳粉为原料，经杀菌、发酵后制成的ph值降低的产品。
风味酸乳的酸奶里除了奶/奶粉，还添加了其他成分，如食品添加剂、果蔬或谷物杂粮等。只要满足奶/奶粉含量超过80％、蛋白质含量≥2.3％即可。
风味发酵乳除了奶/奶粉，接种发酵后，还添加其他成分。
代表性地，本发明所述的酸奶为风味酸乳。风味酸乳的口感更佳适合补钙的主体儿童和老年人，因此，葛花提取物制备成风味酸乳能够更佳有效促进儿童和老年人通过口服酸奶来提高钙的口服补充，治疗钙缺乏症。
在本发明一个优选例中，所述的组合物包括本发明所述的葛花提取物和维生素d。
优选地，所述的维生素d包括维生素d3。
优选地，所述的组合物还包括l-阿拉伯糖。
优选地，所述的组合物还包括碳酸钙。
优选地，所述的葛花提取物与维生素d的比(mg:iu)为(1-40)：(80-320)，较佳地(5-20)：(100-300)，更佳地(5-15)：(150-250)，更佳地(8-12)：(180-220)。
优选地，所述的葛花提取物与碳酸钙的重量比为(1-40)：(500-1200)，较佳地(5-20)：(600-1000)，更佳地(5-15)：(700-900)，更佳地(8-12)：(750-850)。
本发明还提供一种本发明所述组合物的用途，用于制备促进钙口服吸收的制剂。
优选地，所述的钙包括碳酸钙中的钙。
优选地，所述制剂为口服制剂。
在本发明一个优选例中，本发明还提供一种含钙组合物，所述的含钙组合物包括本发明所述的葛花提取物、维生素d和碳酸钙。
优选地，所述的含钙组合物为饮料或酸奶。
优选地，所述含钙组合物的剂型为口服制剂。
优选地，所述的维生素d包括维生素d3。
优选地，所述的葛花提取物与维生素d的比(mg:iu)为(1-40)：(80-320)，较佳地(5-20)：(100-300)，更佳地(5-15)：(150-250)，更佳地(8-12)：(180-220)。
优选地，所述的葛花提取物与碳酸钙的重量比为(1-40)：(500-1200)，较佳地(5-20)：(600-1000)，更佳地(5-15)：(700-900)，更佳地(8-12)：(750-850)。
本发明还提供一种本发明所述的含钙组合物的用途，用于制备(i)预防和/治疗钙缺乏症；和/或(ii)预防和/治疗与钙缺乏相关的疾病的制剂。
优选例中，所述的钙缺乏包括血钙缺乏。
优选例中，所述的钙缺乏症包括血钙缺乏症。
本发明的主要技术效果包括：
1、本发明所述的葛花提取物能够显著提高钙的口服吸收，提高口服钙对钙缺乏症的治疗。
2、本发明所述的葛花提取物与维生素d能够协同促进钙的口服吸收，因此，葛花提取物与维生素d联用能够进一步促进钙的口服吸收，治疗钙缺乏症。
3、本发明所述的葛花提取物能够以饮料或酸奶方式口服促进钙吸收，从而能够提高儿童、老人的服用顺应性。
下面结合具体实施例，进一步阐述本发明。应理解，以下具体实施例以本技术方案为前提，给出了详细的实施方式和具体操作过程，但本发明的保护范围并不限于本实施例。
实施例1
(1)葛花提取物的制备，葛花提取物通过以下方法制备：
(a)称取50g葛花，粉碎后加入400ml60％(v/v)乙醇水溶液后，加热回流提取6h后，过滤，滤液经减压浓缩到100ml，得到浓缩液；
(b)每次用300ml石油醚对步骤(a)得到浓缩液进行萃取，总共萃取两次，合并两次分离得到的石油醚层(即石油醚萃取液)，减压蒸馏除去石油醚，干燥，得到葛花提取物。
(2)考察本实施例制备的葛花提取物对钙吸收促进效果
实验动物
实验动物及其饲养：km小鼠，无特定病原体(specificpathogenfree，spf)级别，雄性，6周龄，适应性饲养1周后用于实验。
实验方法
km小鼠实验前一天晚21:00禁食不禁水，第二天早上8:00将小鼠随机分为实验组1、实验组2、实验组3、实验组4和对照组，每组8只，其中，实验组1的小鼠灌胃给予碳酸钙水悬液(碳酸钙的给药剂量为0.8g/kg体重)，实验组2的小鼠灌胃给予碳酸钙和葛花提取物水悬液(碳酸钙的给药剂量为0.8g/kg体重和葛花提取物的给药剂量为10mg/kg体重)，实验组3的小鼠灌胃给予碳酸钙和维生素d3水悬液(碳酸钙的给药量为0.8g/kg体重和维生素d3的给药剂量为200iu/kg体重)，实验组4的小鼠灌胃给予碳酸钙、葛花提取物和维生素d3水悬液(碳酸钙的给药剂量为0.8g/kg体重、葛花提取物的给药剂量为10mg/kg体重和维生素d3给药剂量为200iu/kg体重)，对照组小鼠灌胃给予生理盐水。各组小鼠在灌胃给药前(0h)和灌胃给药后1h采血，经离心得到血清，采用全自动生化测定仪测定血清中钙离子浓度，给药后各组小鼠禁食不禁水。
统计学分析：
计量采用
(3)实验结果
各组小鼠给药前后血清中的ca2 含量如表1所示：
表1各组小鼠给药前后血清中的ca2 的含量(mmol/l，
与对照组给药后1h相比，*为p<0.05，**为p<0.01。
从表1中可以看出，葛花提取物能够有效促进钙的口服吸收，提高血钙水平。从实施例1-4的数据可以看出，葛花提取物和维生素d3能够协同促进钙的肠道吸收，从而显著提高血钙水平，治疗血钙缺乏症及其相关疾病如骨质疏松。
上述实施例只为说明本发明的技术构思及特点，其目的在于让熟悉此项技术的人士能够了解本发明的内容并据以实施，并不能以此限制本发明的保护范围。凡根据本发明精神实质所作的等效变化或修饰，都应涵盖在本发明的保护范围之内。
1.一种葛花提取物，其特征在于，所述的葛花提取物通过以下方法制备：
(1)用醇溶剂对葛花进行提取，得到醇提取液；
(2)所述的醇提取液经浓缩后，加入有机溶剂进行萃取，将有机相减压蒸馏除去溶剂，得到葛花提取物，其中，所述的有机溶剂包括石油醚、氯仿、乙酸乙酯中的一种或多种。
2.如权利要求1所述的葛花提取物，其特征在于，所述的步骤(1)中，所述的醇溶剂为c1-c4低级醇或c1-c4低级醇水溶液。
3.一种如权利要求1所述的葛花提取物的用途，其特征在于，用于制备组合物，所述的组合物用于促进钙的口服吸收。
4.一种组合物，其特征在于，所述的组合物包括如权利要求1所述的葛花提取物和维生素d。
5.如权利要求4所述的组合物，其特征在在于，所述的组合物还包括l-阿拉伯糖。
6.如权利要求4所述的组合物，其特征在在于，所述的组合物为食品组合物，所述的食品组合物为饮料或酸奶。
7.如权利要求6所述的组合物，其特征在在于，所述的饮料为健康均衡营养性饮料或运动性饮料；
所述的酸奶为酸乳、发酵乳、风味酸乳或风味发酵乳。
8.一种如权利要求4所述的组合物的用途，其特征在在于，用于制备促进钙口服吸收的制剂。
9.一种含钙组合物，其特征在于，所述的含钙组合物包括如权利要求1所述的葛花提取物、维生素d和碳酸钙。
10.一种如权利要求9所述的含钙组合物的用途，其特征在在于，用于制备(i)预防和/治疗钙缺乏症；和/或(ii)预防和/治疗与钙缺乏相关的疾病的制剂。
技术总结