本发明属于生物医药，具体涉及一种含外泌体抑制剂的温敏肿瘤治疗剂及其在肿瘤免疫治疗中的应用。
背景技术：
1、肿瘤免疫治疗是通过激活机体自身的免疫反应，从而特异性地杀伤肿瘤细胞的一种新兴疗法。其中，以pd-1/pd-l1为代表的免疫检查点阻断疗法（immune checkpointblockade，icb）在肿瘤治疗中取得了巨大的临床突破，使得肿瘤免疫治疗备受关注。然而，单一的免疫检查点阻断疗法仅对少数的肿瘤患者有效。因此，为了进一步提高病人icb治疗的响应率，扩大适应征的使用范围，科研人员逐渐关注联合免疫治疗。
2、在前期研究中，发明人课题组将温热疗法与icb相联合（nature communications,2019,10:4871.）用于冷肿瘤的联合免疫治疗，温热疗法可有效的提高肿瘤微环境的免疫细胞浸润。
3、然而，在前期研究中，发明人发现，温热效应在体内外均会提高肿瘤的pd-l1表达，同时，温热治疗还会加速肿瘤细胞释放外泌体。外泌体是细胞内多泡体与细胞膜融合后释放的囊泡，含有复杂的蛋白质和核酸物质，在细胞之间的交互和调控有重要意义。有研究表明，肿瘤细胞能够分泌表面携带pd-l1的外泌体，这种既存在于肿瘤区域又能释放至血液循环中的肿瘤自我防御式手段，不仅在肿瘤部位耗竭t细胞，消耗治疗性anti-pd-l1抗体，同时可在血液中结合并抑制循环系统中t细胞功能，从而实现肿瘤的免疫逃逸。基于此，发明人认为温热效应联合外泌体抑制剂能够协同缓解肿瘤微环境的免疫抑制性微环境，能进一步提高icb疗法的治疗响应性。
技术实现思路
1、为了解决温热疗法联合icb所带来的免疫抑制性微环境，本发明提供一种含外泌体抑制剂的温敏肿瘤治疗剂，该肿瘤治疗剂能在局部温热治疗的同时释放药物，发挥外泌体抑制作用，并联合免疫检查点阻断疗法。
2、本发明采用以下技术方案：
3、一种温敏肿瘤治疗剂，包括温敏凝胶，所述温敏凝胶内包载有抗体、外泌体抑制剂和光敏剂；
4、所述抗体用作免疫检查点抑制剂，可选如anti-pdl1抗体，anti-ctla4抗体，anti-lag3抗体，anti-vista抗体，anti-tim3抗体，anti-tigit抗体，anti-btla抗体，anti-cd40l抗体，anti-cd47抗体；
5、所述外泌体抑制剂可选gw4869，磺胺异噁唑，奈替康唑，手霉素，替吡法尼，酮康唑，氯咪巴唑，紫草素；
6、所述光敏剂可选石墨烯纳米粒，黑磷纳米粒。
7、本发明中所述温敏凝胶可选本领域常用的温敏凝胶，如泊洛沙姆类水凝胶、聚n-异丙基丙烯酰胺类水凝胶、磷脂/油酯类脂质凝胶。
8、进一步地，所述抗体的质量为温敏凝胶的0.5-3%；所述外泌体抑制剂的质量为温敏凝胶的0.1-0.3%；所述光敏剂的质量为温敏凝胶的0.2-0.5%。
9、在本发明的一个实施例中，所述温敏凝胶为磷脂/油酯类脂质凝胶，所述抗体为anti-pdl1抗体，外泌体抑制剂为磺胺异噁唑，光敏剂为石墨烯纳米粒。
10、在本发明的一个实施例中，上述温敏肿瘤治疗剂的制备方法，包括以下步骤：
11、步骤1，将外泌体抑制剂：光敏剂按质量比10：1混合，超声后得到负载外泌体抑制剂的光敏剂；
12、步骤2，将负载外泌体抑制剂的光敏剂、抗体、磷脂、二油酸甘油酯、表面活性剂按质量比0.3：0.5：41：59：0.003混合，经液氮预冻并冻干，制备得到包载外泌体抑制剂/光敏剂组合物、抗体的脂质冻干粉末；
13、步骤3，将磷脂、二油酸甘油酯按质量比41：59溶解于无水乙醇中，无水乙醇的质量为磷脂和二油酸甘油酯质量之和的10%，制备脂质前体油溶液；
14、步骤4，将等质量步骤2的脂质冻干粉末与步骤3的脂质前体油溶液混合溶解，得到脂质前体油相制剂；
15、步骤5，将步骤4的脂质前体油相制剂注射入水中，得到所述温敏肿瘤治疗剂。
16、一种肿瘤治疗药物，包括上述温敏肿瘤治疗剂。
17、温敏凝胶作为药物储库，当温度高于其相转变点时，可从凝胶态转变为溶胶态，加速药物的释放，当温度低于其相转变点时，可从溶胶态转变为凝胶态，并用于包载亲水性药物、疏水性药物以及两亲性药物。本发明的肿瘤治疗剂选择在温热治疗范围内发生相转变，响应温度释药的原位凝胶作为药物储库；具有二维片层结构的纳米材料既作为光敏剂，又作为外泌体抑制剂的载体，还作为温敏凝胶的释药调控开关，二维片层结构的纳米材料先负载外泌体抑制剂形成组合物，然后再与抗体共同包载于温敏凝胶内。
18、本发明将外泌体抑制剂、光敏剂以及免疫检查点抑制剂包载在温敏凝胶中，实现将外泌体抑制剂联合温热效应协同免疫检查点抑制剂用于肿瘤的联合免疫治疗。
1.一种温敏肿瘤治疗剂，其特征在于，包括温敏凝胶，所述温敏凝胶内包载有抗体、外泌体抑制剂和光敏剂；
2.根据权利要求1所述的温敏肿瘤治疗剂，其特征在于，所述温敏凝胶为泊洛沙姆类水凝胶、聚n-异丙基丙烯酰胺类水凝胶或磷脂/油酯类脂质凝胶。
3.根据权利要求1所述的温敏肿瘤治疗剂，其特征在于，所述抗体的质量为温敏凝胶的0.5-3%；所述外泌体抑制剂的质量为温敏凝胶的0.1-0.3%；所述光敏剂的质量为温敏凝胶的0.2-0.5%。
4.根据权利要求1所述的温敏肿瘤治疗剂，其特征在于，所述温敏凝胶为磷脂/油酯类脂质凝胶，所述抗体为anti-pdl1抗体，外泌体抑制剂为磺胺异噁唑，光敏剂为石墨烯纳米粒。
5.权利要求1-4任一项所述的温敏肿瘤治疗剂在制备肿瘤治疗药物中的应用。
6.一种肿瘤治疗药物，包括权利要求1-4任一项所述的温敏肿瘤治疗剂。
