本发明涉及一株雷竹内生芽孢杆菌bacillus sp an8、其用途及其分离方法,属于微生物和生态修复领域。
背景技术:
1、竹子隶属禾本科竹亚科,是集经济、生态、社会效益于一体,以无性繁殖为主的常绿、多年生兼性克隆植物。中国被誉为“竹子王国”,有竹类植物资源39属500多种。竹林面积为641.16万hm2,约占全国森林面积的2.94%。雷竹是我国南方广泛分布的优良笋用竹种,具有培育周期短、易栽培、产量高、出笋早、味道鲜美、经济效益较高等诸多特点。
2、施用化肥可以提高植物产量和质量,但会降低土壤持水能力,降低土壤肥力,增加土壤酸度,减少微生物种群,最终导致土壤养分失衡。微生物肥料作为化肥的有效替代物,是提高农产品产量和品质、促进农业可持续发展的重要途径之一。微生物分布广泛,是物质循环和能量流动的主要参与者,对动植物的生长和健康发挥重要作用。随着微生物资源的不断挖掘与利用,微生物在农林业领域的应用越来越广泛。本发明从雷竹中分离得到了一株雷竹内生芽孢杆菌bacillus sp an8,具有固氮、解无机磷以及产蛋白酶和淀粉酶的功能,可用作土壤修复剂或用于制备土壤修复剂,提高土壤中有机质、总氮、水解性氮、总磷、有效磷和速效钾等的含量。
技术实现思路
1、本发明的第一个目的是提供一株雷竹内生芽孢杆菌bacillus sp an8。
2、本发明的第二个目的是提供一株雷竹内生芽孢杆菌bacillus sp an8的应用,该菌用于土壤修复和促进植物生长。
3、本发明的第三个目的是提供一株雷竹内生芽孢杆菌bacillus sp an8的分离方法。
4、为解决上述技术问题,本发明所采用的技术方案如下:
5、一株雷竹内生芽孢杆菌bacillus sp an8,保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏日期为2023年11月20日,保藏编号为cgmcc no:29065。
6、本发明雷竹内生芽孢杆菌bacillus sp an8,是发明人自行筛选得到的。
7、本发明的雷竹内生芽孢杆菌bacillus sp an8在营养琼脂平板上菌落直径为1-2mm,细菌为圆形,菌落粗糙,不透明,白色。在lb培养液中培养,菌株数量可达1×109cfu/ml以上。
8、本发明提供的雷竹内生芽孢杆菌bacillus sp an8,具有固氮、解无机磷以及产蛋白酶和淀粉酶的功能。
9、上述雷竹内生芽孢杆菌bacillus sp an8的16s rdna核苷酸序列为:
10、tagtttgatttcaggctcaggacgaacgctggcggcgtgcctaatacatgcaagtcgagcggacagatgggagcttgctccctgatgttagcggcggacgggtgagtaacacgtgggtaacctgcctgtaagactgggataactccgggaaaccggggctaataccggatggttgtttgaaccgcatggttcagacataaaaggtggcttcggctaccacttacagatggacccgcggcgcattagctagttggtgaggtaacggctcaccaaggcgacgatgcgtagccgacctgagagggtgatcggccacactgggactgagacacggcccagactcctacgggaggcagcagtagggaatcttccgcaatggacgaaagtctgacggagcaacgccgcgtgagtgatgaaggttttcggatcgtaaagctctgttgttagggaagaacaagtgccgttcaaatagggcggcaccttgacggtacctaaccagaaagccacggctaactacgtgccagcagccgcggtaatacgtaggtggcaagcgttgtccggaattattgggcgtaaagggctcgcaggcggtttcttaagtctgatgtgaaagcccccggctcaaccggggagggtcattggaaactggggaacttgagtgcagaagaggagagtggaattccacgtgtagcggtgaaatgcgtagagatgtggaggaacaccagtggcgaaggcgactctctggtctgtaactgacgctgaggagcgaaagcgtggggagcgaacaggattagataccctggtagtccacgccgtaaacgatgagtgctaagtgttagggggtttccgccccttagtgctgcagctaacgcattaagcactccgcctggggagtacggtcgcaagactgaaactcaaaggaattgacgggggcccgcacaagcggtggagcatgtggtttaattcgaagcaacgcgaagaaccttaccaggtcttgacatcctctgacaatcctagagataggacgtccccttcgggggcagagtgacaggtggtgcatggttgtcgtcagctcgtgtcgtgagatgttgggttaagtcccgcaacgagcgcaacccttgatcttagttgccagcattcagttgggcactctaaggtgactgccggtgacaaaccggaggaaggtggggatgacgtcaaatcatcatgccccttatgacctgggctacacacgtgctacaatggacagaacaaagggcagcgaaaccgcgaggttaagccaatcccacaaatctgttctcagttcggatcgcagtctgcaactcgactgcgtgaagctggaatcgctagtaatcgcggatcagcatgccgcggtgaatacgttcccgggccttgtacacaccgcccgtcacaccacgagagtttgtaacacccgaagtcggtgaggtaacctttatggagccagccgccgaaggtgggacagatgattggggtgaagtcgtaaaaaggggtaacca。
11、上述雷竹内生芽孢杆菌bacillus sp an8可用作土壤修复剂,或用于制备土壤修复剂。
12、上述雷竹内生芽孢杆菌bacillus sp an8可用于提高土壤中有机质、总氮、水解性氮、总磷、有效磷和速效钾等的含量。
13、上述雷竹内生芽孢杆菌bacillus sp an8可用于产生蛋白酶和淀粉酶。
14、上述雷竹内生芽孢杆菌bacillus sp an8可用于固氮。
15、上述雷竹内生芽孢杆菌bacillus sp an8可用解无机磷。
16、上述雷竹内生芽孢杆菌bacillus sp an8的分离方法,包括如下步骤:
17、1)用无菌水冲洗雷竹根系、并用无菌滤纸吸干,在70%的酒精中浸泡1~2min,然后在次氯酸钠溶液中浸泡3~5min,再用无菌水冲洗至经涂板检测无菌后,用无菌吸水纸吸干样品表面的水分;
18、2)将步骤1)所得的雷竹根系剪成1~2cm的小块,并研磨,然用无菌生理盐水用无菌生理盐水稀释10~104倍;
19、3)取各浓度的稀释液分别涂布于lb培养基平板,凉干后倒置恒温箱内28~30℃培养48h,即有菌落出现;
20、4)根据形态、大小或颜色,用接种针挑取单个菌落,在琼脂培养基表面连续划线培养,重复5-6次后便可形成单独孤立的菌落,因而获得纯培养菌株
21、本发明未提及的技术均参照现有技术。
22、本发明雷竹内生芽孢杆菌bacillus sp an8,具有固氮和解无机磷的等能力,同具有产生蛋白酶和淀粉酶等功能,可用作土壤修复剂或用于制备土壤修复剂,提高土壤中有机质、总氮、水解性氮、总磷、有效磷和速效钾等的含量;培养方便,生长速度快;分离方法简单、易操作。
1.一株雷竹内生芽孢杆菌bacillus sp an8,其特征在于:保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏日期为2023年11月20日,保藏编号为cgmccno:29065。
2.如权利要求1所述的雷竹内生芽孢杆菌bacillus sp an8,其特征在于:为圆形;菌落粗糙、且为不透明的白色,菌落直径为1-2mm。
3.如权利要求1或2所述的雷竹内生芽孢杆菌bacillus sp an8,其特征在于:其16srdna核苷酸序列为:
4.权利要求1-3任意一项所述的雷竹内生芽孢杆菌bacillus sp an8的用途,其特征在于:用作土壤修复剂,或用于制备土壤修复剂。
5.如权利要求4所述的用途,其特征在于:用于提高土壤中有机质、总氮、水解性氮、总磷、有效磷和速效钾的含量。
6.权利要求1-3任意一项所述的雷竹内生芽孢杆菌bacillus sp an8的用途,其特征在于:用于产生蛋白酶和淀粉酶。
7.权利要求1-3任意一项所述的雷竹内生芽孢杆菌bacillus sp an8的用途,其特征在于:用于固氮。
8.权利要求1-3任意一项所述的雷竹内生芽孢杆菌bacillus sp an8的用途,其特征在于:用解无机磷。
9.权利要求1-3任意一项所述的雷竹内生芽孢杆菌bacillus sp an8的分离方法,其特征在于:包括如下步骤:
